描述
DNase I是一種內切酶,可消化單股和雙股DNA,產生單一脫氧核苷酸或單股或雙股寡脫氧核苷酸。它能水解磷酸二酯鍵,生成含有5'-磷酸基團和3'-OH基團的單脫氧核苷酸和寡脫氧核苷酸。平均消化產物是最小的多四核苷酸。 DNase I可以催化多種形式的DNA,例如單股DNA,雙股DNA,甚至染色質(其切割速率受組蛋白影響)。最適pH值範圍為7-8。 DNase I 的活性依賴 Ca2+ 並可被二價金屬離子激活,例如 Co2+,錳2+, 鋅2+等 5 mM Ca2+ 可以保護酵素不被水解。在 Mg 存在下2+,此酵素能隨機辨識並切割任意DNA鏈上的任意位點;在 Mn 存在下2+,它能同時辨識兩條DNA鏈,並在幾乎相同的位置進行切割,形成平末端,或有1-2個核苷酸突出的黏末端。 DNase I廣泛應用於無DNA RNA的製備;體外轉錄後去除模板DNA;在 RT-PCR 和 RT-qPCR 反應前製備無 DNA 的 RNA;與DNA聚合酶I結合,透過缺口易位進行DNA標記; DNA片段化文庫建構。
本產品依GMP製程要求生產,產品以液體形式提供。
特徵
- DNA特異性內切酶
- 降解雙股和單股 DNA
- 產物是含有 5'-磷酸和 3'-OH 的短寡核苷酸
應用
- 從 RNA 樣本中移除污染的基因組 DNA
- 轉錄反應中 DNA 模板的降解
規格
來源 | 重組 大腸桿菌 含有 DNase I 基因 |
最佳溫度 | 37℃ |
儲存緩衝區 | 10 mM Tris-HCl pH 7.6,2 mM CaCl2, 50% (v/v) 甘油 |
單位定義 | 在37°C下10分鐘內完全降解1μg質粒DNA所需的酵素量。 (反應緩衝液為:10 mM Tris-HCl pH 7.6、2.5 mM MgCl2, 0.5 毫米氯化鈣2,1 μg 質粒 DNA) |
成分
零件編號 | 姓名 | 10611ES76 (500單位) | 10611ES84 (2,000 美元) | 10611ES92 (10,000單位) |
10611 | 去氧核糖核酸酶 I (DNase I) GMP 級 (2 U/μL) | 250 微升 | 1 毫升 | 5 毫升 |
運輸和儲存
脫氧核糖核酸酶I(DNase I)GMP級產品採用乾冰運輸,可在-15℃~-25℃保存一年。
數位
圖 1. DNase I 來自
[1] 陸哲,劉暉,宋娜,等. METTL14 透過 N<sup>6</sup>-甲基腺苷依賴性 Sirt1 下調加重足細胞損傷和腎小球病進展。細胞死亡論。 2021;12(10):881。出版日期:2021 年 9 月 27 日。
[2] 餘穎,王穎,張偉,等.由成骨細胞衍生的基質和水凝膠組成的仿生骨膜骨替代物,用於修復大段骨缺損。 Acta Biomater. 2020;113:317-327。 doi:10.1016/j.actbio.2020.06.030(影響因子:7.242)
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