描述
希菲爾™ Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR（gDNA Digester Plus）是基於 Hifair™Ⅲ逆轉錄酶開發的重新調整的預混液。與Hifair™ Ⅱ逆轉錄酶相比，Hifair™ Ⅲ逆轉錄酶的熱穩定性明顯提高，可承受高達60℃的反應溫度，適用於具有複雜二級結構的RNA模板的逆轉錄。同時此酵素增強了與模板的親和力，非常適合少量模板和低拷貝基因的逆轉錄。
預混料含有 5×gDNA Digester Mix 和 4×Hifair™ 三、SuperMix Plus。 5×gDNA Digester Mix可以去除RNA模板中殘留的基因組DNA污染，確保後續結果更可靠。 4×Hifair™ Ⅲ SuperMix Plus 含有逆轉錄酶所需的所有成分（緩衝液、dNTP、Hifair™ Ⅲ 加入逆轉錄酶、RNase抑制劑、Random Primers/Oligo（dT)18 Primer Mix）、RNA模板與Rnase-free H2O進行逆轉錄，同時終止gDNA消化液，確保cDNA的完整性。
本產品適用於兩步驟法RT-QPCR檢測，專門針對qPCR進行了優化，按比例優化的Random Primers/Oligo (dT)18 Primer Mix，使得cDNA合成能夠從RNA轉錄本的所有區域起始，且逆轉錄效率相同。最大程度保證qPCR結果的真實性和重複性。逆轉錄產物相容於SYBR Green法和TaqMan探針法qPCR、Hifair™ UNICON™ qPCR SYBR Green Master Mix、Hifair™ qPCR SYBR Green Master Mix 或 Hifair™ qPCR TaqMan Probe Master Mix可依實驗目的進行選擇，組合使用進行高性能的基因表現分析。
特徵
- 高性能逆轉錄
- 提高反應溫度-第一鏈 cDNA 可在 55 至 60°C 的溫度範圍內合成
- 有效去除基因組殘留
- 寬線性偵測範圍
應用
- cDNA文庫建構
- 反義RNA合成
規格
| 最終產品類型 | cDNA（第一鏈） |
| PCR 方法 | 逆轉錄聚合酶連鎖反應 |
| 試劑類型 | 反轉錄 |
| 樣品類型 | 核糖核酸 |
| 最佳反應溫度 | 55℃-60℃ |
| 逆轉錄酶 | 骨髓纖維化症 |
成分
| 零件編號 | 姓名 | 11141ES10 (10T) | 11141ES60 （100噸） |
| 11141-A | 無 RNase 的 H2哦 | 1 毫升 | 2×1毫升 |
| 11141-B | 5×gDNA 消化混合物 | 30 微升 | 300 μL |
| 11141-C | 4×HifairTM Ⅲ 超級混合 | 50 μL | 500 μL |
運輸和儲存
產品採用乾冰運輸，可在-15℃~-25℃保存18個月。
數位
圖 1.優異的逆轉錄效率，適合不同GC含量、不同表現豐度的基因
圖2. 線性測定範圍 總RNA 5 pg~5 μg
圖 3. 有效去除基因組殘基
引用自“一種能夠區分單點突變的 RNA 切割蘇糖核酸酶。Nat Chem。2022 年 3 月；14(3):350-359。doi: 10.1038/s41557-021-00847-3。”
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