描述
RNase HII 是一種核糖核酸酶內部酶,來自 深海火球藻 並重組表達於 大腸桿菌。它識別 DNA-rN-DNA/DNA 雙股,並在核糖核苷酸摻入 DNA 的位點進行切割。但其對單股RNA的活性很低,且對dsDNA和ssDNA沒有切割活性。 RNase HII 在 5' 端的單一核苷酸殘基處進行切割,切割後產生 5' 磷酸基團和 3' 羥基端。此RNase HII酶在70~75°C時活性最強,在50°C~75°C之間有活性,但在室溫下活性很低。本產品熱穩定性高,95℃孵育45分鐘後活性幾乎不損失,且與多種PCR反應體系相容。
規格
貨號 | 14539ES80/14539ES92 |
尺寸 | 50 單位 / 250 單位 |
種 | 深淵火球藻 |
成分
姓名 | 14539ES50(50U) | 14539ES72(250U) |
RNase HII(2 U/μL) | 25 微升 | 125 微升 |
貯存
本品應儲存於-25~-15℃ 兩年。
產品應用
- 使用高靈敏度探針透過 LAMP 進行檢測。
- RNase HII 依賴性 PCR (rhPCR)。
- 去除聚合酶鍊式反應過程中形成的錯配的核糖核苷酸。
- 岡崎片段的 RNA 部分降解。
筆記
- 本產品僅供研究使用。
- 為了您的安全,請穿著實驗服和戴上一次性手套進行操作。
數位
1.大腸桿菌 基因組 DNA 殘留量 < 0.5 拷貝/100 U
偵測 大腸桿菌 不同批次RNase HII中基因組DNA殘基的比較結果表明,宿主基因組DNA殘基
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圖 4. 檢測 大腸桿菌 基因組 DNA 殘基
2. 95℃耐熱試驗
將RNase HII在95°C加熱0至45分鐘後,測試RNase HII的酵素活性。結果表明,酶活性幾乎沒有損失。
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圖5. 95℃耐熱試驗
3. 無外切酶、切口酶或 RNase 殘留物(1 U 劑量)
將1U不同批次的RNase HII與各自的底物DNA/RNA在37°C孵育4小時,瓊脂糖凝膠電泳結果顯示RNase HII中無外切酶、切口酶及RNase殘留。
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圖 6. 檢測外切酶、切口酶和 RNase 殘留物
文件:
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