描述
聚丙烯醯胺凝膠（PAGE凝膠）常用於蛋白質電泳，以達到蛋白質的分離。該類凝膠一般由濃縮凝膠和分離凝膠組成。前者起到濃縮蛋白質樣品的作用，而後者根據凝膠中所使用的丙烯酰胺單體和N,N-亞甲基雙丙烯酰胺（亞甲基丙烯酰胺）交聯劑的濃度不同，分離不同大小的蛋白質。
本試劑盒提供了快速製備PAGE凝膠所需的多種試劑。使用者只需配備自己的凝膠製備設備即可製備凝膠，大大簡化了凝膠製備過程。本試劑盒製備的凝膠僅可用於變性PAGE凝膠電泳。此規格可製備約125塊微凝膠（以0.75mm厚凝膠計算）。
規格
| SDS-PAGE濃縮膠濃度 | 4.2％ |
| SDS-PAGE分離膠濃度 | 15％ |
| 分離範圍 (kDa) | 10-45 |
| 凝膠系統 | 三甘胺酸 |
| SDS-PAGE濃縮膠濃度 | 4.2％ |
成分
| 零件編號 | 姓名 | 20327ES62 （125 個微型凝膠） |
| 20327-A | 15% - 分離凝膠緩衝液 | 250 毫升 |
| 20327-B | 15% - 分離膠溶液 | 250 毫升 |
| 20327-C | 15% - 顏色濃縮凝膠緩衝液 | 80 毫升 |
| 20327-D | 15% - 濃縮凝膠溶液 | 80 毫升 |
| 20327-E | 準備凝膠杯 | 3 |
運輸和儲存
產品隨附冰袋，可存放在 2℃~8℃ 為期1年。
指示： 建議一次不要配置過多片凝膠，避免上層溶液加入過晚（最多建議2-3片）
1.根據目標蛋白的分子量選擇適當的凝膠濃度（參考表1）
2.製膠過程（以一片0.75/1.0/1.5mm Mini凝膠為例）
2.1 取等體積的分離膠緩衝液與分離膠溶液，混勻，即分別取2.0/2.7/4.0 mL兩種溶液。
2.2 稱取0.1 g過硫酸銨，溶於1 mL去離子水中。過硫酸銨需客戶自行購買。
2.3 在步驟1的混合溶液中加入35/45/70 μL APS（若凝固太快，APS使用量可減少一半），充分混合。
2.4 將步驟2的溶液注入製膠玻璃板中。注意濃縮膠加入分離膠後2分鐘內應注入凝膠模具中，濃縮膠的倒入慢，防止濃縮膠與分離膠混合。如果個人覺得配置有困難，也可以適應用乙醇封好後配置濃縮凝膠。
2.5濃縮凝膠的製備：取等體積的濃縮凝膠緩衝液與濃縮凝膠溶液，分別取0.5/0.75/1.0 mL兩種溶液，再加入10/13/18 μL APS，混合均勻。
2.6 注入製膠玻璃板內，插入梳齒（不要用力過猛，要輕輕插入梳齒）。
2.7 濃縮膠凝固15min後，即可取出梳齒，用於電泳。注意：請盡量使用新鮮配製的電泳緩衝液。
筆記
1.電泳時電壓建議在100-120V之間，如需加快電泳速度，可提高至150V。
2.灌注凝膠前務必將凝膠溶液平衡至室溫（例如保持幾分鐘），以有效避免凝膠中產生氣泡。
3.過硫酸銨需客戶自行購買。我們建議使用 Sigma 的 Cat#A3678 產品。
4.過硫酸銨溶液的用量僅供參考，實際用量可依個人實驗習慣、經驗適當增減。加入較多的過硫酸銨，凝膠速度加快，反之亦然。 PAGE凝膠的凝固速度與溫度、過硫酸銨的用量有密切關係。
5.本產品添加了適量的TEMED替代品。如需進一步加快凝膠速度，可在分液前依需求添加適量的TEMED。
6.凝膠凝固與溫度呈現顯著的正相關性。在同樣條件下，溫度越高，凝固速度越快。
7.彩色濃縮膠在儲存過程中可能會產生少量沉澱，屬於正常現象。請隨意使用。
8. APS 儲存於 -20℃。為方便起見，已開啟並正在使用的APS可存放在4℃。
9. 請穿戴必要的個人防護裝備，如工作服和手套，以確保您的健康和安全！
10.僅供研究使用！
| SDS-PAGE凝膠濃度 | 分離範圍 (kDa) |
| 8% | 30-200 |
| 10％ | 20-80 |
| 12.5％ | 15-60 |
| 15％ | 10-45 |
文件：
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