刀豆球蛋白 A (ConA) 珠是與刀豆球蛋白 A 共價偶聯的超順磁性聚合物微球 （從穀物植物的種子中分離出來的植物甘露糖/葡萄糖結合凝集素）在其表面。這些珠子 擁有多個 顯著的特徵包括單分散性和強磁反應性。當 Ca²⁺ 和鎂²⁺ 離子存在時，ConA磁珠利用ConA球蛋白A與末端α-D-甘露糖和α-D-葡萄糖基團之間的親和力，能高效、快速地分離、純化多醣、醣蛋白、醣脂等各種生物分子。

ConA 磁珠提供了一種分離或固定細胞的便捷方法，確保在後續清洗步驟中最大限度地減少細胞損失。此外，它們還可用於收集和固定細胞核。此外，這些珠子還可用於 CUT & Run 和 CUT & Tag 等創新技術，這些技術是 ChIP-seq 實驗中使用的革命性方法。

綜上所述，ConA磁珠是高效純化生物分子、方便細胞分離固定、細胞核收集及應用於尖端實驗技術的強大工具。

規格

特點

圖表

表 1. Yeasen ConA 珠具有較高的捕獲率。已經驗證了與微球比例使用的刀豆球蛋白A（ConA）的量可以確保最大的結合能力，同時防止CUT&Tag實驗中細胞結合後磁珠的過度聚集。例如，使用10 μL ConA包被的珠子可以結合相當於E7水平的細胞數量，結合效率超過98%。

圖 1. Yeasen ConA 珠表現出高度分散性。在珠粒標記過程中，選擇了非生物密封劑以確保有效封閉而不受批次間差異的影響。這樣保證了磁珠的優良密封性，使得ConA包被的磁珠在儲存期間保持其高單分散性，有利於在後續實驗中有效結合碳水化合物分子。

圖 2. CUT&Tag 染色質訊號分佈 Yeasen Con A 珠子。

貯存

本品於2~8℃保存，保質期為2年。

指示

以下操作以糖蛋白純化或細胞分離為例， 剪切和標記 實驗 ， 看 Yeasen 協議的 Cat# 12598ES。

1. 緩衝液的製備

1）客戶提供

1. 所需材料不包括：磁力架、Eppendorf 管、PCR 管、磁力架、熱循環儀 ETC。
2. 平衡 珠 在室溫下至少 30 分鐘。

1. 樣品處理（ 以哺乳動物細胞為例 ）

1. 準備哺乳動物細胞（1.0×10 ⁴~1。0×10 ⁵ 細胞），離心（4℃，600×g，3~5分鐘），小心 丟棄 上清液。
2. 加入140 μL Binding Buffer，混勻，重懸細胞，離心收集（4℃，600×g，3~5分鐘），小心 丟棄 上清液。
3. 加入90 μL結合緩衝液，混勻後重新懸浮細胞。
   注意：可以透過使用胰蛋白酶等酶進行部分消化來獲得緊密黏附的哺乳動物細胞。對於動物組織、植物細胞或真菌細胞，獲得分散細胞或原生質體通常需要根據其特定特性進行特殊處理。

1. 準備 ConA 珠

1. 輕輕吹打 ConA 珠子，使其完全懸浮，放置 10 μL 珠子懸浮液置於新的 200 μL 離心管中。
2. 加入40 μL Binding Buffer，混勻，待磁珠吸附在離心管側壁後，置於磁力架上靜置1分鐘，棄上清。
3. 加入 10 μL 結合緩衝液，混勻後重新懸浮 ConA 珠。

1. 樣品綁定

1. 將製備好的細胞樣本加入預處理的珠子中，輕輕吹打懸浮的珠子，然後在倒置攪拌器上孵育（室溫 30 分鐘或 4℃ 過夜）。
2. 靜置1分鐘，待磁珠吸附至離心管側壁，小心棄去上清。
3. 添加 500 μL 洗脫緩衝液加入細胞-ConA 珠複合物中， 輕輕移液至 重新懸浮珠子，然後 靜置1分鐘，待磁珠吸附至離心管側壁，小心棄去上清。
4. 重複步驟3）三至四次。

1. 洗脫

1. 糖蛋白，加入50~250 μL洗脫緩衝液，輕輕吹打懸浮的珠子，然後在倒置攪拌器上孵育（室溫下10~30分鐘）。倒置混合後，置於磁力架上靜置1分鐘，收集上清至新的1.5 mL管中，進行SDS-PAGE或Western blot。
2. 對於細胞來說，無需洗脫。

筆記

1. 平衡 刀豆素A 室溫下的珠子 使用前。
2. 避免冷凍，否則會導致珠子材料降解或失去活性。
3. ConA需要Ca2+和Mn2+離子的存在才能活化，因此實驗過程中應避免使用含有EDTA，或其他金屬離子螯合劑的試劑。
4. ConA磁珠在與細胞孵育時可能會發生聚集，這是正常現象，不會影響磁珠的正常使用。
5. 本產品僅供研究使用。
6. 為了您的安全，請穿著工作服和戴上一次性手套進行操作。

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