描述
螢火蟲螢光素酶是一種分子量約61kDa的蛋白質,在ATP、鎂離子和氧氣存在下,能催化螢光素氧化為氧化螢光素。它發出波長約560nm的生物光。海腎螢光素酶是一種分子量約36kDa的蛋白質,在氧氣存在下,能催化腔腸素氧化為腔腸醯胺,並在氧化過程中發射波長為480nm的光。關於生物發光。兩種生物發光都可以透過化學發光來測量。檢測原理如圖1所示:
圖 1:螢火蟲和海腎螢光素酶檢測示意圖
通常將目的基因的5´UTR或啟動子克隆至螢火蟲螢光素酶的上游,或將3´UTR克隆至螢火蟲螢光素酶的下游,透過檢測螢火蟲螢光素酶的量來檢測啟動子或調控元件的轉錄調控效果。以海腎螢光素酶為內參,消除細胞數目、轉染效率等差異。酶報告基因活性。該試劑盒具有靈敏度高的特性。
特徵
增強的裂解能力:能夠完全裂解絕大多數細胞類型。
更強的訊號:精確偵測弱啟動子表達。
靈敏度更高:可檢測到低至 10-20 皮摩爾的螢光素酶分子。
更寬的線性範圍:線性偵測範圍超過酵素濃度的8個數量級。
應用
miRNA與目標基因3'UTR相互作用的驗證
lncRNA-miRNA交互作用的驗證
啟動子區轉錄因子調控的驗證
訊號通路分析
SNP活性分析
規格
形式 | 液體 |
螢光素酶 | 螢火蟲和海腎 |
訊號半衰期 | 30分鐘 |
產品組件數量 | 5 |
工作流程 | 二 年代特普 |
成分
零件編號 | 姓名 | 11402ES60 | 11402ES80 |
11402-A | 細胞裂解物 | 20 毫升 | 10×20毫升 |
11402-B | 螢火蟲螢光素酶緩衝液 | 10 毫升 | 10×10毫升 |
11402-C | 螢火蟲螢光素酶底物(50 ×) | 200 μL | 10×200μL |
11402-D | 海腎螢光素酶緩衝液 | 10 毫升 | 10×10毫升 |
11402-E | 海腎螢光素酶底物 (50 ×) | 200 μL | 10×200μL |
運輸和儲存
雙螢光素酶報告基因檢測試劑盒產品應保存於-15℃ 〜-25℃ 為了 1 年。
數位
圖1.
數位2。 是宜生 (貓#:11402)檢測試劑與螢光素酶相互作用,達到最佳發光強度。加入海腎螢光素酶底物後,螢火蟲螢光素酶的生物發光被猝滅:基本上可以完全猝滅。
文件:
安全資料表
手冊
引文及參考文獻:
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