核酸是一切分子生物學研究的基礎。而且,萃取的核酸的品質也是決定下游實驗成敗的關鍵因素之一。在開發核酸萃取試劑時,除了常規的化學成分外,一些小分子核酸或酵素可以大大提高萃取效率或去除非目標物質的干擾,成為核酸萃取中的重要成分。

核酸沉澱輔助物質

載體RNA

  1. 概念與功能 載體RNA

載體RNA,中文又稱核酸沉澱助劑。在核酸萃取過程中,萃取所使用的離心管大多由聚丙烯製成。管壁上有靜電,會吸附核酸。在萃取純化過程中使用Carrier RNA可以幫助核酸去除靜電作用,確保核酸能夠很好的吸附到純化管柱上,提高洗脫效率,從而盡可能實現樣品中核酸的回收。

  1. 常見的載體RNA類型

Carrier RNA作為核酸沉澱的輔助物質,有多種類型,例如PolyA鉀鹽、大腸桿菌總RNA、酵母總RNA、tRNA等。

  1. 使用中常見問題 載體RNA

Carrier RNA 在室溫下放置一段時間後還能使用嗎? Carrier RNA的降解是否會影響其使用?載體RNA會影響下游實驗嗎?
載體 RNA 溶解在 RNA 保護劑中。液態Carrier RNA短時間(7天以內)放置在37℃或室溫下,影響不大。本質上,Carrier RNA 是 500 nt 到 1000 nt 範圍內的片段。輕微的退化並不影響正常使用。對於螢光定量PCR等下游應用,Carrier RNA對Ct值沒有影響。對於NGS等下游應用,可依實際需求新增。

  1. 產品介紹 載體RNA

Yeasen的載體RNA是來自酵母菌的RNA。無殘留DNase或RNase酶,蛋白質和DNA殘留量極低。可用於病毒核酸萃取、微量DNA萃取等實驗。萃取的核酸可用於RT-PCR、RT-qPCR等後續實驗。本產品有液體和凍乾粉兩種劑型,方便直接使用、長途運輸和儲存。

產品名稱

產品 數位

規格

儲存條件和保存期限

載體 RNA,6 μg/μL

19701ES

1 毫升 / 5 毫升 / 100 毫升

儲存溫度為 -25 至 -15 °C。保存期限為2年。

載體RNA粉末,216 μg/管

19703ES

1 管 / 100 管 / 1000 管

室溫保存。

載體RNA粉末,310 μg/管

19704ES

1 管 / 100 管 / 1000 管

室溫保存。

線性丙烯酰胺溶液

  1. 線性丙烯醯胺溶液的概念及作用

線性丙烯醯胺,英文名稱Linear Acrylamide(Linear Polyacrylamide,縮寫為LPA),是一種在核酸純化過程中有助於核酸沉澱的共沉澱劑。

  1. 線性丙烯酰胺溶液的特性

它是一種中性載體,非生物來源。因此,它不含有潛在的核酸或核酸酶污染。

它不會幹擾 A260/A280 讀數,也不會抑制聚合酶和限制性內切酶活性。

它與其他後續分子生物學應用(如 PCR 和酶消化)相容。

它可協助沉澱皮克級或以上的DNA和RNA(包括寡核苷酸)。可回收的片段長度在20個核苷酸以上,單股、雙股核酸均適用。

  1. 產品介紹

產品名稱

產品 數位

規格

儲存條件和保存期限

線性丙烯醯胺溶液(5 mg/mL)

10408ES

1 毫升

儲存於 4 攝氏度。保存期限為 3 年。

核酸萃取輔助酶

核糖核酸酶A

  1. RNase A的概念與功能

核糖核酸酶A(RNase A)作為一種內切核糖核酸酶,專門降解單股 RNA 上的胞嘧啶(C)或尿嘧啶(U)殘基。核糖核酸酶A(RNase A)最常見的應用是在製備質粒DNA或基因組DNA期間移除RNA。此外,本產品還可用於RNase保護試驗、RNA序列分析等分子生物學實驗。

  1. RNase A 的特徵

RNase A來自牛胰臟。不存在內切酶和外切酶去氧核糖核酸酶的污染。無需預熱即可直接使用,耐高溫環境。

  1. 產品介紹

產品名稱

產品 數位

規格

儲存條件和保存期限

RNase A(100毫克/毫升)

10406ES

1 毫升

儲存於-20°C。保存期限為2年。

RNase A(10毫克/毫升)

10405ES

1毫升

室溫保存。保存期限為 1 年。

核糖核酸酶A(RNase A),來自牛胰腺

10407ES

100毫克/1克

室溫保存。

去氧核糖核酸酶 I (DNase I)

