UltraNuclease，又稱非限制性內切酶、廣譜核酸酶，是一種來自黏質沙雷氏菌的非特異性內切酶，可水解核酸中任意核苷酸之間的內部磷酸二酯鍵，生成長度為2-5個鹼基的5'-單磷酸寡核苷酸。它可以在非常廣泛的條件下（6 M 尿素、0.1 M 鹽酸胍、0.4% Triton X-100、0.1% SDS、1 mM EDTA、1 mM PMSF）降解各種形式（雙鏈、單鏈、線性、環狀、天然或變性）的 DNA 和 RNA，並廣泛用於從生物製品中去除核酸。隨後也可採用對應的方法去除UltraNuclease。

本試劑盒採用雙抗體夾心酵素連結免疫吸附試驗（夾心ELISA）的原理，檢測變性及非變性的UltraNuclease的殘留。首先，用抗UltraNuclease兔多株抗體包被微孔板，形成固相抗體。其次，將UltraNuclease標準品和檢測樣本加入固相抗體微孔板中，再加入生物素標記的Anti-UltraNuclease多株抗體，最後加入辣根過氧化物酶標記的鏈黴親和素（SA-HRP），形成抗體+抗原+抗體-Biotin+SA-HRP複合物。隨後，向複合物中加入TMB底物，洗滌複合物後觀察顯色反應。 TMB在HRP酶的催化下變成藍色，最後在酸的作用下變成黃色，且顏色的深淺與樣本中UltraNuclease的量呈正相關。

此試劑盒檢測定量範圍為0.047～3ng/mL；檢測下限為23.5 pg/mL。

特徵

• 高度靈敏度：檢測過程中和最終生物樣本中少至 23 pg/ml 的 UltraNuclease 殘留量。
• 確保準確度：可以準確檢測UltraNuclease殘留量，回收率為80%-110%。
• 特異性：配合使用 Yeasen UltraNuclease可以準確檢測出殘留物。
• 穩定：批間差異小，37℃放置6天，試劑盒性質不受影響。
• 訊號擷取方便：採用Biotin-Streptavidin系統，可穩定放大訊號。
• 完整的套件：套件中提供所有關鍵組件，使用起來具有成本效益。

應用

• 生物製品中殘留超核酸酶檢測

規格

成分

運輸和儲存

UltraNuclease ELISA 試劑盒附冰袋，可在 2°C ~8°C 下保存。未開封的產品有效期限為一年。試劑一旦開封，有效期限為半年。切勿冷凍本產品。

配製試劑的貯存：

1. 稀釋後的洗滌緩衝液和稀釋緩衝液可在2°C~8°C保存1週

2. 標準品36701-C為液態，2°C~8°C保存期間為1年

3. 配製好的檢測抗體及終止液可在2°C~8°C保存1個月

數位

• 特異性示範

圖1. UltraNuclease ELISA試劑盒的特異性如上圖所示。

估計8個模擬樣本與試劑盒中的抗體未發生特異性反應。 8個樣本與陰性樣本之間無明顯差異。 （*：與陰性樣本有顯著差異；NS：與陰性樣本無顯著差異）

• 精密顯示

一個）

B）

圖 2. UCF.ME™ UltraNuclease ELISA 的精密度測定方法如上所述 方案。

標準曲線上每個濃度進行6次重複檢測，CV%均低於5%（圖2A）。 3 位分析人員進行了 UCF.ME™ UltraNuclease ELISA 實驗，CV% 均低於 15%（圖 2B）。

• 準確性驗證

一個）

B）

圖 3. UCF.ME™ 的準確性 UltraNuclease ELISA 是 依照以下方案進行測定。

將 UltraNuclease 單獨加入 5 μg/mL 細胞裂解溶液（HEK293、E.coli、CHO 和 Vero）中，最終濃度為。為 1.5 ng/mL。在不同細胞樣本中的準確度優於其他供應商（圖3A）。將 UltraNuclease 加到實際樣品（由客戶提供）中，然後連續 2 倍稀釋，從 3ng/mL 稀釋至 0.093ng/mL。加標回收率均介於80%~110%之間（圖3B）。