描述
天然蛋白 A 是金黃色葡萄球菌中發現的一種細胞壁表面蛋白,它類似於從 屬 格 或者 碳 鏈球菌,結合 最多 哺乳類 免疫球蛋白G 經過 互動 主要 和 這 抗體 地區 免疫球蛋白(Ig),但結合特異性不同。可用於多種抗體(單株抗體、多株抗體)的分離純化。蛋白 A 和蛋白 G 與不同免疫球蛋白亞類的結合特性不同(詳情請參閱附錄 1)。
本產品採用基因改造的蛋白A,既保留了其免疫球蛋白親和性,又去除了天然蛋白本身的非主要結合區域,以減少非特異性結合。 SuRi rProtein A瓊脂糖樹脂是以高度交聯的瓊脂糖凝膠為基質,改質耐鹼重組蛋白A為配體,具有很高的物理化學穩定性。使用本產品可透過一步親和層析從腹水、血清及培養基樣本中獲得高純度抗體,使用方便,應用廣泛。
成分
零件編號 | 姓名 | 36401ES08 | 36401ES25 | 36401ES60 |
36401 | 蘇裡爾蛋白 瓊脂糖 樹脂 | 5 毫升 | 二十五 毫升 | 100 毫升 |
規格
矩陣 | 4% 高度交聯瓊脂糖凝膠 |
配體 | 耐鹼性重組蛋白 一個 |
珠 尺寸 | 90 微米 |
最大限度。工作壓力 | 0.3兆帕 |
儲存緩衝區 | 1×PBS,含20%乙醇 |
結合容量 | 50 毫克/毫升 |
耐鹼性 | 0.1-0.5米 氫氧化鈉 |
船運 和 貯存
產品隨附冰袋。 2~8℃穩定保存 五年。
指示
- 緩衝液製備
建議採取以下措施 緩衝液使用前需以0.22 μm或0.45 μm濾膜過濾。 平衡/結合/洗滌緩衝液:0.15 M NaCl,20 mM 鈉 磷酸氫鈣,pH 值 7.0
洗脫緩衝液:0.1 M 甘氨酸,pH 3.0
中和緩衝液:1 MTris-HCl,pH 8。5
- 樣品製備
確保 那 這 樣本 解決方案 有 這 合適的 離子的 力量 和 pH 前 載入中 這 柱子, 任何一個 經過 用結合/洗滌緩衝液稀釋血清樣本、腹水或細胞培養液,或用透析劑透析樣本 結合/洗滌緩衝液。
- 塔填料
載入 SuRi rProtein 一個 將瓊脂糖樹脂放入適當的層析管柱中,注意避免產生氣泡。
- 樣品淨化
1) 天平:色譜柱 是 平衡 綁定 緩衝 共 5 次 這 柱子 體積, 所以 那 包裝與同一緩衝系統 目的蛋白,並起到保護蛋白質的作用。
2) 樣本 載入中: 這 樣本 曾是 已載入 到 這 均衡 重組蛋白 一個 瓊脂糖 樹脂 到 確保 滿的 接觸 目標蛋白和樹脂之間,提高回收率 目標蛋白的速率,並收集流出物至 接受考驗。
3) 洗滌:用 10-15倍 柱子 體積 的 洗滌 緩衝, 消除 這 雜質 蛋白質 除非 特異性吸附,收集洗滌液。
4) 洗脫: 洗脫 和 5-10次 柱子 體積 的 洗脫 緩衝, 收集 洗脫液, 那 是, 這 目標 蛋白質 成分。
5) CIP清洗 和 保存: 一般來說 使用 0.1-0.5 米 氫氧化鈉 大於 3CV,且 這 接觸 時間 是 15 分鐘; 然後 以5CV平衡液沖洗至中性。 最後, 平衡 20% 乙醇 5 倍的列 體積, 和 然後 儲存 在 20% 乙醇 的 這 相同的 體積 在 4°C 到 防止 這 包裝 從 存在 受到細菌污染。
- SDS-PAGE檢測
這 樣品 獲得 在 這 純化 流程 (包括 原來的 樣品, 流出物 成分, 洗滌 和 以SDS-PAGE檢測洗脫組分(如洗脫液成分等)來判斷純化效果。
