描述
Hieff Trans™ 體外 siRNA/miRNA 轉染試劑是一種 PEI 陽離子、兩親性轉染試劑,專門用於將 siRNA 轉染到哺乳動物細胞中。適用於siRNA和miRNA的轉染。此轉染試劑包覆siRNA或miRNA,形成陽離子複合物,與細胞表面帶負電荷的蛋白聚醣相互作用並吸附於細胞表面,透過內吞作用進入細胞內,形成包涵體。轉染試劑可充當質子海綿,吸收 H+ 在溶小體中,質子的持續流入導致複合物膨脹和破裂,從而將外源的siRNA或miRNA釋放到細胞質中。
本產品在廣泛的細胞系中可實現1 nM siRNA的表達效率達到90%以上,並避免了脫靶效應。適用於多種細胞的轉染,包括Hela、MCF-7、HepG2、CHO等貼壁細胞;而對於難以轉染的懸浮細胞系,如K562或THP-1細胞,可以達到80%的沉默效率;包括一些原代細胞、原代人纖維母細胞、原代人肝細胞等,都可以達到80%的沉默效率。
特徵
- 毒性低:轉染後的細胞仍保持良好的活性。
- 適應性廣:普通細胞及難轉染的原代細胞全覆蓋。
應用
- 細胞轉染
規格
物理和化學性質 | 資訊 |
形式 | 液體 |
相容精華素 | 是的 |
單元格類型 | 已建立細胞系 |
樣品類型 | siRNA/miRNA |
轉染技術 | 基於 PEI 的轉染 |
成分
零件編號 | 姓名 | 40806ES01 | 40821ES02 | 40821ES03 |
40806 | 希夫傳輸™ 體外 siRNA/miRNA 轉染試劑 | 0.1 毫升 | 0.5 毫升 | 1 毫升 |
貯存
本產品應在 2-8ºC 下儲存一年。不要凍結!
數位
- 轉染效果驗證
圖1. Hieff Trans™體外siRNA/miRNA轉染試劑的轉染效率如上圖所示。
(1)問:DNA轉染和siRNA轉染有什麼不同?
答:1.由於siRNA只有20個鹼基對,因此比具有數千個甚至超過10,000個鹼基對的DNA小得多。
2. 用於轉染DNA的轉染試劑和方法不適合轉染siRNA。
3. siRNA轉染對轉染試劑的細胞毒性需求比DNA轉染更為嚴格。
(2)轉染後需要更換轉染試劑嗎?
答:對於介質變化,可分兩種情況:
1.若轉染前沒有換液,則轉染後6小時左右應換液,以確保細胞生長所需的營養;
2. 轉染前若有變化 當培養基營養缺乏時可照常更換培養基。
(3)問:PEI轉染試劑對siRNA和質粒的轉染效率如何?
答:此PEI轉染試劑是專門針對siRNA開發的,不建議用於質粒轉染。
(4)問:轉染試劑可以冷凍嗎?
答:不要冷凍,因為轉染試劑是PEI陽離子轉染試劑。低溫冷凍會破壞PEI轉染試劑的活性。因此最好保存在4度下才能維持最佳的轉染效率。
(5)如何提高轉染效率?
A:a:轉染時的細胞密度,30%-50%。
b:轉染過程中應使用Opti-MEM無血清培養基進行siRNA及脂質體稀釋。
c:轉染後4-6小時可換液。
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