描述
2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix(含染料)是即用型 2× 預混合溶液,含有 Hieff Canace™ AdvanceFast 高保真 DNA 聚合酶、dNTP 和優化的緩衝系統,其中包含預先添加的電泳指示劑。預混液中已預先添加電泳指示劑,PCR產物可直接進行電泳,並擴增產物為平端。 2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix (With Dye)具有快速簡單、靈敏度高、特異性強、穩定性好等優點,反應體系中只需加入引子和模板即可。此外產品還含有特定的保護劑,使得預混劑經過反覆凍融後仍能保持穩定的活性。
超高保真: 易發生突變的錯配率低 高GC基因;
速度快: 速度快如 5秒/kb;
適用性廣泛: 可用於擴增GC含量為20-80%的基因,耐受20%的血液和小鼠裂解物;
穩定性好: 37°C保存7天不影響性能;
易於使用: 只需添加引子和模板進行擴增,並用藍色上樣染料直接電泳。
規格
貨號 | 10164ES01 | 10164ES03 | 10164ES08 |
尺寸 | 250 微升 | 1 毫升 | 5×1毫升 |
數位
圖:Hieff Canace™ AdvanceFast 高保真 DNA 聚合酶與其他品牌的產品相比具有高保真度(A)。該測定是透過檢查從不同物種的基因組中擴增的 6 個富含 GC(約 80%)片段的 PCR 產物的突變頻率進行的。將Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA Polymerase擴增的PCR產物克隆至載體,每個序列選取100個單克隆進行Sanger定序。
Hieff Canace™ AdvanceFast 高保真 DNA 聚合酶具有高擴增速度 (B)、高 GC 擴增相容性 (C) 和血液耐受性 (D)。 客戶的PCR和定序結果表明,Hieff Canace™ AdvanceFast 高保真DNA聚合酶在PCR產量和特異性(EH)方面具有良好的表現。
貯存
本產品應儲存於-25~-15℃,儲存期為1年。
指示
- 推薦的PCR反應體系。
成分 | 容量(μL) | 最終的 專注 |
2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR 主混合物(含染料)* | 二十五 | 1× |
模板** | 十 | - |
向前 引子(10 μmol/L)*** | 2 | 0.4微摩爾/公升 |
反向 引子(10 μmol/L) | 2 | 0.4微摩爾/公升 |
氫鍵2哦 | 最多 50 | - |
表1 PCR反應體系
*1×預混合物含有 2 mM Mg2+ 和 200 μM dNTP。
**建議範圍10-200 ng,cDNA樣本上傳體積範圍不超過反應系統的1/10,建議1-2.5 μL。
***PCR反應體系中引子最終濃度範圍為0.2-1 μM,建議0.4 μM。
- 反應程序。
循環 步 | 溫度。 | 時間 | 週期 |
初始變性 | 98℃ | 30 秒 | 1 |
變性 | 98℃ | 10 秒 | 30-35 |
退火* | 60℃ | 5 秒 | |
擴大** | 72℃ | 5-10秒/kb | |
最終的 擴大 | 72℃ | 2 分鐘 | 1 |
表 2 PCR反應程序
*建議溫度:60°C,可設定溫度梯度以找到引子退火的最佳溫度。建議退火時間設定為 5 秒,可在 5 至 30 秒之間調整。退火時間過長可能會導致凝膠上擴增產物分散。
**延伸時間:建議5秒/kb,也可依需求延長至10秒/kb。
筆記
- 本產品僅供研究使用。
- 為了您的安全,請穿著工作服和戴上一次性手套進行操作。
文件:
引文及參考文獻:
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