1 آلية عمل بلاستيسيدين س
بلاستيسيدين س هو مضاد حيوي نوكليوسيدي مستخرج من Streptomyces griseochromogenes، والذي يثبط بشكل خاص تخليق البروتين في الخلايا البدائية والحقيقية عن طريق التدخل في تكوين الروابط الببتيدية في الريبوسوم. تتضمن آلية عمله منع تحلل الحمض النووي الريبي الناقل الببتيدي الناتج عن عوامل الإطلاق وتعزيز ارتباط الحمض النووي الريبي الناقل بالوحدة الفرعية الريبوسومية الكبيرة، وبالتالي تثبيط تكوين الروابط الببتيدية إلى حد ما.
يتميز بلاستيسيدين إس بسرعة وفعالية العمل، ويمكن أن تؤدي تركيزات المضادات الحيوية المنخفضة جدًا إلى موت الخلايا بسرعة. كما أنه لا يثبط تخليق البروتين في البكتيريا والكائنات حقيقية النواة فحسب، بل إنه أيضًا فعال ضد الفطريات والديدان الخيطية وخلايا الأورام. غالبًا ما يستخدم بلاستيسيدين إس لفحص الخلايا المحولة التي تحمل جينات bsr أو BSD.
2 تطبيق بلاستيسيدين س
2.1 زراعة الخلايا والفحص
- الخلايا الثديية: غالبًا ما يستخدم blast S لفحص الخلايا المحولة التي تحمل جينات bsr أو BSD. كانت جينات المقاومة هذه، من B. cereus وAspergillus على التوالي، قادرة على تحويل الميورانسيدين إلى مشتقات غير ضارة، وبالتالي تمكين القتل الانتقائي للخلايا التي لا تحمل جينات المقاومة، مع تركيزات عاملة من Blasticidin S في الخلايا الثديية تتراوح من 1 إلى 50 ميكروجرام/مل.
| جإيل | جإينوس | االمنظمة | جوسط ثقافي | تركيز بلاستيسيدين S (ميكروجرام/مل) |
| هيلا | بشر | رَحِم | دي إم إي إم | 3-10 |
| هيك293 | بشر | كلية | دي إم إي إم | 3-10 |
| ب16 | الفأر | سرطان الجلد | ار بي ام اي | 3-10 |
| كمبيوتر شخصي 1.0 | الهامستر | سرطان الغدة الدرقية | ار بي ام اي | 10-30 |
| تشو | الهامستر | المبيض | دي إم إي إم | 5-15 |
- اختيار البكتيريا: في ثقافة البكتيريا، يمكن للتركيز الموصى به من 25 إلى 100 ميكروجرام/مل أن يسبب موت الخلايا التي لا تحتوي على جينات المقاومة بسرعة.
تعتبر البكتيريا القولونية أقل حساسية قليلاً لـ Blasticidin S، ولكن المتحولات متسامحة مع Blasticidin S ويمكن فحصها باستخدام وسط LB منخفض الملح (درجة الحموضة 8) في نطاق تركيز يتراوح بين 50-100 ميكروجرام / مل من Blasticidin S، ويؤدي ارتفاع درجة الحموضة إلى تحسين نشاط Blasticidin S.
- الخلايا النباتية: تنطبق أيضًا على تجارب نقل الجينات في الخلايا النباتية، ويتم استخدام bsr وBSD بشكل شائع كعلامات فحص.
2.2 البحث في تخليق البروتين
- تم استخدام بلاستيسيدين سواس لدراسة عملية تخليق البروتين على مستوى تكوين الرابطة الببتيدية، وخاصة في خلايا HEK293-T وخلايا HEK-D5 من هياكل TLR-2.
2.3 خصائص مضادة للفطريات
- كما أن له نشاط مضاد للفطريات، ويمكن استخدامه للوقاية من وعلاج مرض انفجار الأرز. ويتمثل تأثيره القاتل للبكتيريا في التأثير بشكل أساسي على تخليق البروتين، ويمكنه تثبيط إنبات الجراثيم وتطور الخيوط الفطرية وتكوين الجراثيم.
2.4 تطبيقات أخرى
- وقد تم استخدام البلاستيسيدين أيضًا لدراسة التأثير المثبط لخلايا الورم.
- ويعمل أيضًا كعامل اختيار للخلايا المحولة التي تحتوي على جين المقاومة bls، أو bsr، أو BSD.
3 إجراءات تجريبية متعلقة بـ Blasticidin S (فحص الجينات المستقرة للثدييات)
1) يستخدم بلاستيسيدين إس عادةً بتركيز 10 ميكروجرام/مل. يتم تحويل الخلايا باستخدام البلازميدات التي تحمل جين bsr أو BSD ويتم تحضينها في وسط نمو طبيعي يحتوي على بلاستيسيدين إس لاختيار الخلايا المحولة المستقرة.
2) بعد 48 ساعة من التحويل الجيني، يتم تمرير الخلايا في وسط جديد يحتوي على تركيز مناسب من بلاستيسيدين إس (ملاحظة: تعمل المضادات الحيوية بشكل أفضل عندما تكون الخلايا في مرحلة انقسام نشطة. تنخفض كفاءة المضادات الحيوية إذا كانت كثافة الخلايا عالية جدًا. عند تقسيم الخلايا، يجب ألا يتجاوز التقاء 25٪).
