描述
Hieff® Blood Advanced Direct PCR Kit 是一種無需DNA純化或樣本預處理，即可直接擴增全血樣本的試劑盒，並且兼容含有EDTA、肝素、檸檬酸鹽等常規抗凝劑的新鮮血液、冷藏（冷凍）血液和市售幹血跡。 ，對2kb以下的片段設定3-5sec/kb的延伸時間，因此大幅縮短血液樣本鑑定和檢測的時間。
規格
| 保真度 (與 Taq 相比) | 1 × |
| 熱啟動 | 是的 |
| 懸垂 | 3'-A |
| 聚合酶 | Taq DNA 聚合酶（目錄編號：10726） |
成分
| 不。 | 姓名 | 10188ES20 | 10188ES60 |
| 10188-A | 2× 希夫® 血液進階 PCR 緩衝液 | 500 μ大號 | 2.5 毫升 |
| 10188-B | 希夫® 高級高保真 DNA 聚合酶混合物 | 20 μ大號 | 100 μL |
| 10188-C | 陽性對照引子混合物（各 10 μM） | 100 μL | 200 μL |
| 10188-D | 10× DNA 上樣緩衝液 | 1 毫升 | 1 毫升 |
指示
推薦的PCR反應體系。
| 成分 | 容量（μL） |
| 氫鍵2哦 | 至 50 μL |
| 2× 希夫® 血液進階 PCR 緩衝液 | 25 微升 |
| 正向引子（10 μM） | 2 微升 |
| 反向引子（10 μM） | 2 微升 |
| 希夫® 高級高保真 DNA 聚合酶混合物 | 1 微升 |
| 血液樣本 | 十 |
2. 建議每個引子的終濃度為0.4 μM，濃度過高會導致非特異性擴增。
3.最佳全血模板濃度範圍為0.5%～20%，建議使用10%作為初試條件，即在50μL反應體系中加入5μL全血作為模板，注意避免吸入血塊。對於保存在Whatman®濾卡上的乾血跡，可取約1mm2帶有血跡的圓形紙片，無需預處理，直接放入PCR反應中進行擴增。
反應程式
| 循環 步 | 溫度。 | 時間 | 週期 |
| 初始變性 | 95℃ | 5 分鐘 | 1 |
| 變性 | 95℃ | 15 秒 | 30-35 |
| 退火 | 60℃ | 15 秒 | |
| 擴大 | 72℃ | 3-10秒/kb | |
| 最終的 擴大 | 72℃ | 5 分鐘 | 1 |
退火溫度是通用 Tm 值或低於引子 Tm 值 1-2°C。如果擴增產物的特異性較低，則可以建立退火溫度梯度來找到最佳退火條件。
延伸時間為10sec/kb可擴增8kb以下的大部分目標片段，延伸時間為3-5sec/kb可擴增2kb以下的大部分片段。若擴增效率較低，時間可適當延長至20-30秒/kb，但不得超過60秒/kb。
運輸和儲存
產品應儲存於-15℃ 〜-25℃ 為了 1 年
數位
筆記
1.建議血液模板為總反應體積的10%，即在50μL反應體系中加入5μL全血作為模板，注意避免吸入血塊。
2. 延伸時間10sec/kb可擴增大部分8KB以下的目標片段，延伸時間3-5sec/kb可擴增大部分2KB以下的片段。如果擴增效率較低，時間可以延長至30秒/kb。
3. PCR反應結束後，建議將反應產物以4000 rpm（1000×g）離心1-3分鐘，沉澱血球碎片，並取上清液進行下游分析。
4.本產品不能直接用於醫療診斷。
5.為了您的安全和健康，請穿上工作服並戴上一次性手套。
付款和安全
您的付款信息已安全處理。我們無法存儲信用卡詳細信息，也無法訪問您的信用卡信息。
詢問
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常問問題
本產品僅用於研究目的，不用於人類或動物的治療或診斷用途。產品和內容受以下公司的專利、商標和版權保護：
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