蛋白質純化是生物化學和分子生物學中的基本技術，廣泛應用於研究、診斷和治療應用。要研究一種特定的蛋白質，第一步是從生物樣本中分離和純化它。然而，由於蛋白質的多樣性和生物系統的複雜性，獲得高純度蛋白質可能是一個挑戰。了解蛋白質純化的核心原理並為您的研究選擇正確的技術可以大大提高您的工作流程效率和產量。
蛋白質純化基礎知識
蛋白質純化依賴蛋白質的物理和化學性質的差異，例如大小、電荷、疏水性和對特定配體的親和力。透過利用這些差異，研究人員可以有效地將目標蛋白質與其他生物成分分離，從而最大限度地減少污染。
以下是基於不同分離機制的主要蛋白質純化技術：
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| 凝膠過濾 | 離子交換 | 疏水相互作用 | 親和力 |
| 分離機制 | 尺寸 | 蛋白質表面電荷 | 疏水性 | 特異性親和力 |
| 選擇性 | 中等的 | 高的 | 高中 | 非常高 |
| 負載能力 | 低的 | 高的 | 高的 | 高的 |
| 淨化速度 | 中低 | 高的 | 高的 | 高的 |
| 生物相容性 | 非常好 | 好的 | 中等至良好 | 好的 |
| 目標蛋白質產量 | 高的 | 高的 | 中高 | 高的 |
透過選擇適當的材料和柱子，可以優化每種技術。理想的方法取決於蛋白質的特性和下游應用所需的純度等級。
使用 Y 優化蛋白質純化工作流程伊森 生物產品
在
His標籤蛋白純化 （目錄號：20502ES)：
在重組蛋白表現中， 他的標籤 (通常為6×His)因其尺寸小、免疫原性低、對蛋白質功能的影響極小而被廣泛使用。 His標籤蛋白可以透過與鎳離子螯合的親和樹脂（例如Ni-NTA樹脂）進行有效純化。 HisSep Ni-NTA 瓊脂糖樹脂 （目錄號：20502ES）由 Y 提供伊森 生物學 以高度交聯的瓊脂糖凝膠為基質，與四配位氮三乙酸（NTA）配體結合形成穩定的鎳離子螯合物。組合結構保證了高效的蛋白質結合和洗脫性能。
標籤抗體親和純化
標籤抗體親和純化是利用抗體與其特異性標籤之間的高度特異性結合來實現融合蛋白的純化。常見標籤包括 標記, HA, Myc等等，利用相應的抗體親和介質可以從複雜樣本中有效地分離出目的蛋白質。
- 反旗幟親和力 凝膠 （目錄號：20584ES）：
採用優質鼠IgG2b單株抗體，經4%高交聯瓊脂糖凝膠電泳製備ugh供應耦合，它具有較高的Flag-tag融合蛋白負載能力，適用於Flag-tag蛋白的免疫沉澱和純化。Yeasen .com
- 抗 HA 親和凝膠（貓號#20586ES)：
以優質鼠IgG1單株抗體與Sepharose 4B凝膠經抗原偶聯製備而成，具有較高的HA-tag融合蛋白負載量，適用於HA-tag蛋白的免疫沉澱純化。Yeasen 。com
- 抗 Myc 親和凝膠（貓號#20587ES）：
高品質的鼠IgG1單株抗體與Sepharose 4B凝膠偶聯，專門用於Myc標籤蛋白的純化，具有高特異性和高結合能力。
- 抗標記免疫磁珠（目錄號：20565ES）：
此免疫磁珠採用高品質鼠源IgG2b單株抗體偶聯磁性瓊脂糖微球，在磁場作用下可快速純化Flag標籤蛋白，適合小樣本的純化。
抗體親和純化（Cat#36401ES）：
抗體親和純化 是利用抗體與其抗原的特異性結合來純化蛋白質的方法。耐鹼重組蛋白A瓊脂糖純化樹脂（Cat#36401ES）是常用的抗體親和純化介質，廣泛用於抗體純化與富集。
蛋白酶
在蛋白質研究中，蛋白酶被用來切割融合標籤，恢復目標蛋白質的自然狀態。將這些蛋白酶納入您的蛋白質純化工作流程可以提高目標蛋白質的品質和功能，促進先進的研究和開發專案。
- 重組腸激酶（Cat#20401ES）：
腸激酶，也稱為腸肽酶，是一種絲氨酸蛋白酶，專門在氨基酸序列 DDDDK 後進行切割。
- 公升PNGase F（目錄號：20407ES）：
PNGase F 是一種醯胺酶，可特異性地切割 N 連接糖蛋白最內層的 GlcNAc 和 Asn 殘基。
- 重組胰蛋白酶 (MS-SAFE)（Cat#20416ES）：
胰蛋白酶是一種絲胺酸蛋白酶，可切割離胺酸和精胺酸殘基羧基側的勝肽鍵。
| 純化 方法 | 試劑類型 | 產品類型 | 推薦產品 |
| 凝膠過濾 | 葡聚醣 凝膠 色譜法 | 脫鹽填料 預裝脫鹽柱 脫鹽重力柱離心柱
| 脫鹽塔G25M（目錄號：20590ES） 旋轉脫鹽柱，0.5 mL （編號：20599ES） 重力脫鹽塔，8.3 毫升（目錄號：20741ES） |
