描述
Hieff Trans™通用轉染試劑是基於最新奈米技術開發的多用途、方便、高效的脂質體轉染試劑。適用於DNA、RNA和寡核苷酸的轉染，對包括原代細胞，神經元在內的難轉染細胞有較高的轉染效率。其獨特的配方使其可直接加入培養基中，血清的存在不會影響轉染效率，減少了因去除血清對細胞的傷害。轉染後不需移除核酸-轉染試劑複合物或更換新鮮培養基，也可依細胞的營養狀況於4-6小時後更換新鮮培養基。
產品組件
| 零件編號 | 成分 | 貓號/尺寸 | ||
| 40808ES02 | 40808ES03 | 40808ES03 | ||
| 40808-A | 環球-A | 0.5 毫升 | 1 毫升 | 5×1毫升 |
| 40808-B | 通用-B | 0.5 毫升 | 1 毫升 | 5×1毫升 |
運輸和儲存
產品附冰袋運輸，2-8℃可保存一年。不要凍結！
注意事項
1)轉染操作時，細胞匯合度達70%-90%為佳，具體接種密度依細胞狀況決定。
2)轉染複合物的製備需要在無血清培養基中稀釋DNA和轉染試劑。
3)轉染時培養基中不能添加抗生素。
4）使用高純度的DNA或RNA有助於獲得更高的轉染效率，質粒中的內毒素是轉染的大敵。
5）保存於2-8℃，注意不要長時間重複打開蓋子。
6)首次使用時應優化核酸濃度和試劑體積，以獲得最大的轉染效率。
7）本產品僅供科學研究之用！
指示
DNA 轉染
[注意] 轉染試劑的用量受細胞類型和其他實驗條件的影響。建議首次使用時設定梯度以優化最佳使用量。
1) 將細胞接種，轉染時細胞融合度應達70％-90％。
2) 依照下表以 Opti-MEM 培養基稀釋 Universal-B 溶液，並輕輕混合。
3) 以 Opti-MEM 培養基稀釋 DNA 以獲得 DNA 預混液，然後加入 Universal-A 溶液並輕輕混合以獲得稀釋的 DNA。
4) 將稀釋的 DNA 加入稀釋的 Universal-B 溶液中（比例為 1:1）。
5) 室溫孵育 5 分鐘。
6) 將 DNA-脂質體複合物逐滴加入細胞中，輕輕混合。
7) 在37°C、5％CO2培養箱中孵育48-96小時，直至進行基因表現分析。
siRNA 的轉染
siRNA 的轉染步驟與 DNA 轉染步驟相同，但稀釋 siRNA 時不需要加入 Universal-A 溶液（步驟 3）。
表1 不同細胞培養容器的轉染量（僅供參考）
| 細胞培養容器 | 96 孔 | 24 孔 | 6孔 | |
| 貼壁細胞 | 1-4×104 | 0.5-2×105 | 0.25-1×106 | |
| 依照下表以 Opti-MEM 培養基稀釋 Universal-B 溶液並輕輕混合。 | Opti-MEM培養基 | 5 微升 | 25 微升 | 125 微升 |
| 通用-B | 0.2 微升 | 1 微升 | 5 微升 | |
| 用 Opti-MEM 培養基稀釋 DNA 以獲得 DNA 預混物，然後加入 Universal-A 溶液並輕輕混合以獲得稀釋的 DNA。 | Opti-MEM培養基 | 5 微升 | 25 微升 | 125 微升 |
| DNA（0.5~5 μg/μL） | 0.1微克 | 0.5微克 | 2.5微克 | |
| 通用-A（2 μL/μg DNA） | 0.2 微升 | 1 微升 | 5 微升 | |
| 將稀釋的 DNA 加入稀釋的 Universal-B 溶液中（比例為 1:1）。 | 稀釋 DNA 溶液 | 5 微升 | 25 微升 | 125 微升 |
| 通用-B | 5 微升 | 25 微升 | 125 微升 | |
| 室溫下孵育 5 分鐘。 | ||||
| DNA-脂質體複合物 | 零件（每孔） | 96 孔 | 24 孔 | 6孔 |
| 優化MEM | 10 微升 | 50 μL | 250 微升 | |
| DNA（0.5～5微克/微升） | 0.1微克 | 0.5微克 | 2.5微克 | |
| 通用-B | 0.2 微升 | 1 微升 | 5 微升 | |
| 環球-A | 0.2 微升 | 1 微升 | 5 微升 | |
| 將 DNA-脂質體複合物逐滴加入細胞中並輕輕混合。 | DNA-脂質體複合物 | 10 微升 | 50 μL | 250 微升 |
【注】表中用量僅供參考。所使用的DNA和Universal-B溶液的具體量應根據細胞類型和其他實驗條件進行優化。建議保持比例在1：0.5-1：5之間。
（1）問：製備核酸轉染試劑複合物時可以存在血清嗎？
答：血清的存在會影響脂質體的形成。建議製備核酸轉染試劑複合物時使用無血清培養基（一般為MEM培養基）。
（2）問：轉染試劑可以冷凍嗎？
答：本試劑需保存於2-8℃，且應避免反覆、長時間開蓋，長期開蓋會導致脂質體氧化，影響轉染效率。
（3）問：使用Hieff Trans™通用轉染試劑時應注意什麼？
A：1）轉染操作時，細胞匯合度達70%-90%為佳，具體接種密度依細胞狀況決定。
2)轉染複合物的製備需要在無血清培養基中稀釋DNA和轉染試劑。
3)轉染時培養基中不能添加抗生素。
4）使用高純度的DNA或RNA有助於獲得更高的轉染效率，質粒中的內毒素是轉染的大敵。
5）保存於2-8℃，注意不要長時間重複打開蓋子。
6)首次使用時應優化核酸濃度和試劑體積，以獲得最高的轉染效率。
（4）轉染後需要終止嗎？
答：不需要。轉染後不需移除核酸-轉染試劑複合物或更換新鮮培養基，也可依細胞的營養狀況於4-6小時後更換新鮮培養基。
（5）轉染試劑可以用於病毒載體包裝的轉染嗎？
答：是的。病毒載體包裝效率與轉染效率不一定相關，也與包裝質粒的選擇以及質粒之間的配比有關。
付款和安全
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