規格

本產品以溶液形式提供，將粉末在 0.9% NaCl 中配製為 10 mg/mL 溶液，然後使用 0.22 μm 過濾器進行除菌。通常以 1:1000-1:2000 的比例稀釋使用，具體稀釋比例取決於細胞類型，如相關文獻所述。

運輸和儲存

建議在-20℃下運輸和儲存，保存期限為2年。建議分裝並儲存以避免重複的凍融循環。

預防措施:

1. 為了安全和健康，請穿戴實驗室服裝和一次性手套。

2. 本產品僅供研究之用。

操作步驟

（僅供參考，具體濃度可能會有所不同，請參閱相關文獻）：

注意：Polybrene對某些細胞（如終末分化神經元，DC細胞）可能表現出明顯的毒性，建議在初次使用時進行毒性測試。

實驗一：逆轉錄病毒感染

1. 重組逆轉錄病毒庫存的製備：在含有 5 mL 生長培養基（5% 血清）的 100 mm 培養皿中培養含有單層轉染逆轉錄病毒包裝細胞的細胞。 24 小時後，移除培養基並以 0.45 μm 過濾器過濾。

2. 培養感染細胞：在 100 mm 培養皿中，加入 10 mL 完全生長培養基，細胞密度為 5×10⁵ 每道菜。

3. 病毒感染：細胞培養24小時後，移除完全培養基。以 2 mL 含有 Polybrene（終濃度：5-10 μg/mL）的病毒上清液在 37°C 下感染細胞 3-6 小時。

4. 收集病毒顆粒：添加 8 mL 完全生長培養基。培養2-3天后，收集培養基，獲得病毒顆粒。

實驗二：轉染

1. 在完全生長培養基中培養細胞，細胞密度約 50%。

2. 細胞培養 18-24 小時後，製備 DNA-生長培養基-Polybrene 混合物。加入完全生長培養基 (60 mm 培養皿 2 mL，100 mm 培養皿 3 mL) 並預熱至 37°C。輕輕混合10 ng~10 µg 質粒。 加入 Polybrene，使最終濃度為 5-10 μg/mL。輕輕攪拌。應按照指定的順序添加每個組件。

3. 除去培養基，將 DNA-生長培養基-Polybrene 溶液加入細胞中，在 37°C 培養 6-20 小時。在細胞培養的前 6 小時內每 1.5 小時輕輕混合一次。

4. 去除 DNA 生長培養基-Polybrene 溶液。用 DMSO 衝擊溶液（1× HBSS 中的 15% DMSO）覆蓋細胞。每次添加溶液時，輕輕搖晃培養皿 10 秒鐘，以確保均勻分佈。將細胞在 37°C 下孵育 4 分鐘。

5. 立即移除 DMSO 衝擊溶液並以完全生長培養基輕輕清洗細胞兩次。對於 60 mm 培養皿，每次用 5 mL 培養基清洗，對於 100 mm 培養皿，每次用 10 mL 培養基清洗。

6. 在細胞中添加完全生長培養基。

7. 蛋白質表現：培養24-72小時後，根據需要收集細胞進行蛋白質表現分析。

細胞選擇：培養24-72小時後，依照細胞狀態，改用新鮮選擇培養基繼續進行細胞選擇。