描述
海法商標 可凍乾 我 多重一步法 RT-qPCR 試劑盒（UDG 加） 是一種以RNA為模板的多重定量PCR試劑盒。實驗過程中，逆轉錄和定量PCR在同一管內進行，簡化了實驗操作，降低了污染風險。這 獨特的Buffer和酵素設計確保其可用於一步法RT-qPCR凍乾反應系統的製備及產品設計。
本試劑盒採用耐熱Hifair高效合成第一鏈cDNA商標 逆轉錄酶和Unicon定量擴增商標 HotStart Taq DNA 聚合酶。該試劑盒主要含有優化的 公升冷凍乾燥緩衝液、酵素混合物等，另外添加了能有效抑制非特異性PCR擴增及提高多重qPCR反應擴增效率的因子，在確保擴增效率的同時，可進行多達多重的擴增反應。
該套件配有 公升抗氧化保護劑 可用於凍乾。
規格
| 零件編號 | 16645ES60 / 16645ES80 / 16645ES92 |
| 尺寸 | 100 溫度 / 1000 電視 / 萬噸 |
成分
| 姓名 | 16645ES60 （100噸） | 16645ES80 (1,000噸) | 16645ES92 (萬噸) | |
| 16645-一個 | 4×海菲爾商標 凍乾緩衝液 | 600 μL | 6 毫升 | 60 毫升 |
| 16645-B | 海法商標 凍乾酵素混合物 | 100 μL | 1 毫升 | 10 毫升 |
| 16645-C | 凍乾保護劑 | 800 μL | 8 毫升 | 80 毫升 |
貯存
這 產品 儲存溫度為-25℃~-15℃，保質期為1年。應避免反覆凍融。
指示
1. 反應組成：
| 成分 | 體積 （μL) | 最終濃度 |
| 4×海菲爾商標 凍乾緩衝液 | 6 | 1× |
| 海法商標 凍乾酵素混合物 | 1 | - |
| 凍乾保護劑 | 8 | - |
| 引子混合物（10 μM） | 1 | |
| 探針混合物（10 μM） | 0.5 | 0.05-0.5 μM |
| 模板RNA | 5 | - |
| 二乙基己基苯2哦 | 至 25 | - |
筆記：使用前請務必搖勻，避免劇烈震動造成過多氣泡。
2. 優化循環方案
（1） 標準擴增程序
| 反應階段 | 溫度 | 時間 | 循環 | |
| 1 | 反轉錄 | 50 攝氏度一個 | 1 | |
| 2 | 初始變性 | 95°C | 5 分分鐘 | 1 |
| 3 | 擴增反應 | 95°C |
| 45 個循環 |
| 60°Cb | 三十 秒c |
（2） 快速擴增程序
|
| 反應階段 | 溫度 | 時間 | 循環 |
| 1 | 反轉錄 | 50 攝氏度一個 | 2 分分鐘 | 1 |
| 2 | 初始變性 | 95°C | 2 秒 | 1 |
| 3 | 擴增反應 | 95°C |
| 45 個循環 |
| 60°Cb | 十三 秒c |
筆記：
a) 逆轉錄：溫度可選擇42℃或50℃ 10-15分鐘。
b) 擴增反應：依設計引子的Tm值調節溫度。
c) 螢光訊號擷取：請依照儀器說明書的要求設定實驗流程。
3. 應用 裝置
配備 Rox 的設備：ABI 5700、7000、7300、7700、7900HT Fast、StepOne™、StepOne Plus™
低 Rox 設備：ABI 7500、7500 Fast、ViiA™7、 QuantStudio™ 3 和 5、QuantStudio™ 6、7、12k Flex
Stratagene MX3000P™、MX3005P™、MX4000P™
不含 Rox 的設備：
比奧拉d CFX96™、CFX384™、iCycler iQ™、iQ™5、MyiQ™、MiniOpticon™、Opticon®、Opticon® 2、Chromo4™
艾本德 Mastercycler® ep realplex、realplex 2 s； Qigen Corbett Rotor-Gene® Q、Rotor-Gene® 3000、Rotor-Gene® 6000
羅氏應用科學 LightCycler® 480、LightCycler® 2.0、Lightcycler® 96
熱 科學的 PikoReal 循環儀； 造父變星 SmartCycler®； 伊路明納 生態定量PCR
筆記
請穿戴必要的個人防護裝備，例如實驗服和手套，以確保您的健康和安全！
請使用不含RNase的耗材 為了 實驗。
本產品適用於 研究 僅使用！
凍乾程式
本試劑盒可直接用於冷凍乾燥，也可在此基礎上進一步探索不同引子的輔料。本試劑的標準凍乾程序如下：
| 流程 | 溫度 | 設定時間 | 期間 | 真空度mbar |
| 預凍乾 | -45℃ | 10 分鐘 | 60分鐘 | —— |
| 初始凍乾階段 | -45 ℃ | 10分鐘 | 60分鐘 | 0.01毫巴 |
| -40 ℃ | 10分鐘 | 900分鐘 | 0.01毫巴 | |
| -35 ℃ | 10分鐘 | 60分鐘 | 0.01毫巴 | |
| -30 ℃ | 20分鐘 | 60分鐘 | 0.01毫巴 | |
| -20 ℃ | 20分鐘 | 60分鐘 | 0.01毫巴 | |
| 0 ℃ | 20分鐘 | 60分鐘 | 0.01毫巴 | |
| 壓力累積試驗 | ||||
| 分析乾燥階段 | 5 ℃ | 10分鐘 | 20分鐘 | 0.01毫巴 |
| 10 ℃ | 10分鐘 | 20分鐘 | 0.01毫巴 | |
| 15 ℃ | 10分鐘 | 20分鐘 | 0.01毫巴 | |
| 20 ℃ | 10分鐘 | 20分鐘 | 0.01毫巴 | |
| 25 ℃ | 10分鐘 | 240分鐘 | 0.01毫巴 | |
| 壓力累積試驗 | ||||
付款和安全
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常問問題
本產品僅用於研究目的，不用於人類或動物的治療或診斷用途。產品和內容受以下公司的專利、商標和版權保護：
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