在細胞培養過程中，經常需要進行細胞消化，所以用於消化細胞的胰蛋白酶對於細胞培養將是不可缺少的，也是非常重要的，它會影響細胞的生長狀態。

胰蛋白酶大致可分為兩種，一種是重組胰蛋白酶，一種是非重組胰蛋白酶。

• 非重組胰蛋白酶是從動物中提取的，具有動物來源，也是傳統用途的胰蛋白酶，常見於動物消化系統，直接從牛或豬的胰腺組織中提取。
• 重組胰蛋白酶是利用基因重組技術生產的，並非源自於動物。

產品介紹及應用

非重組胰蛋白酶（動物來源）

產品特點：

非重組胰蛋白酶（又稱胰蛋白酶）是從牛、羊、豬的胰腺中提取的絲氨酸蛋白水解酶，可特異性地裂解帶正電荷的賴氨酸和精氨酸的羧基末端，經多重結晶純化，再採用層析和超濾技術製備而成，來源具有動物性。

由於胰酶可以作用於跨膜蛋白和細胞外基質中的蛋白，如鈣黏蛋白、整合素等，因此目前常用於解離組織和單層細胞。胰蛋白酶雖然能將細胞間的蛋白質水解物水解成離散的細胞，但不同的組織或細胞對胰蛋白酶的反應有所不同，而分散細胞的活性也與胰蛋白酶的濃度、反應溫度和時間有關，在pH值為7～9、溫度為37℃的條件下胰蛋白酶分散細胞的能力最強。胰蛋白酶溶液中添加EDTA作為螯合劑，將鈣、鎂結合成六齒結構，可減弱細胞與細胞之間的黏附，增強胰蛋白酶對水解靶向肽鍵的獲取。

胰蛋白酶早期在生物製藥領域的主要應用是生產胰島素，很快也開始應用於其他細胞培養領域。血清培養常用動物胰酶，不同細胞添加的胰蛋白酶成分和濃度不同。

應用

1. 胰島素和滅活疫苗的生產；
2. 組織細胞的分離與培養；
3. 臨床和外科用途；
4. 食品工業中的加工助劑；

重組胰蛋白酶（非動物來源）

產品功能

重組胰蛋白酶是利用基因工程技術生產的酶，具有穩定性好、純度高、無動物來源等優點。在現代生物製藥生產過程中，使用含有動物來源的原料，可能會將引發人畜共患疾病的潛在病毒源帶入產品中，如瘋牛病BSE、口蹄疫病毒等，為了減少污染源，透過基因工程技術合成胰蛋白酶，解決了傳統的豬或牛胰蛋白酶可能帶來的病毒污染風險。

重組胰蛋白酶多為重組大腸桿菌或酵母菌系統重組表達，並經多步驟層析純化，不含糜蛋白酶等雜酶污染。重組胰蛋白酶具有與天然萃取的胰蛋白酶相同的性質，其胺基酸序列與豬胰蛋白酶序列同源，能特異性地裂解多肽鏈中離胺酸和精胺酸殘基上的羧基。由於其無動物源污染、純度高，在藥物開發、生物化學研究、蛋白質體學等領域有廣泛的應用。

市面上主流的重組胰蛋白酶是利用DNA重組技術在大腸桿菌或酵母菌中表現的重組豬胰蛋白酶，其胺基酸序列與豬胰蛋白酶完全一致，具有與天然胰蛋白酶相同的活性與特異性。它由223個氨基酸組成，含有6對二硫鍵。此酵素含有兩種活性形式的胰蛋白酶：α-胰蛋白酶和β-胰蛋白酶。其活性被絲胺酸蛋白酶抑制劑如PMSF、TLCK，金屬離子螯合劑如EDTA等抑制。

