描述
增強型ECL化學發光底物試劑盒用於檢測直接或間接標記辣根過氧化物酶 (HRP) 的抗體和相關抗原。增強型ECL化學發光底物試劑盒的原理是，蛋白質或核酸經過電泳後轉移到印跡膜上，用HRP標記的一抗和二抗與膜上的目標蛋白質結合，或用HRP標記的探針直接或間接地與膜上的核酸結合。洗淨膜後，以本產品配製的ECL工作液，在室溫下孵育膜幾分鐘。將印跡膜用保鮮膜包裹並固定在X射線曝光盒上。然後將X光膠片壓在暗室中的膜上並曝光幾秒鐘到幾個小時。經顯影、定影後，蛋白質或核酸條帶便可清晰顯示在X光片上。
本試劑盒具有獨特的發光底物系統，並降低了曝光背景，同時引入了新的氧化劑，大大提高了試劑盒的穩定性，使其在室溫下可以穩定保存長達一年。除X射線外，還可直接使用螢光CCD掃描，主要用於WB檢測及化學發光免疫檢測系統。
特徵
靈敏度高，訊號雜訊比高，可檢測中等純度的抗原。
發光迅速、明亮，在螢光燈下可觀察到壓印的膜帶。
特別適合檢測目標豐度較高、常規的蛋白質樣本。
新型氧化劑，在室溫下可穩定保存長達一年。
應用
化學發光 ELISA
蛋白質印跡法
斑點印跡-DNA/RNA
南方印跡法
RNA印跡
規格
| 推薦抗體濃度 | 一抗（存液濃度1mg/mL）：1:1000-1:4000 二抗（存液濃度1mg/mL）：1:1000-1:4000 |
| 訊號持續時間 | < 2 小時 |
| 基材特性 | 化學基質 |
| 基材類型 | HRP（辣根過氧化物酶）底物 |
| 敏感度 | 中級抗原 |
成分
| 零件編號 | 姓名 | 36222ES60 （100毫升） | 36222ES76 （500毫升） |
| 36222-A | 增強型 ECL - 試劑 A | 50 毫升 | 250 毫升 |
| 36222-B | 增強型 ECL - 試劑 B | 50 毫升 | 250 毫升 |
運輸和儲存
產品常溫運輸，可常溫保存一年。若長時間不使用，建議存放在 2℃~8℃ 延長有效期限。
注意：36222-A 應避光保存！
說明（以X光片為例）
1.常規電泳，轉膜，HRP標記的抗體或HRP標記的核酸探針孵育，洗膜。
注意：ECL發光溶液為HRP的顯色底物，因此檢測系統必須基於HRP酶標抗體或核酸探針。
2.最後一次洗膜的同時，配製新鮮的發光工作液（100-200μL發光工作液/cm2膜）：取等體積的試劑A與試劑B，混合備用。
注意：取用試劑A和試劑B必須使用不同的吸頭。建議立即使用工作液。室溫下放置幾小時後仍可使用，但靈敏度略有降低。
3.用平鑷子取出膜，放在濾紙上吸乾洗液，不要使膜完全乾燥。將膜完全浸入發光工作液中，與發光工作液充分接觸。在室溫下孵育 1-2 分鐘，然後立即準備暴露平板電腦。
4.用鑷子夾起膜並將其放在濾紙上以吸乾發光工作液。但不要洗掉發光液。
5.在X光底片暗箱的內表面上舖一塊比膜大的保鮮膜。將壓印膜貼在保鮮膜上，將保鮮膜完全折疊在壓印膜周圍，並消除氣泡折疊，可剪掉多餘的保鮮膜邊緣。用濾紙吸掉多餘的發光工作液。用膠帶將覆蓋印刷膜的保鮮膜固定在暗箱中，蛋白質帶朝上。
6.從暗室中取出一張X光膠片，放在包覆的膜上。將底片壓緊，曝光時間30秒-2分鐘。然後將膠片沖洗並定影。
注意：應根據曝光強度調整曝光時間。如果背景太高，請同時使用兩張 X 光膠片。
其他曝光方法
若使用CCD攝影：可將膜放在工作液中，開機後依使用說明操作，取出膜，拍攝照片。另外，還可以根據情況調整機器的測量參數，以提高訊號雜訊比。
筆記
1. 在轉膜、封膜及孵育過程中應避免產生氣泡。此外，戴手套可以避免在膜上留下指紋並保持膜清潔。
2.長時間曝光或蛋白質含量過高都會加深背景，使譜帶強度的變化失去線性關係。曝光不足會使條帶變得模糊。
3. 有些保鮮膜在包裹印刷膜時可能會使螢光猝滅。應選擇優質保鮮膜。
4.避免將多片膜放在同一個洗膜盒內，相互吸附或摩擦可能造成深背景。
5. 可使用可見的預染蛋白質標記和螢光放射自顯影曝光標籤準確地確定膠片上條帶的位置和大小。
6. 使用生物素-親和素系統，避免使用牛奶封閉，可能會導致背景過高。
7.金屬氧化物顆粒可能造成膜上出現顆粒狀斑點。避免使用生鏽的剪刀和鑷子。使用塑膠扁鑷子。
8. 疊氮化鈉（NaN3）能抑制HRP活性，若回收HRP標記探針或抗體時應避免使用NaN3，必要時不得超過0.01%。
9.本品無特殊毒性，依常規化學處理即可。
10. 請穿戴必要的個人防護裝備，如工作服和手套，以確保您的健康和安全！
11.僅供研究使用！
文件：
安全資料表
手冊
引文及參考文獻：
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