在生物醫學研究領域,蛋白質純化是探索生命奧秘的關鍵技術。然而,傳統的純化方法效率低、成本高,尤其是結構生物學研究的重點膜蛋白。這些蛋白質結構複雜,在細胞膜上表現量低,對環境條件敏感,因此其純化特別困難。現在, Yeasen 生物科技憑藉著卓越的研發實力,推出了升級版 抗 DYKDDDDK(Flag)親和性凝膠 (編號:20584ES)這是一種高效能、便利的蛋白質純化強效工具,甚至可以純化具有挑戰性的膜蛋白。

產品性能

1. 高特異性和高結合能力:目標蛋白捕獲的關鍵優勢

Yeasen 抗 DYKDDDDK(Flag)親和性凝膠 (編號:20584ES) 是將高品質的鼠IgG2b單株抗體與4%高交聯瓊脂糖凝膠共價偶聯而成。這種獨特的製造過程賦予了產品極高的特異性,使其能夠精確地識別和結合帶有Flag標籤的融合蛋白。無論是Met修飾的N端Flag融合蛋白(蛋氨酸標記蛋白)、N 端 Flag 融合蛋白 (旗蛋白),或 C 端 Flag 融合蛋白 (蛋白質標記),凝膠就能輕鬆處理它們。

在膜蛋白純化中,這種特異性尤其重要,因為這些蛋白質結構複雜,容易與其他蛋白質發生非特異性結合。 Flag膠的高特異性有效減少了非特異性蛋白的干擾,保證了純化膜蛋白的高純度。此外,此凝膠對 Flag 標記融合蛋白具有較高的結合能力(至少 1.1 毫克蛋白質/毫升 凝膠)。這意味著即使目標蛋白質的表達量較低,仍然可以使用 Flag 凝膠有效地捕獲和純化。

2. 高純度、高產量:實現下游應用

Yeasen 抗 DYKDDDDK(Flag)親和性凝膠 (編號:20584ES) 具有極小的非特異性結合雜質,純化後可獲得高純度的蛋白質樣本。這對於生物活性測定和結構分析等下游應用至關重要。高純度的蛋白質樣本可以提供更精準的實驗數據,為科學研究人員的研究奠定堅實的基礎。

3. 優化實驗工作流程:簡化蛋白質純化挑戰

蛋白質純化需要在溫和的條件下進行,以避免蛋白質的結構損傷,特別是複雜的膜蛋白。 Yeasen 抗 DYKDDDDK(Flag)親和性凝膠 (編號:20584ES) 正是出於這樣的考慮而設計的。其儲存緩衝區是 含 50% 甘油的 TBS pH 值為 7。4.既保護了凝膠的活性又為蛋白質純化提供了溫和的環境。

使用 Flag 凝膠的純化過程簡單且有效。為了方便使用1×Flag肽洗脫,產品包裝包含免費的1×Flag勝肽(Cat#20572ES)。這使得洗脫過程變得溫和(幾乎不會損害蛋白質)並且非常方便(進一步增強了實驗的簡易性)。

4. 多種尺寸和靈活的運輸選擇:滿足多樣化的實驗需求

考慮到不同實驗室的規模和需求不同, Yeasen 提供多種尺寸的 Flag 凝膠,包括 1 毫升、5 毫升、25 毫升和 100 毫升。無論是小規模的初步探索,或是大規模的蛋白質生產,都有合適的選擇。對於年度大批量採購,客戶可選擇分批收貨,享受價格優惠的同時,也能避免庫存過剩的壓力。

測試數據

Figure 1.   Yeasen Anti-DYKDDDDK(Flag) Affinity Gel purification results for low-expressing proteins (Flag-N (a), Flag-M (b), Flag-C (c)) shown in SDS-PAGE.

M:蛋白質標記物

圖 1:Flag-N/Flag-M/Flag-C蛋白柱前粗樣

2:Flag-N/Flag-M/Flag-C 蛋白的柱後流出

3:洗脫(pH2.7洗脫)

4:洗脫(pH 12洗脫)

5:洗脫(1×標誌勝肽洗脫)

6:純化凝膠(pH 2.7 洗脫)

7:純化凝膠(pH 12 洗脫)

8:純化凝膠(1×標誌勝肽洗脫)

一個旗幟-N   b旗幟-M   c旗幟-C

圖 1   Yeasen 抗 DYKDDDDK(Flag)親和性凝膠 SDS-PAGE 顯示低表現蛋白質 (Flag-N (a)、Flag-M (b)、Flag-C (c)) 的純化結果。

  Figure 2.  Comparison of Yeasen (a) withBrand S* (b) and Brand G* (c) Anti-Flag gels in purifying low-expressing proteins (e.g., membrane proteins) shown in SDS-PAGE.

M:蛋白質標記物

圖1:Flag-C蛋白柱前粗樣

2:Flag-C 蛋白的柱後流出

3:洗脫(pH2.7洗脫)

4:洗脫(pH 12洗脫)

5:洗脫(1×標誌勝肽洗脫)

6:純化凝膠(pH 值 2.7 洗脫)

7:純化凝膠(pH 12 洗脫)

8:純化凝膠(1×標誌勝肽洗脫)

一個Yeasen b品牌 S*   c品牌 G*

數位 2. 比較 Yeasen (a)與rand S*(b)和 rand G* (c)SDS-PAGE 顯示 Anti-Flag 凝膠在純化低表現蛋白質(例如膜蛋白)中的作用。

結論:

1. Yeasen 抗 DYKDDDDK(Flag)親和性凝膠 (編號:20584ES) 具有高度特異性,可與各種位置的Flag標籤結合(N端Flag融合蛋白、Met修飾的N端Flag融合蛋白、C端Flag融合蛋白)。

2. 在標靶蛋白表達極低(例如膜蛋白)的情況下, Yeasen 抗 DYKDDDDK(Flag)親和性凝膠 (Cat#20584ES) 與競爭對手相比,產量和純度明顯更高。使用 Yeasen 使用免費的1×Flag肽(Cat#20572ES)進行洗脫可提供更好的結果。

Flag標記融合蛋白的完整解決方案:

重組腸激酶(Cat#20395ES):一種特定的蛋白酶,可切割四個天門冬胺酸前面的離胺酸的羧基末端:Asp-Asp-Asp-Asp-Lys。此序列是八肽 Flag 標籤 (DYKDDDDK) 的一部分。重組腸激酶(rEK)可以輕鬆地從融合蛋白中去除Flag標籤,使其成為研究天然蛋白質結構和功能的理想工具。

反DYKDDDDK(旗幟)磁珠 (編號:20565ES): 以高品質鼠抗DYKDDDDK(Flag)單株抗體與矽基磁珠共價偶聯製備的聚合物磁性微球(直徑 200奈米)。這些珠子適用於帶有 Flag 標籤的蛋白質的免疫沉澱 (IP) 或共免疫沉澱 (Co-IP)。

產品資訊

產品名稱

產品編號

規格

抗 DYKDDDDK(Flag)親和性凝膠

20584ES03/08/25

1 毫升/5 毫升/25毫升

在酵母中表現的重組牛腸激酶 His

20395ES60/76/90

100 /500 單位/5000單位

反DYKDDDDK(旗幟)磁珠

20565ES03/08

1 毫升/5 毫升

詢問