應用

1. 疫苗和重組胰島素生產；
2. 準備用於細胞分析的組織樣本；
3. 免疫細胞治療；
4. 生物製藥生產；
5. 蛋白質序列、結構和組學研究

產品詳細比較

產品	非重組胰蛋白酶（動物來源）	重組胰蛋白酶（非動物來源）
物品	40123ES（酚紅(-),EDTA(+)） 40124ES（酚紅(-),EDTA(-)） 40126ES（酚紅(+),EDTA(-)） 40127ES（酚紅(+),EDTA(+)）	40512ES 20416ES（MS-安全）
來源	取自牛、豬、羊的胰腺	大腸桿菌（40512ES） 畢赤酵母（20416ES）
安全	潛在病原體污染	無外源病毒污染
純度	1:250胰蛋白酶溶液中90%以上為雜質	高純度（β-胰蛋白酶≥70%， α-胰蛋白酶≤20%）
消化細胞類型	大多數連續的強黏附細胞系	大多數連續的強黏附細胞系
糜蛋白酶限量	每 2500 單位胰蛋白酶中所含糜蛋白酶不得超過 50 單位。	無黑芥子酶等雜質酶污染
具體活動	≥2500 USP 單位/毫克蛋白質	≥3800 USP 單位/毫克蛋白質
消化作用	不穩定	消化能力強，酵素含量低
自切率	容易自切割並產生自切割碎片，影響質譜分析結果	容易自切割並產生自切割碎片，影響質譜分析結果
溶解液	含或不含 Ca2+、Mg2+ 的 HBSS 溶液	含有或不含 Ca2+ 和 Mg2+ 的 HBSS 溶液（40512ES）； 1 mM 鹽酸（20416ES）
細胞存活	普通的	普通的
是否需要凍融	是的	是的

除了細胞消化中最常用的胰蛋白酶外，還有許多其他類型的消化酵素產品也可以使用，例如以下。

關於膠原蛋白酶的應用領域

膠原蛋白酶是一種能特異識別Pro-X-Gly-Pro序列並裂解該序列中中性氨基酸（X）和甘氨酸（Gly）之間肽鍵的肽酶內切酶，膠原酶是唯一能降解三鏈超螺旋結構的天然膠原原纖維的蛋白酶，並能有效水解結締組織和上皮組織細胞外基質中的其他蛋白質、多醣和脂質，使本產品非常適合消化。

1. 膠原蛋白酶I.，常用作上皮細胞、肝、肺、脂肪和腎上腺組織細胞的製劑；
2. 膠原蛋白酶II，用於製備心臟、骨骼、肌肉、肝臟、甲狀腺和軟骨等組織來源的細胞；
3. 膠原蛋白酶III，常用於乳腺細胞的製備；
4. 膠原蛋白酶IV，常用於胰島細胞的製備，或用於需要維持受體完整性的細胞製備實驗。
5. 膠原蛋白酶V.，適用於分離胰島細胞和結締組織細胞。

關於複合胰蛋白酶的應用領域

Accutase 是一種含有蛋白水解酶和膠原酶活性的細胞消化液，是胰蛋白酶-EDTA 消化液的完美替代品，用於消化來自傳統組織培養容器和貼壁培養容器的細胞。 Accutase適用於組織解離和細胞分離，分離出的細胞保留了完整的表面抗原，不含有任何動物或細菌來源的成分，可以滿足後續實驗如細胞表面標記、病毒生長分析、流式細胞儀和生物反應器相關檢測等的要求。

胰酶替代品的應用領域

PerfCell Tryzyme™ Express酶產品純度高，對細胞損傷小，消化溫和，可在室溫下穩定保存，是不同細胞系培養理想的消化酶。該類產品不需要使用胰蛋白酶抑制劑進行滅活，且不含動物來源，對一些無血清生長貼壁細胞實驗較為友善。

關於dispase的應用領域

分散酶II（Dispase II）分散酶II是一種非特異性金屬蛋白酶，在細胞生物學中常用於從不同的組織或器官中分離單一細胞，並用於後續的細胞培養，如原代細胞的分離，細胞傳代等，也可用於消除懸浮細胞培養過程中出現的細胞聚集現象。與細胞生物學中常用的其他蛋白酶（例如胰蛋白酶、膠原蛋白酶、鏈黴蛋白酶等）相比，此酵素具有以下優點：

1. 快速、有效、溫和的細胞消化酶，對細胞損傷小，且能維持細胞膜的完整性；
2. 源自於細菌，無支原體或其它動物病毒污染；
3. 穩定性強，不受溫度、pH及血清成分的影響；
4. 可用於多種類型的組織和細胞的分離。

相關產品推薦

目錄編號	產品名稱	尺寸
40123ES60	PerfCel™l 胰蛋白酶-EDTA（0.25%），酚紅	100 毫升
40124ES60	PerfCell™ 胰蛋白酶-不含 EDTA（0.25%）、不含酚紅	100 毫升
40126ES60	PerfCell™ 胰蛋白酶 (0.25%)、酚紅	100 毫升
40127ES60	PerfCell™ 胰蛋白酶-EDTA（0.25%）、酚紅	100 毫升
40101ES25	胰蛋白酶1：250（粉末）	25 克
40512ES10/60	PerfCell™重組胰蛋白酶（粉末）	10 毫克/100 毫克
20416ES60	重組胰蛋白酶（MS-SAFE）	100 微克
40134ES60	PerfCell Tryzyme™Express	100 毫升
40135ES60	PerfCell Tryzyme™Express	100 毫升
40506ES60	艾庫特	100 毫升
40104ES60/80	分散酵素Ⅱ	100毫克/1克