| 瓊脂糖 凝膠 色譜法 | 填料 預裝柱 | Geldex 200 PG 高解析度瓊脂糖凝膠層析填料（10-600 kDa）（Cat#20598ES） Geldex 200 PG 層析管柱 （編號：20593ES） | |
| 離子交換 | 陰離子交換 色譜法 | 填料 預裝柱 | Q 瓊脂糖 HP（Q 強陰離子交換層析填料 HP）（Cat#20460ES） Q HP 強式陰離子交換預裝柱，5 毫升（貨號：20462ES） |
| 陽離子交換層析法 | SP 瓊脂糖 HP（SP 強陽離子交換層析填料 HP）（Cat#20463ES） SP HP 強陽離子交換預裝柱，5 毫升（目錄編號：20465ES） | ||
| 疏水作用層析法 | 弱疏水性 色譜法 | 填料 預裝柱 | 高解析度丁基弱疏水層析介質（Cat#20484ES） 丁基 HP 弱疏水層析預裝管柱，5 毫升（目錄號：20485ES） |
| 強疏水性 色譜法 | 高解析度苯基強疏水色譜介質（Cat#20486ES） 苯基 HP 強疏水色譜預裝管柱，5 毫升（Cat#20487ES） | ||
| 親和純化 | His標籤 蛋白質純化 | 樹脂 預裝柱 純化磁珠
| His-tag 蛋白瓊脂糖純化樹脂 （編號：20502ES） His-tag 蛋白純化預裝柱，5 mL（貨號：20504ES） His-tag 蛋白純化磁珠（Cat#20561ES） |
| 消費稅-標籤 蛋白質純化 | 樹脂 預裝柱 純化磁珠
| 穀胱甘肽瓊脂糖樹脂（用於 GST 標記蛋白純化）（Cat#20507ES） GST 標記蛋白質純化預裝柱，5 毫升（目錄編號：20510ES） GST 標記蛋白質純化磁珠（Cat#20562ES） | |
| 骨髓移植-標籤 蛋白質純化 | 樹脂 預裝柱
| MBP 標記蛋白高交聯純化樹脂 (Cat#20515ES) MBP 標記蛋白質純化預裝柱，5 毫升（貨號：20517ES） | |
| 鏈球菌(二） 標籤 蛋白質純化 | 樹脂 預裝柱
| Strep(II) 標記蛋白瓊脂糖純化樹脂 (Cat#20495ES) | |
| 比奧蒂-標籤 蛋白質純化 | 樹脂 預裝柱 免疫磁珠 | 鏈黴親和素瓊脂糖純化樹脂（Cat#20512ES） 生物素分子純化預裝柱，5 毫升（貨號：20514ES） 鏈黴親和素 (SAV) 免疫磁珠（Cat#47503ES） | |
| 標籤抗體親和純化 | 凝膠 免疫磁珠 | 抗標記親和純化凝膠 （編號：20584ES） 抗 HA 親和純化凝膠 （編號：20586ES） 抗 Myc 親和純化凝膠 （編號：20587ES） 抗標記免疫磁珠 （編號：20565ES） | |
| 抗體親和純化 | 樹脂 預裝柱 免疫磁珠 | 重組蛋白A瓊脂糖純化樹脂 （編號#36401ES） 蛋白 G 瓊脂糖純化樹脂（Cat#36405ES） Protein A/G 瓊脂糖純化樹脂（Cat#36403ES） 蛋白 A/G 免疫磁珠 （編號：36417ES） | |
| 其他抗體親和純化 | 樹脂 預裝柱
| 內毒素高效去除純化樹脂（Cat#20518ES） 肝素親和純化培養基（Cat#20493ES） | |
| 其他產品 | 蛋白酶 | 標籤裂解酶 糖苷酶 質譜級酶 | E.大腸桿菌表達重組腸激酶（無標籤） （編號：20401ES） 牛凝血酶（高活力，>2000 IU/mg）（Cat#20402ES） rTEV 蛋白酶重組菸草蝕刻病毒蛋白酶（Cat#20403ES） PNGase F、N-糖苷酶 F（100000 U/mL） （編號：20407ES） 重組胰蛋白酶 (MS-SAFE) 重組胰蛋白酶 (質譜級) （編號：20416ES） |
| 色譜耗材 | 重力流空柱 輸入空列 YXK柱 透析袋 | 12 mL 重力色譜空柱（Cat#20523ES） 5 mL C 型空柱（連接至 Akata、注射器或蠕動幫浦）（目錄編號：20526ES） YXK16/70色譜空柱（Cat#20443ES） 27mm 透析袋（MWCO 50 kDa）（Cat#20534ES） |
結論：根據您的需求客製化您的工作流程
優化蛋白質純化工作流程對於在您的研究或應用中獲得高純度、高產量的蛋白質至關重要。透過了解淨化原理並選擇正確的工具，您可以簡化流程並避免常見的陷阱。
要了解有關我們的產品如何增強您的蛋白質純化過程的更多信息，請訪問我們的產品頁面或聯繫我們的團隊以獲取個性化建議。