猴痘病毒檢測整體解決方案 Yeasen

5月初,英國通報首例猴痘確診病例,隨後疾病迅速在非流行國家和地區爆發。截至2022年9月21日,全球已有106個國家確診,累計6,3117例。 9月16日,重慶確診一例輸入性猴痘病例,為中國內地首例病例,引發社會關注。

Figure 1. 2022 Monkeypox Outbreak Global Map(From the CDC)

圖 1. 2022 年猴痘疫情全球地圖(來自 CDC)

1. 什麼是猴痘?
2. 猴痘的歷史
3. 傳播方式
4. 徵兆和症狀
5. 檢測方法
6. 產品匹配
7. 產品訂購

1. 什麼是猴痘?

猴痘病毒是一種雙股DNA病毒,全長約197kb。它屬於痘病毒科正痘病毒屬。病毒).猴痘病毒有兩個分支(西非分支和剛果盆地分支)。其中西非支系病死率約3.6%,剛果盆地支系病死率可達10.6%。 2022 年 5 月以來在非流行地區發現的猴痘病例樣本,定序分析顯示西非演化支[1]

Figure 2. Monkeypox picture (picture from CCDC)

圖2. 猴痘圖片(圖片來自CCDC)

2. 猴痘的歷史

猴痘是於 1958 年在用於研究的猴群中兩次爆發類似痘的疾病而被發現的。儘管被命名為“猴痘”,但該疾病的來源仍然未知。然而,非洲囓齒動物和非人類靈長類動物(如猴子)可能攜帶病毒並感染人類[2]
1970 年記錄了第一例人類猴痘病例。此前,非洲以外地區幾乎所有的猴痘病例都與前往該疾病常見國家的國際旅行或透過進口動物有關。這些案件發生在多個洲[2]

3. 傳播方式

它可以從動物傳播給人類,從人類傳播給人類,以及從環境傳播給人類。
現已明確,猴痘可以透過3種途徑感染人:一是由受感染的動物傳染給人。病毒可能會透過破損的皮膚、呼吸道或黏膜(眼睛、鼻子或嘴巴)進入人體。第二種是透過人與人之間的密切接觸傳播,包括性交、接吻、擁抱,或觸碰患猴痘的身體部位,以及接觸被病毒污染的衣物、床上用品、毛巾或餐具等也可能被感染的物品。三是呼吸道飛沫傳播[3]

4. 徵兆和症狀

主要臨床表現為發燒、皮疹、淋巴結腫大。
早期最常見的症狀包括發燒、頭痛、肌肉疼痛和淋巴結腫大。發病後1~3天出現皮疹。典型的皮疹首先出現在臉部,逐漸蔓延至四肢等部位。皮疹多呈離心性。,臉部及四肢皮疹較軀幹多見,手掌、腳底也可出現皮疹,皮疹數量從數個至數千個不等;它還可能涉及口腔黏膜、消化道、生殖器、結膜和角膜。
症狀一般持續 14 至 21 天,患者通常會自行緩解。結痂脫落後,可能會留下紅斑或色素沉著,甚至留下疤痕。值得注意的是,結痂會一直具有傳染性,直到結痂脫落並在下面形成新的皮膚層[3]

5. 檢測方法

為有效防控猴痘疫情,阻止病毒輸入蔓延,全球IVD企業積極回應。作為IVD檢測試劑生產原料供應商 和試劑溶液, Yeasen 提供完整的解決方案,幫助有效檢測猴痘病毒。從核酸萃取到試劑組分(酵素試劑和假病毒)以及半成品試劑盒(引子探針、酵素試劑和質粒對照), Yeasen 可以穩定地為您提供供貨。

Figure 3. Virus detection method

圖3. 病毒檢測方法

5.1 方法優勢

  • 操作高效便捷—一套試劑盒,包含所有組件,無需繁瑣操作,一步添加
  • 檢測靈敏度高—基因轉殖抗體法熱啟動Taq酶,1拷貝/反應也能偵測到
  • 試劑穩定性強—37℃保存1週,反覆凍融後性能穩定
  • 預防UDG污染—系統中添加了dUTP/UDG系統,有效防止氣溶膠污染的風險。
  • 適用於多種平台-適用於 Bio-Rad CFX96、ABI Q5 和 Slan

5.2 產品匹配

  • 核酸萃取試劑:MolPure™ 磁性拭子病毒 DNA/RNA 試劑盒(Cat#18300ES)
  • 猴痘檢測試劑: 猴痘病毒即時 qPCR 試劑盒(編號 13862ES/編號 13863ES)
  • 猴痘假病毒:猴痘病毒假病毒(Cat#12099ES/Cat#12100ES)

6. 產品推薦

6.1 猴痘病毒即時螢光定量PCR試劑盒(Cat#13862ES)

產品優勢:
操作高效便捷
靈敏度高、特異性好
超強穩定性
重複性好

6.1.1案例展示:

  • 37℃超強熱穩定性

將 Cat#13862ES 置於 37℃ 下 7 天,擴增 MPXV。結果顯示,37℃放置7天Ct值及螢光值無明顯影響,熱穩定性強。

Figure 4. Yeasen(Cat#13862ES)37℃ accelerated 7-day stability verification

圖 4. Yeasen (Cat#13862ES) 37℃加速7天穩定性驗證

  • 超強凍融穩定性

將Cat#13862ES在-20℃凍融,可分別擴增MPXV 10倍、20倍、50倍。結果顯示,在-20℃條件下凍融10次、20次、50次對Ct值及螢光值無明顯影響,凍融穩定性強。

