隨著 頁蛋白質 s科學、蛋白質純化技術在生物研究領域和生物技術產業中扮演越來越重要的角色。作為一項核心技術，它涉及透過基因工程的方法將目標蛋白質的編碼訊息整合到宿主細胞中，從而誘導其高效生產所需的蛋白質。隨後進行一系列複雜的體外操作步驟，以實現蛋白質的高純度萃取。蛋白質純化使科學家能夠分離單一類型的蛋白質，這對於深入研究蛋白質的結構和功能、開發新藥、疾病診斷以及推動生物技術的應用至關重要。該技術不僅保證了科學實驗的準確性，也不斷推動生命科學的發展。
圖1.親和層析示意圖[1]
在蛋白質工程領域，融合標籤是一種強大的工具，它可以透過與目標蛋白質結合來實現各種實驗目的。下表列出了常見Fusion標籤的功能，供參考。 然而，這些標籤在發揮最初的輔助功能後一旦殘留在融合蛋白上，就可能對後續實驗產生不利影響，例如乾擾動物免疫學實驗或影響蛋白質的生物活性。因此，去除這些不必要的融合標籤對於確保蛋白質的正常功能和實驗的準確性至關重要。
表1. 常見融合標籤功能及酵素切方法介紹
| 融合標籤 | 尺寸 （KD一個） | 功能 | 常見的酶切方法 |
| 他的 | 0.84 | 有利於純化，可純化可溶性/包涵體蛋白。 | TEV蛋白酶 |
| 旗幟 | 1.01 | 與F融合的目的蛋白落後 標籤可以被F抗體識別落後，使得含有 F 的融合蛋白落後 tag可用Western Blot、ELISA等方法檢測與辨識。 | 腸激酶 |
| 消費稅 | 二十六 | 增強蛋白質溶解度，只能純化可溶性蛋白質，屏蔽毒性蛋白質。 | 凝血酶 |
| 骨髓移植 | 44.4 | 增強蛋白質溶解度 並屏蔽有毒蛋白質。 | TEV蛋白酶 |
| 新加坡國民大學 | 55 | 增強蛋白質溶解度 並屏蔽有毒蛋白質。 | 凝血酶 |
| 相撲 | 11.2 | 增強蛋白質的溶解性，促進蛋白質的水解 水解，提高蛋白質的穩定性。 | SUMO蛋白酶 |
今天，我們很高興向您介紹一種高效、精確去除融合標籤的尖端產品 - UCF.ME商標 rTEV 蛋白酶。此酵素實驗流程簡單、易於操作，可以方便地切除融合蛋白中不需要的標籤，從而獲得高純度的目標蛋白。
緬因大學商標 重組病毒蛋白酶
TEV 蛋白酶是一種廣泛用於切割重組蛋白融合標籤的蛋白酶，以其高度的位點特異性而聞名。它嚴格識別七個氨基酸序列EXXYXQ↓（G/S），並在谷氨酰胺和甘氨酸或絲氨酸之間進行精確的裂解。最常見的七胺基酸序列是 Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly。這種特異性確保了蛋白質處理過程的準確性和效率。
圖2. TEV蛋白酶作用機理示意圖[2]
緬因大學商標 rTEV 蛋白酶是一種經過基因工程改造和精細純化的重組蛋白酶。它不僅保留了天然TEV酶的全部功能活性，而且在更寬的溫度範圍內表現出優異的穩定性和特異性。 這 宿主 gDNA 殘基 的他的產品是 非常 低，確保實際應用中蛋白融合標籤有較高的切割效率，並有效降低引入外源物質殘留的風險。 緬因大學商標 rTEV蛋白酶在pH 7.0和30°C的條件下表現出最佳活性。但即使在pH值6.0-8.5和溫度4-30°C的廣泛條件下，它仍能保持活性，以滿足不同蛋白質加工的要求。值得一提的是，UCF.ME商標 rTEV Protease的N端帶有6×His標籤，可利用Ni-NTA樹脂高效去除此標籤，從而實現目標蛋白的精準純化。
性能展示
1. 切割效率高：蛋白質標籤切割更徹底
使用含有 UCF.ME 的融合蛋白（3 μg）商標 rTEV蛋白酶切割位點作為底物，UCF.ME商標 分別加入10、5、3 U rTEV Protease，30 ℃反應1 h。以瓊脂糖凝膠電泳檢測切割效果。結果表明，Y伊森的 UCF.ME商標 當投入量大於3U時，rTEV Protease就能有效率地切割底物，切割效率可達90%以上。
圖3. UCF.ME酶切活性驗證商標 重組病毒蛋白酶
2. 低宿主gDNA殘留：有效降低引入外源性物質殘留的風險
透過測試主機（大腸桿菌) 不同批次 UCF.ME 中的 gDNA 殘留量商標 rTEV Protease，結果表明，宿主 gDNA 殘基 UCF.ME商標 rTEV 蛋白酶遠低於<1 拷貝/U。
圖4. UCF.ME中宿主gDNA殘基檢測結果商標 重組病毒蛋白酶
3. 適用條件廣泛：能夠滿足不同蛋白質的加工需求。
透過驗證UCF.ME的切割活性商標 rTEV Protease在不同條件下的活性分析結果顯示UCF.ME商標 rTEV蛋白酶在4-30℃條件下均具有較強的活性，可滿足客戶不同的應用需求。
| 反應時間 （時長） | 不同溫度下的裂解活性 （％） | |||
| 4℃ | 16℃ | 21℃ | 30℃ | |
| 1 | 三十四 | 58 | 56 | 85 |
| 2 | 58 | 80 | 78 | 90 |
| 3 | 71 | 99 | 99 | 99 |
| 3.5 | 84 | 99 | 99 | 99 |
是伊森推薦的融合標籤切割蛋白產品
| 產品 姓名 | 產品 否棕色 | |
| 測試車輛 蛋白酶 | 緬因大學商標 重組病毒蛋白酶 | 20427ES |
| 腸激酶 | 重組腸激酶 | 20395ES |
| SUMO蛋白酶 | SUMO蛋白酶 | 20410ES |
| 3C蛋白酶 | 3C蛋白酶 | 20409ES |
參考：
[1] Parikh I，Cuatrecasas P.親和色譜法[J].Vox Sanguinis，1972，23(1-2):141-146.DOI：10.1159/000466530。
[2] Paththamperuma C, Page R C. 螢光淬滅測定 TEV 蛋白酶活性[J]。分析生物化學，2022，659：114954。