新一代定序（NGS）技術因檢測靈敏度高、特異性強、可定性、定量檢測等特點，在病原體檢測、腫瘤突變檢測、生殖遺傳等領域展現出極為廣大的臨床和科研應用前景。 文庫建置作為NGS的核心步驟，直接影響定序品質。 根據體外診斷（IVD）產品註冊審查指南，需提供主要原料的研究資料。應結合原料的基礎資訊、參數指標、供應來源等因素進行綜合分析論證，以確定最適合的原料來源。 常規DNA及RNA文庫建構過程主要包括cDNA合成、DNA片段化、接頭連接、文庫擴增等關鍵步驟， 各個步驟包含多種類型的原料酵素。原料酵素的篩選程度延長了研發週期。 在此基礎上，性價比高、操作簡便的建庫模組產品成為了IVD產品開發的新選擇。
圖1. 常規DNA文庫建構流程（左）與RNA文庫建構流程（右），以Illumina平台為例
逆轉錄合成是核心部分 RNA 定序， 新的 高類型 高效逆轉錄酶，集高靈敏度、高 屈服 cDNA的轉錄調控機制及其與複雜結構模板的相容性是目前研究的熱點。 ZymeEditor™酵素修飾平台
圖2. 13488ES在RNA-seq的應用效果
由於定序平台讀長較短，建庫前需將DNA隨機片段化。 早期酵素碎裂研究面臨許多困難，有均勻性和偏差性問題。
圖3. 不同DNA片段化酶的片段化效果：強力片段化酶（左）與溫和片段化酶（右）
文庫轉換率是評估文庫品質的重要指標,較高的文庫轉換率一定程度上意味著文庫豐富度較好、定序資料的一致性較好。 常規T4 DNA連接酶著重優化高效連接，但片段容易發生自連接，進而降低文庫轉化率，影響文庫豐富度與定序品質。 這
圖 4. 熱穩定性與接頭殘基分析 12996ES
NGS 文庫製備方法中需要所有 PCR 擴增酶。 大多數高保真 DNA 聚合酶具有 5'→3' 聚合酶活性和 3'→5' 外切酶活性， 它可以在 5'→3' 方向合成 DNA，同時修正錯誤摻入的鹼基， 因此，它能夠快速、高保真地擴增 DNA 片段。 但很少有酵素專門為NGS設計， 目前，既高效、精準、特異，又能無偏向性擴增不同大小和GC含量的靶標，同時具備提前預混引子能力的文庫擴增產品並不多。
圖5. 12980ES穩定性及擴增誤差率分析
除以上系列NGS建庫模組產品外， 我們也提供一站式原料酵素產品， 滿足不同客戶的組合需求。
| 產品類別 | 產品名稱 | 貨號 | 評論 |
| 高效 cDNA 合成 | 希菲爾™ 超逆轉錄酶（200 U/μL） | 14604ES | 逆轉錄酶 |
| 希夫NGS™ 雙股cDNA合成試劑盒 | 13488ES | cDNA合成模組 | |
| 脫氧核糖核酸 碎片化、末端修復和 A 尾 | 希夫™ 斯瑪特酶 | 12907ES | DNA碎片酶 |
| 12619ES | 脫氧核糖核酸 碎片化、末端修復和 A 尾模組 | ||
| 修復和尾礦處理 | Hieff NGS® 快速末端修復/dA-Tailing 模組 | 12608ES | 末端修復和尾部修復模組 |
| 接頭連接 | 10299ES | T4 DNA連接酶 | |
| 文庫擴增 | 2× Ultima HF 放大混合物 | 13344ES | 高保真酶 |