Figure 5. Yeasen(Cat#13862ES)-20℃ freeze-thaw stability verification

圖 5. Yeasen(Cat#13862ES)-20℃凍融穩定性驗證

  • 超高靈敏度,1 Copies/μL亦可檢測

使用 Yeasen 使用猴痘產品(Cat#13862ESES)、1000 拷貝/μL、100 拷貝/μL、10 拷貝/μL、1 拷貝/μL 和陰性空白(NTC)檢測 MPXV。可見單拷貝也能偵測到(Ct值在38左右),且48孔NTC重複檢測,基線穩定,NTC峰為陰性,無拖尾現象,敏感度高,特異性強。

Figure 6. MPXV sensitivity detection

圖 6. MPXV 靈敏度偵測

Figure 7. MPXV specificity detection

圖 7. MPXV 特異性偵測

  • 試劑穩定且可重複

Yeasen 選用猴痘檢測試劑盒(Cat#13862ESES),對低、中、高濃度陽性樣本進行10次重複檢測。結果顯示,FAM通道中陽性樣本的CV≤2%,空白對照無出峰、無拖尾現象。 ,重複性好。

Figure 8. Repeatability Test

圖 8. 重複性測試

6.2 猴痘病毒即時 qPCR 試劑盒 (UDG Plus)(編號:13863ES)

產品優勢:

1. 操作高效便捷
(2)靈敏度高、特異性好
3.超強穩定性
⑷ 重複性好
⑸ UDG污染防治

6.2.1案例展示:

  • 37℃超強熱穩定性

將 Cat#13863ES 分別置於 37℃ 培養 7 天和 14 天,擴增 MPXV。結果顯示,37℃放置7天和14天後,Ct值和螢光值均無明顯影響,熱穩定性強。

Figure 9. Yeasen(Cat#13863ES)37℃ accelerated 7-day, 14-day stability verification

圖 9. Yeasen(Cat#13863ES) 37℃加速7天、14天穩定性驗證

  • 超強凍融穩定性

將 Cat#13863ES 在 -20℃ 凍融 50 次,以擴增 MPXV。結果顯示,在-20℃下凍融50次,對Ct值及螢光值無明顯影響,凍融穩定性強。

Figure 10. Yeasen(Cat#13863ES)-20℃ freeze-thaw stability verification

圖 10. Yeasen(Cat#13863ES) -20℃凍融穩定性驗證

  • 高靈敏度和特異性

使用 5 拷貝/μL 的 MPXV 和陰性空白 (NTC) 進行檢測 Yeasen 猴痘產品(Cat#13863ESES)。結果顯示:此方法基線穩定,FAM的檢出率為100%,最低檢出限為5拷貝/μL,且在NTC的48孔重複檢測過程中,FAM和VIC通道基線穩定,NTC陰性峰無任何拖尾現象,具有較高的靈敏度和特異性。

Figure 11.MPXV Sensitivity detection

圖11.MPXV靈敏度檢測

Figure 12. MPXV specificity detection

圖 12. MPXV 特異性偵測

  • 試劑線性良好

將陽性模板從1×105拷貝/μL濃度稀釋10倍, Yeasen 使用 qPCR 猴痘試劑盒(Cat#13863ES)重複檢測兩次。以初始拷貝數的對數為橫座標,Ct值為縱座標。製作標準曲線,結果顯示猴痘基因FAM通道線性範圍為10~1×105拷貝/μL,R2>0.99,具有良好的線性關係。

Figure 13. Linearity Test

圖 13. 線性測試

  • 穩定且可重複的試劑

Yeasen 選用qPCR猴痘試劑盒(Cat#13863ES),對低、中、高濃度陽性進行10次重複檢測,對陰性對照(NC)及空白對照(NTC)進行20次重複檢測。結果顯示:FAM通道陽性樣本的CV小於3%,陰性對照、空白對照無出峰、無拖尾現象; VIC通道NC的Ct值皆小於35,CV小於0.3%,NTC無峰化、無拖尾現象,重複性佳。

Figure 14. Repeatability Test(FAM)

圖 14. 重複性測試(FAM)

Figure 15. Repeatability Test(VIC)

圖15.重複性測試(VIC)

7. 產品訂購

Yeasen 生技(上海)有限公司成立於2014年,是一家從事工具酵素原料及抗原抗體研發、生產的高新技術企業。其產品包括用於醫藥、食品安全檢測、育種、司法等產業的分子診斷酵素、蛋白質和抗體。我們致力於為生命科學領域的客戶提供高品質的產品和服務。猴痘病毒的產品購買指南如下:

表 1.相關產品

產品類型

產品 描述

產品 姓名

商品編號

規格

成套工具

酵素混合物

猴痘病毒即時 qPCR 試劑盒(諮詢)

13862ES03

24T

13862ES48

48噸

13862ES59

96T

猴痘病毒即時 qPCR 試劑盒

13863ES25

25噸

13863ES60

100噸

13863ES80

1000噸

假病毒

F3L 基因

猴痘病毒 F3L-假病毒 (諮詢)

12099ES03

1 毫升

12099ES08

5 × 1 毫升

B6R 基因

猴痘病毒B6R-假病毒 (查詢)

12100ES03

1 毫升

12100ES08

5 × 1 毫升

參考

[1] 中國疾病預防控制中心:猴痘健康提示
[2] CDC:關於猴痘 |猴痘 |痘病毒 |疾病管制署
[3] 玉林晚報:中國大陸首例猴痘病例來源已經確定!廣西疾控緊急提醒

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