描述
CRISPR/Cas9是一種利用RNA引導的Cas核酸酶對目標基因進行特異性DNA修飾的技術,是細菌和古細菌為應對噬菌體和外來質粒的攻擊而進化出的一種獲得性免疫防禦機制。在這個系統中,Cas9核酸酶在人工優化的單嚮導RNA(sgRNA)的引導下,在目標位點切割雙股DNA(dsDNA),導致DNA斷裂。 DNA在體內透過非同源末端連接或同源性定向修復機制進行修復,導致基因的移碼突變、替換或缺失。
HifairTM Precision sgRNA 合成試劑盒使用 T7 RNA 聚合酶混合物有效轉錄 spCas9 sgRNA。該試劑盒含有可被Cas9蛋白辨識並充當支架的特定序列。此序列的一部分可以與使用者設計的目標特定序列部分重疊。互補鏈由 DNA 聚合酶填充,產生用於轉錄的 dsDNA 模板。該試劑盒利用其提供的試劑和使用者設計的特定 DNA 序列,可獲得 20-100 μ單管反應 4 小時內可生成 1 g 功能性 sgRNA。
特徵
合成產量高:單管反應4小時,sgRNA產量可達20 - 100 μg。
應用範圍廣泛:不同類型的 sgRNA 均可獲得高產量。
高純度:合成的sgRNA為單一條帶。
高活性:合成的sgRNA可以有效引導Cas9切割目標DNA。
應用
CRISPR/Cas 基因編輯
成分
零件編號 | 姓名 | 11355ES05 | 11355ES25 | 11355ES50 | 11355ES60 |
11355-A | 10×sgRNA 酵素混合物 | 10 微升 | 50 μL | 100 μL | 200 μL |
11355-B | 10×sgRNA反應緩衝液 | 10 微升 | 50 μL | 100 μL | 200 μL |
11355-C | 2×Canace 酵素混合物 | 62.5 微升 | 312.5 微升 | 625 微升 | 1.25 毫升 |
11355-D | 鷹架模板 | 6.25 微升 | 31.25 微升 | 62.5 微升 | 125 微升 |
11355-E | NTP(各 25 mM) | 40 微升 | 200 μL | 400 μL | 800 μL |
11355-F | 對照 sgRNA 寡核苷酸 (10 μ米) | 2 微升 | 10 微升 | 20 μL | 40 微升 |
運輸和儲存
本產品應儲存於-25~-15o碳 為了 2 年。
數位
數位 1.不同時間點sgRNA合成量
數位 2。不同序列sgRNA的合成產量
數位 3。合成的sgRNA的純度(由Agilent 2100測定)
數位 4。sgRNA切割效率圖
文件:
安全資料表
11355_材料安全資料表_版本EN20250120.pdf
手冊
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