مقدمة
تلعب مجموعات تحليل جينات لوسيفيراز، باعتبارها أداة أساسية لا غنى عنها في تطوير الأدوية، دورًا حاسمًا في العمليات الرئيسية مثل الفحص عالي الإنتاجية وتقييم الفعالية والتحقق من صحة الهدف نظرًا لقدرتها على مراقبة التعبير الجيني ونقل الإشارة في الوقت الفعلي. أدى تطبيق هذه التكنولوجيا إلى تحسين كفاءة فحص الأدوية وتقييمها بشكل كبير، مما أدى إلى تسريع اكتشاف وتطوير أدوية جديدة.
مبدأ اكتشاف جينات لوسيفيراز ريبورتر
تمكن تقنية الكشف عن جينات لوسيفيراز المراسل من التحليل الكمي لنشاط لوسيفيراز اليراع من خلال تحفيز أكسدة لوسيفيرين إلى أوكسيلوسيفيرين وتوليد التلألؤ الحيوي. تتمتع هذه التقنية بقيمة تطبيقية كبيرة في مجالات التحقق من صحة جين الهدف miRNA وتنظيم النشاط النسخي للمروج. من خلال إدخال عناصر تنظيمية للجين المستهدف أعلى وأسفل جين لوسيفيراز لبناء بلازميد مراسل لوسيفيراز، يمكن تحويل الخلايا وتعريضها للتحفيز أو العلاج المناسب. بعد ذلك، من خلال تحليل الخلايا وقياس نشاط لوسيفيراز، يمكن تقييم التغيرات في نشاط العناصر التنظيمية في ظل ظروف تحفيز مختلفة، وبالتالي اكتساب فهم أعمق للآليات التنظيمية للجين تعبير.


الاختلافات بين تطبيقات الكشف عن اللوسيفيراز المفرد والمزدوج
تنقسم اختبارات الجينات المراسلة بشكل أساسي إلى اختبارات الجينات المراسلة أحادية اللوسيفيراز واختبارات الجينات المراسلة ثنائية اللوسيفيراز. في التطبيقات المحددة، كيف يمكنك تحديد ما إذا كانت التجربة تستخدم نظام الكشف أحادي اللوسيفيراز أو ثنائي اللوسيفيراز؟ دعنا نلقي نظرة على الاختلافات.
نظام اختبار لوسيفيراز المراسل الفردي
عدد الجينات المراسلة: جين واحد لمراسل لوسيفيراز اليراعات؛
نوع النقل: يتم استخدام بلازميد جين مراسل واحد، بعد التحويل الجيني، واختيار الدواء لبناء سلالة خلية جين مراسل مستقرة تعبر عن لوسيفيراز؛
عملية الكشف: كل ما يلزم هو الكشف عن إشارة اليراع لوسيفيراز، التشغيل بسيط، فترة الكشف قصيرة، مناسبة لفحص الأدوية عالية الإنتاجية؛
تحليل سيناريو التطبيق: عادةً ما يتم ذلك من خلال إنشاء سلالة خلايا أحادية النسيلة مستقرة ومفرطة التعبير، حيث أن مستوى التعبير لهذه السلالات الخلوية مستقر وموحد نسبيًا، دون تأثير الاختلافات التجريبية بسبب كفاءة النقل وقابلية الخلايا للبقاء. العملية بسيطة، ونظرًا لأن إشارة اليراع فقط هي التي يتم اكتشافها، فإن تحليل البيانات أكثر ملاءمة. إلى جانب مزايا وقت الكشف القصير، فهي مناسبة بشكل خاص لفحص الأدوية عالية الإنتاجية وتلبي احتياجات الكشف عن العينات واسعة النطاق.
نظام الكشف عن الجينات باستخدام المراسل المزدوج للوسيفيراز
كمية الجينات المبلغ عنها: جينات المراسل المزدوج لليوسيفيراز اليراع واليوسيفيراز رينيلا؛
نوع النقل: النقل المشترك لاثنين من البلازميدات الجينية المراسلة، وذلك بشكل أساسي من خلال النقل العابر؛
عملية الكشف: من الضروري اكتشاف إشارة اليراع أولاً ثم إشارة رينيلا، ويتم استخدام نسبة الاثنتين (اليراع/رينيلا) للحساب النهائي للبيانات؛
تحليل سيناريو التطبيق: يتم ذلك عادةً من خلال التحويل الجيني المؤقت، مع التحويل المشترك للبلازميد الذي يحتوي على جين رينيلا لوسيفيراز كمرجع داخلي، مما يوفر معيارًا للتجربة، وبالتالي يقلل من تدخل العوامل الخارجية مثل قابلية الخلايا للبقاء وكفاءة التحويل الجيني. من خلال حساب النسبة، من الممكن تصحيح الاختلافات في عدد الخلايا وكفاءة التحويل الجيني ونشاط الخلايا، مما يحسن دقة النتائج التجريبية. إنها أداة مهمة في مجالات تنظيم التعبير الجيني ومسارات نقل الإشارة وفحص الأدوية.
سلسلة المنتجات
ياسين توفر سلسلة منتجات Luciferase Reporter Gene Detection حلاً مناسبًا وفعالًا للكشف الكمي. يبسط التصميم أحادي المكون عملية الاستخدام، والجمع المثالي بين الحساسية العالية ونصف عمر الإشارة الطويل للغاية الذي يبلغ 5 ساعات يلبي احتياجات الكشف عن الأدوية على نطاق واسع. نقدم ثلاثة منتجات: Bio-One Step وSteady-One Step وBright-One Step، للتكيف مع متطلبات الحساسية والاستقرار المختلفة.
