希夫NGS^商標 緬因大學 DNA 篩選珠是根據 SPRI（固相逆固定）原理製備的 適用於次世代定序（NGS）文庫製備過程中的DNA純化和大小選擇。希夫NGS^商標 緬因大學 DNA 選擇珠與各種 DNA 和 RNA 文庫製備試劑盒相容。本產品在高潔淨度的超淨設備中生產，可用於病原體檢測過程中的DNA純化步驟。

規格

成分

貯存

本產品應儲存在 2~8℃保存18個月。

運輸和儲存

這些珠子用冰袋運輸，可以在 2°C-8°C 下保存一年。

指示

• 1. 準備

使用前，將選擇珠在室溫下平衡至少 30 分鐘。

• 2. DNA 大小選擇

尺寸選擇的操作流程如圖1所示，協議如下。

圖 1. DNA 大小選擇流程圖

2.1 每次使用前，請以渦旋或上下移液的方式將珠子徹底混合。
2.2 將第一輪選擇珠加入樣品中（請參閱表1）。以渦旋或上下移液至少 10 次來徹底混合。
2.3 室溫孵育5分鐘。
2.4 短暫旋轉管子並將其放置在磁力架上。當溶液變清澈時（約 5 分鐘），將上清液轉移到新的 PCR 管中。
2.5 依照表 1 將第二輪選擇珠加入步驟 2.4 的樣品中。
2.6 室溫下孵育 5 分鐘。
2.7 短暫旋轉管子並將其放置在磁力架上。當溶液變清澈時（約 5 分鐘），吸出上清液並丟棄。
2.8 將管子保持在磁力架中，並加入 200 μL 新鮮配製的 80% 乙醇，不要擾動磁珠，在室溫下孵育 30 秒。吸出乙醇並丟棄。
2.9 重複步驟 2.8 一次，總共清洗兩次。
2.10 用 10 µL 移液器吸頭除去殘留乙醇。將管子放在磁力架上，打開蓋子風乾選擇珠，直到出現裂痕（約 5 分鐘）。
注意：不要過度乾燥選擇珠。
2.11 從磁力架上取出管子。加入適量的 ddH2O（≥20 µL），並透過渦旋或上下移液至少 10 次來充分混合。
2.12 室溫下孵育 5 分鐘。
短暫旋轉管子並將其放置在磁力架上。當溶液變清澈時（約 5 分鐘），將 20 μL 上清液轉移到新管中。

• 3.DNA 大小選擇的建議條件

將小牛胸腺DNA超音波破碎，製備100~1,000 bp的片段，依表1進行兩輪大小選擇，以Agilent 2100 Bioanalyzer分析結果（圖2）。

表 1. DNA 大小選擇的建議條件

註：表中「×」表示樣本DNA體積。例如，文庫插入片段長度為250bp，樣本DNA體積為100μL，則第一輪分選所用磁珠體積為0.80×100μL=80μL；第二輪分選所用磁珠體積為0.20×100μL=20μL。

圖2. Agilent 2100高靈敏度DNA晶片電泳圖