描述
ArCas12a 源自 CRISPR 系統 直腸無性桿菌 細菌，又稱Cpf1，是一種由1263個胺基酸組成的單體蛋白質。作為 CRISPR/Cas 系統的 II 類（V 型）成員，ArCas12a 僅透過單一效應蛋白發揮作用，並且與 Cas9 具有顯著差異，例如靶向富含 T 的基序、不需要反式激活 crRNA、在 DNA 雙股斷裂時產生黏性末端、參與 RNA 加工以及具有 DNA 核酸酶活性。
ArCas12a缺乏HNH結構域，能夠獨立利用其RuvC結構域在CRISPR RNA（crRNA）的引導下識別目標核酸5'端富含胸腺嘧啶（T）的PAM區域，從而啟動對目標DNA的切割。它已成功用於許多哺乳動物和植物的基因組編輯。此外，ArCas12a 具有反式切割活性，能夠在反應體系中不加區分地切割非目標單股 DNA（ssDNA）。
與其他LbCas12a/AsCas12a相比，ArCas12a表現出更高的溫度適應性（25-55o碳），適用於基因組編輯和核酸檢測等應用。
特徵
反應溫度範圍寬：在 25-55 的溫度範圍內表現出裂解活性o碳
低核酸酶殘留：無殘留的核酸外切酶、切口酶或 RNase
順式裂解活性: 體外高效切割雙股 DNA
反式切割活性：高反式切割活性，適用於核酸檢測
應用
CRISPR/Cas 基因編輯
基於CRISPR/Cas系統的診斷與檢測
與等溫核酸擴增技術（RPA、LAMP）等結合的其他檢測應用
規格
| 來源 | Cpf1 基因來自 直腸無性桿菌 透過重組表達 大腸桿菌 |
| 分子量 | 149千道爾頓 |
| PAM 序列 | TTTN 或 TTTV |
| 反應條件 | 50 mM 氯化鈉、10 mM Tris-HCl、10 mM 氯化鎂2，pH 值 7。9 @25o碳 |
| 專注 | 10 微米 |
| 純度 | >95% （聚丙烯醯胺凝膠電泳） |
| 滅活條件 | 85o碳， 5-10分鐘 |
成分
| 成分 不。 | 姓名 | 14702ES65 | 14702ES80 |
| 14702-A | ArCas12a 核酸酶 （10μ米） | 100 微升 | |
| 14702-B | 10×ArCas12a 反應緩衝液 | 1 毫升 | 1 毫升 |
運輸和儲存
本產品應儲存於-25～-15o碳 兩年。
數位
數位 1. ArCas12a 順式切割活性測試：M：Marker； C：模板雙股 DNA (dsDNA)
筆記： 在crRNA的引導下，它可以高效地切割dsDNA（600bp），產生兩個片段（200bp+400bp）。
數位 2。 ArCas12a 反式切割活性測試結果
筆記： 以dsDNA為靶點，加入ArCas12a、crRNA和ssDNA報告探針（含螢光報告基團）進行體外裂解。一旦 ArCas12a 與 crRNA 和目標 DNA 形成複合物，它就會活化反式切割活性，切割 ssDNA 報告探針，從而發出螢光。
文件：
安全資料表
14702_材料安全資料表_版本EN20241205.pdf
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