2×Hieff Canace™加上PCR Master Mix(帶染料)_ 10154ES

Sku: 10154ES01

尺寸: 100μL
價格:
銷售價格$15.00

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描述

產品描述

2×希夫·卡納斯 Plus PCR Master Mix(含染料)是即用型 2× 預混合溶液,含有 Hieff Canace 加上高保真 DNA 聚合酶、dNTP 和優化的緩衝系統。該混合物包括兩種單株抗體,可在室溫下抑制聚合酶活性和 3'→5' 核酸外切酶活性,從而實現高度特異性的熱啟動 PCR。延長因子的增加可達到長片段擴增,目標片段最長可達 13 kb。此酵素具有5'→3' DNA聚合酶活性和3'→5'外切酶活性,其保真度是Taq DNA聚合酶的83倍,是一般Pfu DNA聚合酶的9倍。適用於擴增複雜模板,產生平端PCR產物。

2×希夫·卡納斯 Plus PCR Master Mix(含染料)具有簡單、靈敏度高、特異性強、穩定性優良等優點。反應體系僅需添加引子和模板,可採用兩步驟PCR方案,簡化流程,節省時間。本產品含有電泳示蹤染料,可直接載入 PCR 產物進行凝膠分析。此外,它還含有一種特殊的保護劑,即使經過反覆的凍融循環也能保證穩定的活性。

規格

分類No

10154ES01 / 10154ES03 / 10154ES08 / 10154ES60

尺寸

100 μL / 1 毫升 / 5×1 毫升 / 100×1 毫升

貯存

本品應儲存於-25~-15℃ 1 年。

指示

1. 推薦的PCR反應體系。

成分

體積微升

最終的 專注

希夫·卡納斯™ PCR 預混液(含染料)*

二十五

模板***

-

向前裡默10 微摩爾/公升**

2

0.4微摩爾/公升

R永恆裡默10 微摩爾/公升**

2

0.4微摩爾/公升

氫鍵2

最多 50

-

*1× 終濃度混合物含有 1 U/50 μL 聚合酶、2 mmol/L Mg2+和 200 μmol/L dNTP

**PCR反應中引子終濃度建議為0.2-1 μmol/L,優選0.4 μmol/L

***25 μL反應體系的建議模板量:

模板類型

片段大小(1 kb-10 kb)

基因組 DNA

50 奈克至 200 奈克

質粒或病毒DNA

10 皮克至 20 奈克

基因

1-2.5 μL(不超過PCR總體積的1/10)

2. 反應程序。

1)兩步驟協議(首選):

循環

電視僱員。

時間

週期

初始變性

98℃

3 分分鐘

1

變性

98

10 秒

30-35

擴大

68

三十 秒/千字節

伊納爾 擴充

72

5 分分鐘

1

2)三步驟方案(常規):

循環

電視僱員。

時間

週期

初始變性*

98℃

3 分分鐘

1

變性

98

10 秒

30-35

退火**

60

20

擴大***

72

30秒/kb

伊納爾 擴充

72

5 分分鐘

1

*初始變性:建議在 98°C 下持續 3 分鐘(高 GC 模板為 5-10 分鐘)。

**退火:建議在 60°C 下進行 20 秒(可在 10-30 秒之間調整)。長時間退火可能會導致凝膠變髒。

***延伸:建議在 72°C 下以 30 秒/kb 進行(對於複雜模板,最高可達 60 秒/kb)。

3)梯度退火協議(建議用於困難目標):

循環

電視僱員。

時間

週期

初始變性

98℃

3 分分鐘

1

變性

98

10 秒

15(每次循環降低 1°C)

梯度退火

70-55℃

20

擴大

72

30秒/kb

變性

98°C

10 秒

20

退火

55 攝氏度

20 秒

擴大

72°C

30秒/kb

伊納爾 擴充

72

5 分分鐘

1

4)不同PCR方案的特性:

協定類型

速度

特異性

PCR 產量

檢測率

兩步

最快的

高的

中等的

高的

三步

中等的

中等的

最高

中等的

梯度退火

慢的

高的

中等的

高的

筆記

1.本產品僅供研究使用。

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