1、背景

rRNA在生物體總RNA中佔很高的比例,但所能提供的有效資訊卻很少。這些RNA會產生大量無效數據,對於獲取生物資訊的研究意義不大。同時,rRNA比例較高,使得mRNA在轉錄本中相對豐度較低,進而影響低豐度轉錄本的檢測。因此,在常規RNA定序(RNA-SEQ)中,有效去除rRNA對於實現經濟高效的RNA定序至關重要。

2、產品描述

(1)MaxUp系列,rRNA去除試劑盒

MaxUp系列rRNA去除試劑是基於RNase H消化,從樣本的總RNA中移除核醣體RNA(rRNA),以保留信使RNA(mRNA)和其他非編碼RNA。樣品種類豐富,起始量廣,整個過程耗時小於2h,人工操作時間小於10min。同時,無論是對於常規樣本還是低品質樣本(如FFPE),都可以高效去除rRNA,顯著提高測序數據中的有效數據信息,實現RNA樣本的經濟高效測序。

(2)MaxUp系列rRNA去除工藝

目前RNase消除是rRNA去除的主要方法,特別是對於一些RNA降解樣本(如FFPE樣本),RNase消除更能反映其優勢。

圖1. MaxUp系列rRNA去除原理示意圖

三、產品性能展示

(1)植物樣本

利用RNase H消化去除植物總RNA中的核醣體RNA,以qPCR比較去除前後rRNA基因和mRNA基因表現的變化。結果顯示該產品能有效去除植物中的rRNA。

圖. 2. 取1μg擬南芥葉片RNA進行rRNA移除,qPCR比較移除前後rRNA基因及mRNA基因表現變化

(2)人/大鼠/小鼠樣本

利用RNase H消化去除植物總RNA中的核醣體RNA,建立文庫並送去定序。數據分析顯示該產品可以有效去除此類樣本中的rRNA。

圖3. 取人、小鼠、大鼠1μg總RNA作為樣品,去除rRNA後定序分析rRNA殘留量

(3)低品質RNA樣本(如FFPE RNA)

低品質樣本中往往會存在較大比例的ITS/ETS序列(參考下圖中FFPE RNA:DV200=20%),而這部分序列也會產生大量的無效數據,因此透過在低品質樣本中添加ITS/ETS探針,可以進一步有效富集目標序列。本產品除了常規的45S Pre-rRNA探針外,還增加了針對Human 45S ITS/ETS區域的探針設計,保證低品質樣本中的rRNA去除更加高效,且不影響常規樣本中rRNA去除效果。

圖 4.加入 ITS/ETS 探針前後 rRNA 殘基與 ITS/ETS 殘基的比較

4.訂購信息

電視類型

產品名稱

產品代碼

產品規格

rRNA去除 成套工具

希夫NGS商標 MaxUp 人類 rRNA 去除試劑盒(rRNA & ITS/ETS)

12257ES08/24/96

96年8月24日

希夫NGS商標 MaxUp rRNA 耗竭試劑盒(植物)

12254ES08/24/96

8/24T/96T

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