描述
AapCas12b 核酸酶（也稱為 C2c1）是一種由 tracrRNA:crRNA（或 sgRNA）介導的 DNA 內切酶，源自嗜熱細菌 嗜酸脂環酸桿菌。當目標雙股 DNA（dsDNA）上存在 PAM（TTN）序列時，它會特異性地切割目標 dsDNA，導致雙股斷裂並產生黏性末端。 AapCas12b 可以獨立於 PAM 序列特異性切割單股 DNA 標靶。雙鍊和單股 DNA 標靶均可活化 AapCas12b 的反式切割活性。當 AapCas12b 酶與 sgRNA 和目標 DNA 形成三元複合物時，它會被激活，產生非特異性 ssDNA 反式切割活性，從而切割系統中任意的 ssDNA 序列。 AapCas12b的最佳裂解反應溫度為60o碳，這使其比AacCas12b更耐熱，更適合與LAMP一起使用來開發等溫擴增/CRISPR-Cas檢測系統。
特徵
反應溫度範圍寬: 在攝氏 37 至 45 度的溫度範圍內表現出裂解活性~65o碳
低核酸酶殘留：無殘留的核酸外切酶、切口酶或 RNase
順式裂解活性: 體外高效切割雙股 DNA
反式切割活性：高反式切割活性，適用於核酸檢測
應用
CRISPR/Cas 基因編輯
基於CRISPR/Cas系統的診斷與檢測
與等溫核酸擴增技術（RPA、LAMP）等結合的其他檢測應用
規格
| 分子量 | 130千道爾頓 |
| 專注 | 10 微米 |
| 純度 | >95% （聚丙烯醯胺凝膠電泳） |
| 單位定義 | 在 60 ℃ 下 1 分鐘內裂解 1 pmol ssDNA 探針所需的 Cas12b 酵素量o碳 總反應體積為 20 μL，含1×反應緩衝液，定義為1U |
成分
| 成分 不。 | 姓名 | 14808ES65 | 14808ES80 |
| 14808-A | AapCas12b核酸酶 （10μ米） | 100 微升 | |
| 14808-B | 10×反應緩衝液 | 1 毫升 | 1 毫升 |
船ping 和存儲
本產品應儲存於-25～-15o碳 兩年。
數位
數位 1. AapCas12b核酸酶順式切割活性驗證
筆記： 在 20 μL 反應體系包含具有 PAM 序列的 Target dsDNA、sgRNA、Cas12b 和 1×反應緩衝液，將混合物在 60o碳 30 分鐘，然後在 85o碳 5分鐘。瓊脂糖凝膠電泳結果顯示，3批AapCas12b核酸酶均能有效切割dsDNA，切割效率與進口品牌T*相當。
數位 2。 AapCas12b核酸酶反式切割活性測試結果
筆記： 在 20 μL 反應體系包含帶有 PAM 序列的 Target dsDNA、sgRNA、Cas12b、Report ssDNA 螢光探針和 1×反應緩衝液，將混合物在 60o碳 孵育1小時，每30秒採集一次螢光訊號。結果發現，在Target DNA、sgRNA、Cas12b共同存在下，Report ssDNA螢光探針可以被裂解，進而釋放螢光訊號。
文件：
安全資料表
14808_材料安全資料表_版本EN20241209.pdf
手冊
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