描述
雙股 RNA(dsRNA)是 mRNA 體外轉錄過程中的副產物。這種副產品在人體內具有免疫原性,能夠激發免疫反應,進而降低 mRNA 水平。這使得 dsRNA 成為一種麻煩的製程雜質,需要徹底消除並嚴格控制其殘留存在。
為了解決這個問題,雙股 RNA(dsRNA)ELISA 檢測試劑盒採用雙抗體夾心酵素連結免疫吸附測定(ELISA)的實驗原理來量化殘留的 dsRNA。 此試劑盒不僅可用於常規dsRNA的檢測,還可用於假UTP、N1-Me-假UTP 以及 5-OMe-UTP 修飾的 dsRNA。
該過程包括將標準品和測試樣本添加到先前塗有抗 dsRNA 抗體的酶板(指定為 36717-A)上。隨後,以稀釋形式添加生物素標記的 dsRNA 檢測抗體 (36717-F)。最後,引入鏈黴親和素-HRP (SA-HRP) (36717-G) 以形成由抗體、抗原、生物素和 SA-HRP 組成的複合物。
洗板後,加入 TMB 顯色溶液 (36717-K) 開始顯色。在HRP酶催化作用下,TMB由無色變成藍色,可加入終止液(36717-L)來停止此過程。最終,這種轉變產生了黃色色調,其強度與樣本中鑑定的 dsRNA 的數量呈正相關。
此試劑盒用途廣泛,能夠優化生物製品純化過程、中間階段的雜質控制以及最終產品評估的放行測試。
磷產品 五化合 報告
成分
不。 | 姓名 | 36717ES48 | 36717ES96 |
36717-A | 抗 dsRNA 塗層微量滴定條 | 四十八 電視 | 96噸 |
36717-B | STD 1:未經修改,5 ng/μL | 7.5 微升 | 15 微升 |
36717-C | STD 2:修飾後的 pUTP,5 ng/μL | 7.5 微升 | 15 微升 |
36717-D | STD 3:N1-Me-pUTP 修飾,5 ng/μL | 7.5 微升 | 15 微升 |
36717-E | STD 4:5-OMe-UTP 修飾,5 ng/μL | 7.5 微升 | 15 微升 |
36717-F | 偵測 抗體:生物素偶聯 抗體(100x) | 60 微升 | 120 微升 |
36717-G | 鏈黴親和素-HRP (100x) | 60 微升 | 120 微升 |
36717-H | 稀釋緩衝液 1 | 二十五 毫升 | 50 毫升 |
36717-I | 稀釋緩衝液 2 | 15 毫升 | 三十 毫升 |
36717-J | 濃縮洗滌緩衝液(20×) | 20 毫升 | 40 毫升 |
36717-K | TMB 底物 | 6 毫升 | 12 毫升 |
36717-L | 停止解決方案 | 3 毫升 | 6 毫升 |
36717-M | 封板機 | 2 | 4 |
運輸和儲存
此套件附有冰袋,可在 2°C ~8°C 下保存。未開封的產品有效期限為一年。試劑一旦開封,有效期限為半年。切勿冷凍本產品。
指示
1. 實驗前準備
1)本試劑盒中未提供,但實驗必需的實驗材料:
一個。無 RNase 吸頭;
b.無RNase離心管;
c.無塵紙;
d.無RNase樣本預處理板;
e.去離子水或雙蒸餾水。
2)需自備但未提供的儀器設備:
一個。多功能酶標儀(含雙波長檢測模式,涵蓋450nm和650nm;可使用450nm作為檢測波長,650nm作為參考波長);
b.全自動洗板機、渦旋攪拌器、恆溫攪拌器、離心機;
c.不同規格的精密微量移液器、多通道微量移液管;
d.定時器、4℃冰箱;
e.微孔板振盪器。
2. 結果分析
一個。如果待測樣本的OD值超過標準曲線最高點的OD值,則需要將樣本稀釋後重新測定。
b.曲線開發程序:透過在 x 軸上繪製標準濃度並在 y 軸上繪製相應的校準標準吸光度值來建立標準曲線。各種繪圖和統計軟體工具可以幫助產生標準曲線和確定未知樣品濃度。本實驗建議採用四參數或五參數擬合法。最後根據標準曲線,結合樣品的稀釋倍數,計算出樣品中dsRNA的殘留量。
c.提供的標準曲線是一個說明性範例(僅供參考)。應使用針對相同實驗標準專門產生的標準曲線來確定實際樣品含量。
3.實驗流程圖
圖5 實驗流程圖
4. 產品性能
該套件的性能已經過充分評估。詳細情況請聯絡技術人員,以取得相應的性能驗證報告。
5. 筆記
- 在使用該套件之前,請仔細閱讀本使用說明書。
- 請在有效期限內使用本產品,禁止不同批次相關試劑混合。
- 所有試劑在使用前均需恢復至室溫。
- 為了您的安全和健康,請穿上實驗服和戴上一次性手套。
- 本產品僅供科學研究之用。
付款和安全
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詢問
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常問問題
本產品僅用於研究目的,不用於人類或動物的治療或診斷用途。產品和內容受以下公司的專利、商標和版權保護:
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