描述
MicroRNA是一類長度約22nt的非編碼RNA,受到廣泛關注,在調控植物和動物的基因表現中發揮非常重要的作用。本試劑盒以SYBR Green I嵌合螢光法定量檢測miRNA螢光。 2×Hieff™ miRNA Universal qPCR Master Mix是專門針對miRNA定量檢測而研發的新一代預混合螢光定量PCR檢測試劑。它含有特殊的 ROX 被動參考染料。適用於大部分qPCR儀器,無需在不同儀器上調整ROX濃度,只需在製備反應體系時添加引子和模板即可擴增。 DNA聚合酶採用化學改良的熱活化聚合酶,結合特殊的緩衝液體系,使反應更特異,更靈敏,並能在更寬的範圍內準確定量。
建議將本產品與我們的 Hifair™ miRNA 1st Strand cDNA 合成試劑盒(Tailing)(Cat# 11148)一起使用,以獲得最佳實驗結果。
特徵
- 平台範圍:無需使用預混顏色改變 ROX 濃度
- 高靈敏度檢測率:可檢測10 pg DNA
- 擴增性能好:優異的擴增效率
- 特異性高:能夠區分同一家族中miRNA之間的單鹼基差異
應用
- 基因表現
規格
熱的 開始 | 內建 熱的 開始 |
偵測 方法 | 同步輻射光源 |
PCR 方法 | 定量PCR |
聚合酶 | 塔克 DNA聚合酶 |
類型 的 樣本 | 脫氧核糖核酸 |
應用裝置 | 最多 qPCR 儀器 |
產品 類型 | SYBR 預混液,用於即時螢光定量 PCR |
申請 到 (應用) | 基因表現 |
成分
零件編號 | 姓名 | 11171ES03 | 11171ES08 |
11171-A | 2×Hieff™ miRNA 通用 qPCR 預混液 | 1 毫升 | 5×1毫升 |
11171-B | 無 RNase 的 H2O | 2×1毫升 | 5×1毫升 |
貯存
產品儲存溫度為-25℃~-15℃,保質期為1年。
數位
圖1.擴增性能好:擴增效率優異。
以人類293T細胞及小鼠肝臟總RNA為模板,擴增miR-let-7b-5p、miR-let-7c-5p、miR-let-7e-5p、miR-let-7f-5p基因。結果顯示,與同類產品相比,Hifair™ miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit(Cat# 11148ES)與Hieff™ miRNA Universal qPCR SYBR Master Mix(Cat# 11171ES)反應體系匹配性優異。
圖2.特異性高:能夠區分同一家族中miRNA之間的單鹼基差異。
人類hsa-let-7家族有多個miRNA,彼此之間很少有鹼基差異,甚至只有一個鹼基的差異。使用不同的引子擴增這些miRNA,並以公式2-ΔCTx100%計算匹配率。結果表明,密切相關的亞型家族成員能夠被有效區分。
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常問問題
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