描述
Hifair™ AdvanceFast 一步法 RT-gDNA 消化 SuperMix 用於 qPCR,是 Hifair™ 的增強迭代 Ⅲ 用於 qPCR 的第一鏈 cDNA 合成 SuperMix(gDNA Digester Plus)。它旨在滿足在單一試管內進行逆轉錄和基因組去除反應的需求。此外,它簡化了反應流程,顯著縮短了反應時間,並提高了逆轉錄產物的產生。 4×Hifair® AdvanceFast One-Step RT SuperMix 包含逆轉錄反應所需的所有必需試劑。在反應過程中,只需添加 gDNA Remover Mix、模板 RNA 和水,即可有效合成 cDNA 的初始鏈,同時消除基因組 DNA 污染。該產品非常適合複雜RNA模板的逆轉錄,並且已被證明對於涉及少量模板量和低拷貝基因的逆轉錄非常有效。
此特定產品產生的逆轉錄產物與基於探針和基於染料的 qPCR 方法完全相容。對於基於探針的 qPCR,我們建議使用 Hieff Unicon® Universal TaqMan 多重 qPCR 主混合物(Cat#11211),而對於基於染料的 qPCR,Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Green 主混合物(Cat#11184)是高性能基因表現分析的建議選擇。
但要注意的是,該產品產生的逆轉錄產物並不適合長片段擴增等後續應用。如果您需要高效率的逆轉錄來實現這些目的,我們建議使用 Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA 合成試劑盒(Cat#11149、Cat#11150)。
特徵
- 5分鐘RT
-
在一個管中整合 RT 和 gDNA 消化
應用
- 定量PCR
- 反義RNA合成
規格
最終產品類型 | cDNA(第一鏈) |
PCR 方法 | 逆轉錄聚合酶連鎖反應 |
試劑類型 | 反轉錄 |
樣品類型 | 核糖核酸 |
最佳反應溫度 | 37℃ |
逆轉錄酶 | 骨髓纖維化症 |
成分
不。 | 姓名 | 11151ES10 (10噸) | 11151ES60 (100噸) |
11151-A | 4×海菲爾® AdvanceFast 一步式 RT SuperMix | 50 μL | 500 μL |
11151-B | gDNA 去除劑混合物 | 10 微升 | 100 μL |
11151-C | 無 RNase 水 | 1 毫升 | 2×1 毫升 |
運輸和儲存
產品採用乾冰運輸,可在-15℃~-25℃保存12個月。
使用說明
解凍 將 11151-A/B/C 組分放在冰上,輕輕攪拌並徹底混合各試劑組分。然後組裝以下內容 成分 在無 RNase 的試管內:
成分 | 體積(μL) |
不含 RNase 水 | 至 20 μL |
4×海菲爾® AdvanceFast 一步式 RT SuperMix | 5 微升 |
gDNA 去除劑混合物 | 1 微升 |
總 RNA | 10 皮克 -5 微克* |
或mRNA | 10 pg-500 ng* |
表 1:反應製備
*我們建議總 RNA 輸入量不超過2 μg。當目標基因表現豐度較低時,總RNA輸入量可增加至5μg。
溫度 | 時間 |
37℃ | 5 分鐘* |
85℃ | 30 秒 |
表 2:反應方案
*該過程包括逆轉錄和 gDNA 消化。
逆轉錄產品適合立即用於 qPCR 反應或可在 -20°C 下短暫保存。對於長期儲存,我們建議分裝並儲存在 -80°C 下,以防止多次凍融循環。
預防措施:
1. 所有操作應在冰上進行,並特別小心以防止 RNase 污染。
2. 穿上實驗服和戴上一次性手套,確保您的安全和健康。
3.本產品僅供科學研究之用,不得用於其他用途。
付款和安全
您的付款信息已安全處理。我們無法存儲信用卡詳細信息,也無法訪問您的信用卡信息。
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常問問題
本產品僅用於研究目的,不用於人類或動物的治療或診斷用途。產品和內容受以下公司的專利、商標和版權保護:
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