筆記
- 請勿冷藏該產品。
- rProteinAAgarose Resin使用前必須充分顛倒幾次,使瓊脂糖樹脂混合均勻。
- 所有操作過程中,樣品需在4°C或冰上操作。
- 為了您的安全和健康,操作時請穿著工作服和戴上一次性手套。
- 僅供研究使用。
附表1:結合能力總結f 蛋白質 A 和 G 轉化為不同 種
免疫球蛋白亞型 | 蛋白質 一個 | 蛋白G | 免疫球蛋白亞型 | 蛋白質 一個 | 蛋白G |
人類 IgG | ++++ | ++++ | 老鼠 免疫球蛋白G | ++++ | ++++ |
人類 IgG1 | ++++ | ++++ | 老鼠 免疫球蛋白G1 | + | ++++ |
人類 IgG2 | ++++ | ++++ | 小鼠 IgG2a | ++++ | ++++ |
人類 IgG3 | + | ++++ | 小鼠 IgG2b | +++ | +++ |
人類 IgG4 | ++++ | ++++ | 老鼠 免疫球蛋白G3 | ++ | +++ |
蘇裡爾蛋白 瓊脂糖 樹脂
人類免疫球蛋白M | 使用抗人 IgM | 老鼠 免疫球蛋白M | 使用抗鼠 IgM | ||
人類免疫球蛋白E | 天然橡膠 | 天然橡膠 | 雞 IgG (卵黃抗體) | 天然橡膠 | 天然橡膠 |
人類免疫球蛋白A | + | 天然橡膠 | 乳牛 免疫球蛋白G | ++ | ++++ |
人類 IgA1 | + | 天然橡膠 | 山羊 免疫球蛋白G | + | ++ |
人類 IgA2 | + | 天然橡膠 | 山羊 免疫球蛋白G1 | + | ++++ |
人類免疫球蛋白D | 使用抗人 IgD | 山羊 免疫球蛋白G2 | ++++ | ++++ | |
鼠 免疫球蛋白G | + | ++ | 山羊 免疫球蛋白M | 天然橡膠 | 天然橡膠 |
鼠 免疫球蛋白G1 | 天然橡膠 | + | 天竺鼠 免疫球蛋白G | ++++ | ++ |
鼠 免疫球蛋白G2a | 天然橡膠 | 天然橡膠 | 天竺鼠 免疫球蛋白G1 | ++++ | ++ |
鼠 免疫球蛋白G2b | 天然橡膠 | + | 天竺鼠 免疫球蛋白G2 | ++++ | ++ |
鼠 免疫球蛋白G3 | + | ++ | 倉鼠 IgG | + | ++ |
綿羊 IgG | + | ++ | 馬 免疫球蛋白G | ++ | ++++ |
綿羊 IgG1 | + | ++ | 兔子 免疫球蛋白G | ++++ | +++ |
綿羊 IgG2 | + | ++ | 兔子 免疫球蛋白M | 天然橡膠 | 天然橡膠 |
綿羊免疫球蛋白M | 天然橡膠 | 天然橡膠 | 兔 所有同種型 | +++ | ++ |
豬 免疫球蛋白G | +++ | +++ | 猴免疫球蛋白G | ++++ | ++++ |
貓 免疫球蛋白G | ++++ | + | 驢免疫球蛋白G | ++ | ++++ |
狗 免疫球蛋白G | ++ | + | | | |
(+)= 弱結合; (++)= 中等結合; (++++)= 強結合; 天然產物儲備量= 不是 受到推崇的; (-)= 未經測試; |
付款和安全
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