3) كل 3-4 أيام، قم بإزالة الوسط المستنفد وأضف وسطًا جديدًا يحتوي على المضاد الحيوي.
4) بعد 7 أيام، تحقق من تكوين مستعمرات الخلايا. اعتمادًا على نوع الخلية المضيفة وكفاءة التحويل/الاختيار، قد يتطلب تكوين المستعمرة أسبوعًا إضافيًا أو أكثر.
5) انقل 5-10 استنساخات مقاومة إلى أطباق زراعة خلايا مقاس 35 مم واحتفظ بها في وسط انتقائي لمدة 7 أيام. بعد ذلك، قم بإجراء اختبارات السمية الخلوية للاختبار.
4 توصية المنتج
شركة ياسين للتكنولوجيا الحيوية بلاستيسيدين س (60218ES) متوفر في شكلين: مسحوق (1 جم) ومحلول (10 ملجم / مل).
| اسم المنتج | قطة# | مواصفة | مظهر |
| بلاستيسيدين س CAS:3513-03-9 | 60218ES10 | 10 ملجم | المحلول (10 ملغ/مل) في هيبس محلول منظم (درجة الحموضة 7.5) |
| 60218ES50 | 5×10 ملجم | ||
| 60218ES60 | 10×10 ملجم | ||
| 60218ES80 | 1 ج | مسحوق (قم بإعداد محلول مخزون بتركيز 5-10 ملغ/مل مع الماء المعقم أو المحلول العازل عند الاستخدام) |
5 المقالات المنشورة باستخدام كواشفنا
[1] Mo J، Tan K، Dong Y، Lu W، Liu F، Mei Y، Huang H، Zhao K، Lv Z، Ye Y، Tang Y. العلاج المستهدف للمحرك المسبب للسرطان EWSR1::FLI1 في ساركوما يوينغ من خلال تثبيط مركب FACT. Oncogene. 2023 يناير؛ 42(1): 11-25. doi: 10.1038/s41388-022-02533-1. Epub 2022 نوفمبر 10. PMID: 36357572. (لو:8.0)
[2] Tan K، Mo J، Li M، Dong Y، Han Y، Sun X، Ma Y، Zhu K، Wu W، Lu L، Liu J، Zhao K، Zhang L، Tang Y، Lv Z. تمثل حلقة التغذية الراجعة الإيجابية SMAD9-MYCN اعتمادًا فريدًا لورم الخلايا العصبية المضخم بواسطة MYCN. J Exp Clin Cancer Res. 2022 Dec 20؛41(1):352. doi: 10.1186/s13046-022-02563-3. PMID: 36539767؛ PMCID: PMC9764568.(لو:11.3)
6 المنتجات ذات الصلة
| اسم المنتج | قطة# | مواصفة |
| سيبروفلوكساسين هيدروكلوريد | 60201ES05/25/60 | 5/25/100 جرام |
| أمبيسيلين، ملح الصوديوم | 60203ES10/60 | 10/100 جرام |
| هيكلات الدوكسيسيكلين | 60204ES03/08/25 | 1/5/25 جرام |
| كلورامفينيكول، درجة USP | 60205ES08/25/60 | 5/25/100 جرام |
| كبريتات كاناميسين | 60206ES10/60 | 10/100 جرام |
| تيتراسيكلين هيدروكلوريد تيتراسيكلين هيدروكلوريد (USP) | 60212ES25/60 | 25/100 جرام |
| فانكومايسين هيدروكلوريد | 60213ES60/80/90 | 100 ملغ/1 جرام/5 جرام |
| ملح كبريتات الجنتاميسين | 60214ES03/08/25 | 1/5/25 جرام |
| سبكتينوميسين هيدروكلوريد | 60215ES08 | 5 جرام |
| فليوميسين (20 ملغ/مل في المحلول) | 60217ES20/60 | 20/5×20مجم |
| بلاستيسيدين س (بلاستيسيدين) | 60218ES10/60 | 10/10×10مجم |
| نيستاتين | 60219ES08 | 5 جرام |
| كبريتات G418 (جينيتيسين) | 60220ES03/08 | 1/5 جرام |
| بوروميسين (محلول 10 ملغ/مل) | 60209ES10/50/60/76 | 1×1 /5 ×1 / 1 0 ×1 /50 ×1 مل |
| بيوروميسين ديهيدروكلوريد | 60210ES25/60/72/76/80 | 25/100/250/500 ملغ / 1 غرام |
| هيجروميسين ب (50 ملغ/مل) | 60224ES03 | 1 جرام (20 مل)/10×1 جرام (20 مل) |
| هيجروميسين ب | 60225ES03/10 | 1/10 جرام |
| إريثروميسين | 60228ES08/25 | 5/25 جرام |
| تيمنتين | 60230ES07/32 | 3.2/10×3.2 جرام |
| أوريوباسيدين أ (AbA) | 60231ES03/08/10 | 1/5×1/10×1مجم |
| كبريتات بوليميكسين ب | 60242ES03/10 | 1/10وحدة دولية |