試劑盒配備強效裂解緩衝液，可快速裂解樣本（如細胞、鼠尾、鼠耳、鼠趾、肌肉等）釋放基因組DNA，裂解液無需純化可直接加入PCR反應體系中，操作方便。此外該試劑盒所需樣本量較低，5mg小鼠組織或1-5mm小鼠尾巴即可進行實驗。

成分

貯存

19697-A （裂解液）應儲存在 2~8℃ 1 年。 若多次使用，請分開包裝冷凍以避免交叉污染。 19687-B（停止解決方案） 應存放在 -25~-16℃ 1 年。

指示

小鼠基因組 DNA 釋放

1. 將 5-10 毫克動物組織或 1-5 毫米鼠尾夾入 1.5 毫升離心管中*。
2. 將 90 μL 緩衝液 ML 加入上述離心管中，輕輕渦旋使裂解物完全浸潤樣品，並短暫離心。
3. 在恆溫培養箱中以 95°C 的溫度孵育 15 分鐘**。
4. 加入 10 μL 緩衝液 MT，輕彈混合，然後終止裂解。
5. 選用步驟：以 12000 rpm 的速度離心 2 分鐘。
6. 將上清轉移到新的離心管中，4℃或-20℃保存或直接取上清用於後續的PCR擴增。

* 應盡可能切碎組織以使裂解反應更順利進行。

**在 95°C 下孵育 15 分鐘通常足以滿足大多數 PCR 需求。如果需要較大量的DNA或樣本難以裂解，時間可延長至30分鐘。組織塊不需要完全裂解，殘留物可以在隨後的離心步驟中去除。

細胞基因組 DNA 釋放

將轉染細胞在48孔板培養3天，達到細胞密度約70,000個細胞/孔後，盡可能完全移除培養基。然後直接在每個孔中加入 90ul ML 緩衝液，並用移液器吹打每個孔。全部轉移至96 孔 PCR 板。用PCR儀在95°C下處理5-15分鐘，冷卻後加入10ul MT緩衝液，均勻徹底吹掃。使用高保真度酶（Cat# 10164）或Taq酶，每50ul PCR反應系統加入0.5-2ul細胞裂解物，進行PCR。

圖 1. 直接 PCR 用19697處理的細胞裂解物。

筆記

1. 本產品僅供研究使用。
2. 為了您的安全，請戴上護目鏡、實驗服和一次性手套進行操作。
3. 為了避免樣品間的交叉污染，每次採樣後需將採樣器具邊緣或與樣品直接接觸的部分浸入2%次氯酸鈉溶液中，沖洗數次，然後用乾淨的紙巾吸乾殘液後方可再次使用。為了試驗的方便，可準備數個取樣裝置，使用後統一清洗，確保每個單獨樣品都用無污染的取樣裝置取樣。
4. 建議使用新鮮採集的動物組織。對於長期冷凍的組織，應盡量避免反覆凍融，否則會導致模板降解，影響PCR效率。

文件：

手冊