描述
MicroRNA是一類長度約22nt的非編碼RNA，在植物和動物的基因表現調控中扮演重要角色。本試劑盒採用Poly(A)-tailing方法將miRNA第一鏈逆轉錄為cDNA。產品中的2×Hifair™ miRNA RT buffer含有miRNA Poly(A)-tailing反應和逆轉錄反應所需的全部原料和引子。精心的最佳化確保Poly(A)修飾過程和逆轉錄過程能夠在miRNA 3’端同時有效率地進行。
本產品建議與本公司的Hieff™ miRNA Universal qPCR SYBR Master Mix（Cat#11171）搭配使用，可獲得最佳實驗效果。
特徵
- 高靈敏度偵測率：可偵測10 pg RNA
- 產品穩定性高：37℃保存7天不受影響
應用
- 合成第一鏈 cDNA，可作為模板r RT-PCR 和實時 RT-qPCR。
規格
| 最終的 產品 類型 | cDNA（第一鏈） |
| PCR 方法 | 逆轉錄聚合酶連鎖反應 |
| 反應格式 | 分離部分 |
| 樣品類型 | miRNA |
| 最佳反應溫度 | 37℃ |
| 反向 轉錄酶 | 微機電壓 |
成分
| 零件編號 | 姓名 | 11148ES50 (50T) |
| 11148-A | 希菲爾™ miRNA RT 酵素混合物 | 87.5 微升 |
| 11148-B | 2×Hifair™ miRNA RT 緩衝液 | 250 微升 |
| 11148-C | 無 RNase 的 H2哦 | 10 毫升 |
| 11148-D | 通用反向引子（10 μmol/L） | 4 毫升 |
| 11148-E | U6正向引子（10 μmol/L） | 500 μL |
| 11148-F | U6反向引子（10 μmol/L） | 500 μL |
貯存
產品儲存於-25℃~-15℃，保質期為1年。
數位
圖1.高靈敏度偵測率：可偵測到10 pg RNA。
以合成的hsa-miR-let-7e-5p（a）和293T細胞總RNA（b）為模板，稀釋成以下梯度：60拷貝～606拷貝（6個梯度）和10 pg～100 ng（5個梯度）。檢測到所有梯度 cDNA。
[1] Huang G, Chen J, Liu J, Zhang X, Duan H, Fang Q. MiR-935/HIF1α反饋迴路抑制膠質瘤的增生和侵襲性。腫瘤標靶治療。 2020；13：10817-10828。出版日期：2020 年 10 月 23 日。
[2] 李華, 潘榮, 陸倩, 等. MicroRNA-145-5p 抑制骨肉瘤細胞 透過靶向 E2F 轉錄因子 3 來促進增殖。 2020；45(5):1317-1326。 doi:10.3892/ijmm.2020.4504（影響因子：4.101）
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