1.DNase I的概念與功能

脫氧核糖核酸酶 I (DNase I) 是一種存在於各種細胞和組織中的內切核酸酶,它靶向並切割嘧啶相鄰的磷酸二酯鍵,產生 5' 端帶有磷酸基團、3' 端帶有羥基的多核苷酸。平均最小消化產物是四核苷酸聚合物。 DNase可以催化各種形式的DNA,例如單股DNA,雙股DNA,甚至染色質(其裂解率受組蛋白影響)。在分子生物學實驗中,它常用於從蛋白質中去除DNA或在DNA中引入缺口以將標記鹼基插入DNA中。

2.DNase I的特點

DNase I 的最佳工作範圍是 pH 7-8,其活性依賴 Ca2+ 並可被 Co 等二價金屬離子激活2+,錳2+, 鋅2+等 5 mM Ca2+ 可以保護酵素不被水解。在 Mg 存在下2+,這種酵素可以隨機辨識並切割DNA兩條鏈上的任意位點;在 Mn 存在下2+,它可以同時識別DNA的兩條鏈,並在幾乎相同的位置進行切割。

3.產品介紹

產品名稱

產品 數位

規格

儲存條件和保存期限

脫氧核糖核酸酶 I (DNase I),源自牛胰腺

10607ES

15千單位/10×15千單位

儲存於-20°C。保存期限為2年。

脫氧核糖核酸酶 I (DNase I),源自牛胰腺

10608ES

25 毫克/100 毫克/1 克

儲存於-20°C。保存期限為2年。

蛋白酶K

1.蛋白酶K的概念與功能

蛋白酶K(Proteinase K)是一種具有廣泛裂解活性的絲氨酸蛋白酶。其相對分子量約為29.3kDa,可斷裂脂肪族胺基酸和芳香族胺基酸的羧基末端肽鍵。蛋白酶K應用範圍廣泛,可用於製備染色體DNA進行脈衝場凝膠電泳、蛋白質印跡以及去除DNA和RNA製劑中的核酸酶等實驗。變性劑如SDS(1%)可以增加其活性。

2.蛋白酶K的特點

源自基因重組酵母菌株。

不含 RNase 和 DNase。

在尿素和SDS中活性且穩定。

在較寬的pH值範圍內有效(pH 4.0 - 12.0),最佳pH值範圍為pH 7.5 - 9.0。

3.產品介紹

產品名稱

產品 數位

規格

儲存條件和保存期限

蛋白酶K

10401ES

100毫克/1克/5克/100克

儲存於 4°C。保存期限為 3 年。

蛋白酶K溶液(20mg/mL)

10412ES

1毫升/10毫升/25毫升/500毫升

儲存於 4°C。保存期限為 2 年。

蛋白酶K溶液(20mg/mL)

10410ES

1毫升/10毫升/25毫升/500毫升

儲存於 4°C。保存期限為 2 年。

RNA穩定劑

動物和植物組織的RNA穩定劑溶液

1.RNA穩定劑溶液對動植物組織的作用

RNases廣泛存在於環境中,很有可能降解新鮮採集的動植物組織、血液、體液等樣本中的RNA。作為一種無毒溶液,它可以快速滲透組織並滅活內源性 RNases。

2.動植物組織RNA穩定劑溶液特性

操作極為簡單:只需將新鮮組織切成適當大小(≤0.5 cm)的組織塊,然後將其浸入5至10倍體積的RNAsafe中。

穩定期長:浸潤了RNAsafe的組織/細胞可在37°C下保存1天,在室溫下保存1週,在4°C下保存4週,在-20°C/-80°C下可長期保存。

廣泛的下游相容性:幾乎相容於所有的RNA分離方法,如HieffTM Total RNA Extraction Reagent(產品編號:10606ES60),以及幾乎所有的商業化RNA萃取試劑盒,包括離心柱萃取法和磁珠純化法。

適用材料廣泛:可用於各種動物、植物組織(如腦、心臟、肝臟、胰臟、腎臟、脾臟、睪丸、肌肉、植物莖葉等)的保存,也可用於酵母菌、組織培養細胞等。

3.產品介紹

產品名稱

產品 數位

規格

儲存條件和保存期限

RNAsafe 組織穩定劑 RNAsafe

10604ES60

100 毫升

室溫保存。 年。

相關產品

產品名稱

產品 數位

規格

儲存條件和保存期限

溶菌酶

10402ES

5/50 克

儲存於-20°C。保存期限為 3 年。

溶血酶(10 U/μL)

10403ES

1500/3000/10000 單位

儲存於 -20℃。

蝸牛酶

10404ES

5/10 克

儲存於 2-8°C。保存期限為 2 年。

RNAsafe-ICE

10605ES

100 毫升

室溫保存。 年。

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