اسم المنتج | بيو-وان ستيب | خطوة واحدة ثابتة | برايت-وان ستيب |
رمز المنتج | |||
سيناريوهات التطبيق وخصائصها | تحقق هذه المجموعة توازنًا نسبيًا بين كثافة الإشارة واستقرارها. فهي تحافظ على كثافة إشارة عالية نسبيًا مع الحفاظ أيضًا على كثافة الإشارة مستقرة نسبيًا على مدى فترة زمنية معينة. | يمكن أن يستمر نصف العمر لأكثر من 5 ساعات. وخاصة خلال أول ساعتين، تكون تغييرات قيمة التلألؤ ضئيلة. وهو مناسب للتجارب عالية الإنتاجية أو التجارب التي تحتوي على 384 بئرًا. | حساسية عالية وكثافة إشارة عالية. مناسب للتجارب التي تتطلب حساسية عالية. |
نصف عمر الإشارة | 60 دقيقة | 5 ساعات | 30 دقيقة |
الخصائص التشغيلية | خطوة واحدة | خطوة واحدة | خطوة واحدة |
مزايا المنتج
عمر النصف الطويل للإشارة: يمكن أن يصل عمر النصف للإشارة إلى ما يصل إلى 5 ساعات، مما يلبي احتياجات التجارب عالية الإنتاجية وتجنب اختلافات الإشارة الناجمة عن فارق التوقيت بين البئر الأول والأخير بسبب العدد الكبير من العينات، مما يضمن نتائج أكثر استقرارًا وموثوقية.
إشارة فلورية قوية: يمكن أن تصل قيمة الإشارة إلى 8 أوامر من حيث الحجم، مما يوفر نافذة اكتشاف كبيرة ودعمًا قويًا للبيانات للفحص المبكر للأدوية وتقييم فعاليتها.
تشغيل سهل: تتجنب عملية التشغيل بخطوة واحدة الإجراءات التجريبية المعقدة. ما عليك سوى إضافة كاشف الكشف والانتظار لمدة 5 دقائق قبل تشغيل الجهاز للكشف.
اختيارات متعددة: وفقًا لسيناريوهات التطبيق المختلفة، تتوفر 3 منتجات مختلفة، ويمكن اختيارها بناءً على المتطلبات التجريبية لقيمة الإشارة واستقرار الإشارة.
بيانات المنتج
01 مقارنة الأداء لـ Yeasen جين المراسل المختلف مجموعات التحليل
التحقق من ثلاثة أنواع من مجموعات التحليل تم إجراء هذه الدراسة على خطوط الخلايا التي تعبر بشكل ثابت عن لوسيفيراز اليراعات، وأظهرت النتائج أن منتج Bright-One Step له قيم إشارة أعلى؛ ومنتج Steady-One Step له عمر نصف إشارة أطول وإشارات أكثر استقرارًا؛ ومنتج Bio-One Step لا يحتوي على قيم إشارة عالية فحسب، بل يحافظ أيضًا على عمر نصف إشارة أطول.
الشكل 1. مقارنة الأداء لمجموعات اختبار جينات Yeasen Reporter المختلفة
02 مقارنة بين كاشف الكشف عن الجينات Yeasen Bio-One Step Luciferase Reporter والمنتجات المنافسة
عند استخدام Yeasen Bio-One Step والمنافس P والمنافس V على سلالة خلوية تفرز بشكل ثابت إنزيم اليراع لوسيفيراز، تظهر النتائج أن قيمة الإشارة ونصف عمر الإشارة لـ Yeasen Bio-One Step متوافقة بشكل أساسي مع المنافس P، ونصف عمر الإشارة أعلى من المنافس V.
الشكل 2. مقارنة كاشف الكشف عن الجينات Yeasen Bio-One Step Luciferase Reporter مع المنافسين
03 اختبار استقرار التجميد والذوبان باستخدام كاشف الكشف عن جينات لوسيفيراز بايو-وان ستيب من ييسن
لقد خضع كاشف الكشف عن الجينات Yeasen Bio-One Step Luciferase Reporter لتجارب تجميد وإذابة متكررة، وتظهر النتائج أنه حتى بعد 5 دورات تجميد وإذابة، ظل أداء المنتج مستقراً دون تغييرات كبيرة.
الشكل 3.اختبار التجميد والذوبان المتكرر لكاشف الكشف عن جينات Yeasen Bio-One Step Luciferase Reporter
الإجراءات التشغيلية
01 نقل الخلايا
قم بإضافة الكاشف مباشرة إلى تعليق الخلايا، ثم قم بسحبه لأعلى ولأسفل 5 مرات لضمان الخلط الكامل، وانتظر لمدة 5 دقائق للسماح بتحلل الخلايا بالكامل.
02 تحميل العينة
قم بسحب 100 ميكرولتر من الخليط (كاشف الكشف + وسط زراعة الخلايا) إلى كل بئر من لوحة الكشف.
03 الكشف عن الفلورسنت
اضبط المعلمات على قارئ اللوحة. ضع لوحة الكشف في قارئ اللوحة، وقم بهزها لبضع ثوانٍ، ثم تابع عملية الكشف.
قائمة المنتجات
فئة المنتج
| اسم المنتج | رمز المنتج | مواصفات المنتج |
مجموعة اختبار جين لوسيفيراز ريبورتر | 11411ES60/80/81 | 100 طن/10×100 طن/1000 طن | |
11413ES60/80/81 | 100 طن/10×100 طن/1000 طن | ||
11412ES60/80/81 | 100 طن/10×100 طن/1000 طن | ||
مجموعة اختبار جينات المراسل المزدوج للوسيفيراز
| 11402ES60/80 | 100 طن/1000 طن | |
11405ES60/80 | 100 طن/1000 طن |