描述
2×Hieff™ HotStart PCR 基因分型主混合物（含染料）是一種即用型 PCR 預混合溶液，含有 Hieff™ HotStart Taq DNA 聚合酶、dNTP 和優化的緩衝系統。它只需要添加引子和模板進行擴增，大大簡化了實驗程序，實現了高通量操作並提高了實驗結果的可重複性。 Hieff™ HotStart Taq DNA 聚合酶是一種配體修飾的耐熱 Taq DNA 聚合酶，其活性隨溫度變化而調節。其酵素活性在室溫下被完全阻斷，在95°C加熱時釋放。 Hieff™ HotStart DNA 聚合酶的活化僅需 2-3 分鐘，並與現有的 PCR 程序相容。本產品可防止樣品製備和溫度循環階段的非特異性擴增，從而有效地進行基因分型實驗。
特徵
- 方便、即用型混合物
- 熱穩定性－95°C 時半衰期超過 40 分鐘
- 產生帶有 3'-dA 突出端的 PCR 產物
應用
- 小鼠基因分型
- 熱啟動 PCR
規格
| 保真度 (與 Taq 相比) | 1 × |
| 熱啟動 | 不 |
| 懸垂 | 3'-A |
| 聚合酶 | Taq DNA聚合酶 |
| 反應格式 | SuperMix 或 Master Mix |
| 反應速度 | 標準 |
| 產品類型 | PCR 預混液 (2×) |
成分
| 姓名 | 10108ES03 | 10108ES08 | 10108ES50 | 10108ES60 |
| 2× Hieff™ HotStart PCR 基因分型主混合物（含染料） | 1 毫升 | 5×1毫升 | 50×1毫升 | 100×1毫升 |
數位
引自” hnRNPA1 敲低透過調節 LAS1L 外顯子 9 的可變剪接促進 NSCLC 轉移和 EMT， 正面。腫瘤學。 ，2022 年 6 月 23 日。， 第 12 卷 - 2022 年“
運輸和儲存
用冰袋運輸。儲存於-20°C，保存期限為2年。
PCR反應體系（50 μL）
| 成分 | 卷 | 濃度。 |
| 氫鍵2哦 | 至 50 微升 | - |
| 脫氧核糖核酸 | / | - |
| 引子 F (10 μM) | 2 微升 | 0.4 μM |
| 引子 R (10 μM) | 2 微升 | 0.4 μM |
| 2×希夫™ HotStart PCR 基因分型主混合物（含染料） | 25 微升 | 1× |
| DNA類型 | 輸入 |
| 基因組 DNA | 50 奈克至 100 奈克 |
| 質粒 | 100pg-20ng |
| 基因 | 1-5 μL |
PCR 循環
| 溫度。 | 時間 | 週期 |
| 95攝氏度 | 5 分鐘 | 1 |
| 95°C | 30 秒 | 三十五 |
| 50-60℃ | 30 秒 | |
| 72°C | 30秒/kb | |
| 72攝氏度 | 10 分鐘 | 1 |
[1] 韓鵬, 曹鵬, 岳軍, 等. hnRNPA1 的敲低透過調節 LAS1L 外顯子 9 的選擇性剪接促進 NSCLC 轉移和 EMT。 2022；12：837248。已發布 2022 年 6 月 23 日。(影響因子：5.738)
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