非洲豬瘟病毒 - 總主混合物/直接擴增 qPCR 解決方案
非洲豬瘟(ASF)是由非洲豬瘟病毒(ASFV)感染家豬或野豬引起的急性、重度、高度傳染性的傳染病。其發病率和死亡率可達100%,嚴重危害全球養豬業,造成難以估量的經濟損失。世界動物衛生組織(OIE)將其列為應通報的動物疾病。
目前,非洲豬瘟尚無疫苗和有效治療方法。透過實驗室診斷方法快速且準確地診斷非洲豬瘟對於防止疾病傳播至關重要。 OIE 建議將 qPCR 作為 ASF 常規診斷的主要工具。
圖 1.
解決方案 I:TaqMan Multiplex qPCR Master Mix(UDG plus)(詢問)
產品特性
👍UDG防污染系統,有效防範氣溶膠污染風險
👍預混PCR溶液(master mix+引子+探針)在室溫下長期穩定,大大簡化了檢測難度
👍擴增效率高、重複性佳
👍適用於多平台、多系統
案例展示
👉預混PCR溶液的長期穩定性
使用Cat#13171配置在ASF質粒系統擴增中可37℃放置7天,並反覆凍融15次的預混PCR溶液。結果顯示PCR溶液在37℃放置7天後Ct值及靈敏度無明顯變化,重複凍融15次後Ct值無明顯變化。
圖 2. Cat#13171 TaqMan Multiplex qPCR Master Mix (UDG plus)(查詢)用於ASF質粒體系擴增的預混PCR溶液中具有長期穩定性。 2A-37℃ 0天和7天的Ct值 2B-37℃ 0天和7天的靈敏度 2C-15次凍融後的穩定性
👉穩定且可重複的試劑
選取四個不同批次的Cat#13171重複20次ASFV質粒系統擴增實驗。 Ct值沒有顯著差異,CV小於1%。
圖 3.重複性測試
👉多平台多系統適用
圖 4. Bio-Rad CFX96 實時 PCR 系統
圖 5. ABI Q5 實時 PCR 系統
圖 6. Slan 實時 PCR 系統
解決方案二:通用 TaqMan 多重 qPCR 預混液
產品特性
👍對血液雜質耐受性強,可與
👍超高靈敏度達3份/反應,大幅提升檢測準確率
👍預混PCR溶液(Master Mix+引子+探針)在室溫下長期穩定,大大簡化了檢測難度
案例展示
👉對血液雜質耐受性強
與其他品牌的同類產品相比,
圖 7. Cat#11211 通用 TaqMan 多重 qPCR 預混液 和不同品牌的主混合物用於 ASF qPCR 溶液,分別補充 3 mM EDTA(3A)、6 mM 檸檬酸鈉(3B)、0.5% 血液(3C)。
👉超高靈敏度,3 份/反應
針對不同品牌的產品進行了20次重複的ASFV質粒擴增。實驗結果表明
圖8. 不同品牌同類產品偵測率對比(最終系統中有3份拷貝)
👉長期穩定性,常溫下可穩定7天
ASFV/ACT雙質粒系統PCR溶液在4℃、25℃、37℃條件下放置7天後仍能維持穩定性能。可以看出Ct值和螢光值沒有明顯變化。
圖9. PCR溶液的穩定性
解決方案三: 等溫擴增
產品特性
👍擴增效率高
👍高產量擴增
👍dUTP 耐受性,可與 Cat#10303 尿嘧啶 DNA 糖基化酶 (UDG/UNG) 結合使用(查詢),熱不穩定,1 U/μL,以防止氣溶膠污染的風險
案例展示
👉進口品牌 N* 產品的更優質替代品
擴增過程使用來自
圖10. 不同品牌的擴增曲線
訂購產品
類別 | 產品描述 | 產品名稱 | 庫存單位 |
萃取 | 磁珠擷取 | 核酸釋放試劑V2(查詢) | 13720ES |
qPCR 混合物 | 預混料穩定 | Hieff Unicon™ TaqMan Multiplex qPCR Master Mix (UDG plus)(查詢) | 13171ES |
高靈敏度 | 11211ES | ||
酵素及抗體 | 塔克 | Hieff UNICON™ HotStart Direct Taq DNA 聚合酶(查詢) | 10717ES |
Taq抗體 | 31303ES | ||
布施 | 14402ES | ||
Hieff™ Bst Plus DNA 聚合酶(2000 U/μL)(查詢) | 14403ES | ||
聯合發展集團 | 尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG),不耐熱(查詢) | 10303ES |