描述
希夫傳輸™ 脂質體轉染試劑是一種多功能的脂質體轉染試劑,適用於DNA、RNA和寡核苷酸的轉染,對大多數真核細胞具有較高的轉染效率。其獨特的配方使其可直接加入培養基中,血清的存在不會影響轉染效率,減少了因去除血清對細胞的傷害。轉染後無需移除核酸-Hieff Trans™複合物或更換新鮮培養基,也可在4-6小時後移除。
希夫傳輸™ 以無菌液體形式供應。通常,對於24孔板轉染,每次約1.5 μL,1 mL Hieff Trans™ 可進行約660次轉染; 6孔板,每次約6 μL,1 mL Hieff Trans™可進行約660次轉染。 160 次轉染。
特徵
- 卓越的效率:在廣泛的細胞系中具有卓越的轉染性能,包括瞬時轉染和穩定轉染
- 適應性廣:在多種細胞系中均具有優異的轉染效率,且重組蛋白表現量高
- 低毒性:轉染試劑幾乎不影響各種細胞的活動
Yeasen - 操作簡單:在血清存在下已證實有效-轉染後無需更換培養基
- 成本效益:具競爭力的轉染效果,價格較實惠
應用
- 細胞轉染
規格
形式 | 液體 |
相容精華素 | 是的 |
單元格類型 | 已建立細胞系 |
樣品類型 | 質粒 DNA、合成 siRNA |
轉染技術 | 脂質轉染 |
成分
零件編號 | 姓名 | 40802ES02 | 40802ES03 | 40802ES08 |
40802 | 希夫譯™ 脂質體轉染試劑 | 0.5 毫升 | 1 毫升 | 5×1 毫升 |
運輸和儲存
產品附帶冰袋運輸,可在2-8ºC下保存一年。不要凍結!
數位
- 轉染效果驗證
圖1. Hieff Trans™脂質體轉染試劑的性能優於競爭品牌的轉染試劑(圖1a為T*品牌,圖1b為P*品牌)。
每種試劑均以96孔板形式轉染目標細胞系(圖1a中的Hela細胞系,圖1b中的DF-1細胞系)。轉染後48小時分析GFP表現。 Hieff Trans™脂質體轉染試劑比競爭品牌產品提供更高的GFP轉染效率。
- 已驗證的細胞系
產品 姓名 | 希夫 透皮脂質體 轉染 試劑 | |||||
已驗證 細胞 線條 | 293T | 卡盧 1 | HEK293 | HO1980 | N2A | TS |
293F | CHO-K1 | HEK293T | 臍靜脈內皮細胞 | NCI-H1975 | U-87 | |
293 英尺 | COS-7 | 希拉 | MCF10A | NIH-3T3 | 維羅 | |
3T3 | 東風-1 | Hep2C | MCF-7 | 神經-2a | 威海 | |
A549 | H1299 | Hep3B | MDA-MB-231 | PC-12 | WRL-68 | |
BV-2 | H520 | 肝素1-6 | MDA-MB-231-LM2-4175 | 鐳w264.7 | ||
B50 | 鈣調蛋白 | 肝癌 | 糖尿病腎病變 | SGC-7901 | ||
C2C12 | HCT116 | HK2 | 中東呼吸聯合會 | T47D | … |
圖 2. 成功轉染 Hieff Trans™ 的細胞系列表 脂質體轉染試劑(持續更新中)。
引自“利用工程化光開關 RNA 結合蛋白進行 RNA 功能和代謝的光遺傳學控制。Nat Biotechnol。2022 年 1 月 3 日。doi:10.1038/s41587-021-01112-1”
引自“BRCA1-BARD1 複合物募集至受損染色質的結構洞察。Mol Cell。2021 年 7 月 1 日;81(13):2765-2777.e6。doi:10.1016/j.molcel.2021.05.010。”
引自「UBQLN2-HSP70 軸減少聚-Gly-Ala 聚集體並減輕 C9ORF72 動物模型中的行為缺陷。神經元。2021 年 6 月 16 日;109(12):1949-1962.e6.doi: 10.101/j.j020.10.1020.
希夫傳輸™ 脂質體轉染試劑 常問問題
(1)問:製備核酸轉染試劑複合物時可以存在血清嗎?
答:血清的存在會影響脂質體的形成。建議在製備核酸轉染試劑複合物時使用無血清培養基(通常為MEM培養基)。
(2)問:轉染試劑可以冷凍嗎?
答:不行。
(3)問:使用Hieff Trans™脂質體核酸轉染試劑時應注意什麼?
A:1)轉染操作時,細胞匯合度達80%-95%為佳,具體接種密度依細胞狀況決定;
2)使用高純度的DNA有助於獲得更高的轉染效率;
3)製備轉染複合物時需以無血清培養基稀釋DNA及轉染試劑;
4)轉染時培養基中不能添加抗生素;
5)首次使用時應優化DNA濃度和陽離子脂質體試劑的用量,以獲得最大的轉染效率。 DNA與轉染試劑的比例為 一般建議為1:2-1:3。
(4)轉染後需要終止嗎?
答:不需要。脂質體複合物可穩定保存 6 小時。如果轉染前沒有更換細胞培養基,為了確保細胞正常生長所需的營養,需在4~6小時後再換成新培養基。然而,如果轉染前已更換培養基,則脂質體轉染後無需更換培養基。
(5)問:提高轉染效率該注意什麼?
答:a:轉染時細胞密度為90%-95%。
b:轉染時使用MEM無血清培養基進行核酸和脂質體稀釋。
c:轉染後4-6小時可換液。
(6)問:DNA和siRNA可以共轉染嗎?效果如何?
A:可共轉染,但建議單獨轉染,且DNA轉染應在siRNA轉染6小時後進行。若兩者聯合操作,siRNA的轉染效率會較差。
(7)此轉染試劑可以用於慢病毒包裝轉染嗎?
A:慢病毒包裝是可以的,但是慢病毒包裝的效率和轉染的效率沒有必然聯繫,還和包裝質粒的選擇以及質粒之間的配比有關。
(8)問:Hieff Trans™脂質體核酸轉染試劑可以用於懸浮細胞的轉染嗎?
答:Hieff Trans™脂質體核酸轉染試劑可用於懸浮細胞轉染,詳情請參考實驗方案。此外,我們也推出了專門針對懸浮細胞的轉染試劑(Cat No.40805,懸浮細胞脂質體核酸轉染試劑)。
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