描述
GMyc-PCR支原體檢測試劑盒主要利用PCR方法檢測各種生物材料(如細胞培養、實驗動物分泌物、動物血清等)的支原體感染。它結合了多種優點:靈敏、特異、快速,並且可以直接用細胞培養上清液檢測。本產品採用PCR方法檢測培養細胞等生物材料中的支原體。所用引子依支原體16S-23S rRNA序列保守區設計,只特異性擴增支原體DNA,檢測敏感度高、特異性強。 PCR擴增及電泳分析僅需數小時,操作方便簡單。
細胞培養是生命科學研究中常見的實驗。與其他常用的實驗方法不同,細胞培養是一個動態的連續過程,細胞通常會對操作錯誤或污染物作出反應,而這些錯誤或污染物常常表現出異常的細胞狀態或培養基外觀。若受到支原體污染,細胞形態無明顯改變,容易被忽略。往往直到污染非常嚴重的時候才被發現。被污染的細胞膜上可能有上百個支原體,這些支原體會爭奪營養物質並釋放有毒代謝產物,嚴重影響實驗結果。
研究表明,至少有20種支原體可以污染細胞,其中最常見的有:口腔支原體(M. orale)、精氨酸支原體(精胺酸小體)、豬鼻支原體(豬鼻支原體)、發酵支原體(發酵支原體)、人型支原體(人類型支原體)、唾液支原體(唾液分枝桿菌)、肺支原體(M. 肺支原體)和梨支原體(M. pirum)。培養細胞的支原體污染率為4%~92%。污染源包括工作環境、操作者本身(某些支原體是人體的正常菌群)、培養基、血清、細胞交叉污染、實驗器材、以及用來製備細胞的原始組織或器官的污染。
確定細胞培養過程中問題的根本原因是一項困難且耗時的任務,任何突然的變化都應該懷疑,良好的測試實踐和定期的支原體污染檢測是必要的。支原體的檢測方法很多,如直接培養法、DNA螢光染色法、ELISA法、PCR法等。
特徵
- 所用引子依支原體16S-23S rRNA序列的保守區設計
- 僅特異性擴增支原體DNA
- 優異的敏感性和特異性
- 可偵測到 20 多種支原體
應用
- 支原體檢測
成分
零件編號 | 姓名 | 40601ES10 (10 次測定) | 40601ES20 (20 次檢測) |
40601-A | GMyc-1st PCR 混合物 | 250 微升 | 2×250 µL |
40601-B | GMyc-2nd PCR 混合物 | 250 微升 | 2×250 µL |
40601-C | 陽性對照模板 N | 20 微升 | 20 微升 |
【注意事項】1.長期不使用時,可冷凍保存於-85~-65℃。
2. PCR反應極為敏感。為了防止假陽性,在最後加入樣本時會加入陽性對照。
貯存
本產品在-25~-15℃可保存18個月。若長時間不使用,請遠離光照。
數位
圖1. PCR支原體檢測試劑盒電泳圖譜結果。
第一輪電泳圖如圖1A所示,第二輪電泳圖如圖1B所示。
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