مقدمة المنتج

الكولاجيناز هو فئة من النوكليازات التي يمكنها التعرف بشكل خاص على تسلسل Pro-X-Gly-Pro (الذي يحدث بشكل متكرر في الكولاجين ونادراً ما يوجد في البروتينات الأخرى)، وتقسيم الرابطة الببتيدية بين الحمض الأميني المحايد (X) والجلايسين (Gly) في هذا التسلسل، ويمكنها تحلل الكولاجين في النسيج الضام.

تتمتع العديد من البروتيازات بالقدرة على تحلل الببتيدات الكولاجينية أحادية السلسلة والمتحللة، ولكن الكولاجيناز هو البروتياز الوحيد الذي يمكنه تحلل ألياف الكولاجين الطبيعية ذات البنية الفائقة الالتفاف المكونة من ثلاثة خيوط، ويوجد على نطاق واسع في الأنسجة الضامة، وأقواها هو الكولاجيناز "الخام" الذي تفرزه البكتيريا اللاهوائية Clostridium histolyticum.

يتم استخلاص الكولاجيناز من Clostridium histolyticum، وهو مستخلص إنزيمي "خشن"، لا يحتوي فقط على الكولاجيناز الذي يمكنه تحلل الكولاجين الطبيعي والألياف الشبكية، بل يحتوي أيضًا على بعض البروتينات الأخرى مثل السكاريداز والليباز وما إلى ذلك، والتي يمكنها تحلل البروتينات والسكريات والدهون الأخرى بشكل فعال في المصفوفة خارج الخلية للنسيج الضام والأنسجة الظهارية، لذلك فهو أكثر ملاءمة لهضم الأنسجة.

في الوقت الحاضر، يتم تقسيم الكولاجيناز البكتيري الموجود في السوق بشكل أساسي إلى خمسة أنواع وفقًا للاختلاف في نشاط الكولاجيناز: الكولاجيناز من النوع الأول، والنوع الثاني، والنوع الثالث، والنوع الرابع، والنوع الخامس.

اختيار الكولاجيناز

اسم المنتج	مظهر	نشاط الانزيم	نطاق التطبيق
النوع الأول الكولاجيناز	مسحوق بلوري بني أو بني فاتح	≥250 وحدة/ملغ صلب	يحتوي على نشاط (الكولاجيناز، الكازيناز، المطثيات، والتربسين) لعزل الخلايا الظهارية، والرئة، والدهون، والأنسجة الكظرية.
النوع الثاني الكولاجيناز	مسحوق بلوري بني أو بني فاتح	≥125 وحدة/ملجم صلبة	يحتوي على المزيد من نشاط الكلوستريديز وهو مناسب لعزل خلايا أنسجة الكبد والعظام والغدة الدرقية والقلب والغدة اللعابية
النوع الثالث الكولاجيناز	مسحوق بلوري بني أو بني فاتح	≥100 وحدة/ملجم صلبة	يحتوي على نشاط بروتيني منخفض، وهو فعال لجزء الوصلة من أنسجة الجهاز الهضمي، ويستخدم غالبًا لتفكيك خلايا أنسجة الثدييات
النوع الرابع الكولاجيناز	مسحوق بلوري بني أو بني فاتح	≥125 وحدة CDU/ملغ صلبة*	يحتوي على نشاط منخفض للتربسين ويُستخدم عادةً في تحضير الخلايا لسلامة الجزر والمستقبلات
النوع الخامس الكولاجيناز	مسحوق بلوري بني أو بني فاتح	≥125 وحدة CDU/ملغ صلبة*	يحتوي على ما لا يقل عن 7 مكونات بروتياز، والتي يمكن استخدامها لعزل أنسجة جزر البنكرياس وفصل النسيج الضام إلى خلايا مفردة

*CDU = وحدات هضم الكولاجين

مميزات المنتج

1. كفاءة هضم عالية: المستخلص الإنزيمي الخام من Clostridium histolyticum له كفاءة هضم عالية للأنسجة.
2. يعتمد على المنشطات: يحتاج الكولاجيناز إلى الاعتماد على نشاط الإنزيمات المنشطة مثل الكاتيونات ثنائية التكافؤ مثل Ca²⁺والزنك²⁺.
3. المتأثرة بالمثبطات: تشمل مثبطات الكولاجيناز EDTA وEGTA وما إلى ذلك؛ والثانية هي أيونات المعادن الثقيلة (Hg²⁺, الرصاص²⁺, قرص مضغوط²⁺); هناك أيضًا بعض العوامل الكيميائية مثل السيستين، والهيستيدين، وDTT، و2-مركابتويثانول، وo-فينانثرولين، وما إلى ذلك، والتي لها أيضًا تأثيرات مثبطة على الكولاجيناز.
4. مقاومة قوية للتداخل: لن يتأثر الكولاجين بالمصل المستخدم لزراعة الخلايا.

احتياطات الاستخدام

1. الاستخدام: يذوب في محلول هانكس أو إيرلز أو أي محلول ملحي متوازن آخر، التركيز الموصى به للعمل هو 0.05% ~0.5% (وزن/حجم)
2. درجة حرارة التخزين: 2-8 درجة مئوية
3. اقتراحات للاستخدام:

(1) لدراسة بنية الكولاجين وتخليقه الحيوي، غالبًا ما تُستخدم مستحضرات الكولاجيناز ذات النقاء الأعلى، ولا تُستخدم أي أنشطة بروتينية أخرى.

(2) لتفكك الأنسجة، غالبًا ما يتم استخدام مستحضرات الكولاجيناز الخام، مثل الإيلاستاز أو التربسين أو البابايين.

التعليمات

1. سوء الهضم أثناء التجربة

(1) إذا كان السبب هو ضعف نشاط الإنزيم أو عدم كفاية أيونات الكالسيوم، فيجب تخزين الكولاجيناز في درجات حرارة منخفضة وظروف جافة، ويجب تجميد محلول الكولاجيناز بعد تقسيمه إلى أجزاء.

(2) إذا كان السبب هو عدم كفاية أيونات الكالسيوم، فيجب أن يكون تركيز أيونات الكالسيوم في محلول الكولاجيناز 5 مليمول.

2. يحدث موت الخلية أثناء الاستخدام

(1) إذا كان هناك فائض من البروتياز، فيجب تقليل وقت اتصال البروتياز أو إضافة الألبومين أو المصل غير النشط

(2) إذا تغير الرقم الهيدروجيني، فيجب استخدام محلول منظم (على سبيل المثال، HBSS)؛ تحقق من الرقم الهيدروجيني الخاص بك وأعد ضبطه بشكل متكرر

(3) إذا كان هناك القليل من الأكسجين، فيجب تهوية المحلول الهضمي بالهواء المعقم

3. تم إتلاف الخلايا أثناء التجربة

إذا كان السبب هو كثرة البروتياز، فيجب تقليل كمية البروتياز أو إضافة الألبومين أو المصل المعطل

الطلب

رقم الكتالوج	اسم المنتج	مقاس
40507ES60	الكولاجيناز 1	100 ملجم، 1 جرام
40508ES60	الكولاجيناز الثاني	100 ملجم، 1 جرام
40509ES60	الكولاجيناز الثالث	100 ملجم
40510ES60	الكولاجيناز الرابع	100 ملجم، 1 جرام
40511ES60	كولاجيناز V	100 ملجم

توصيات المنتجات ذات الصلة

رقم الكتالوج	اسم المنتج	مقاس
40123ES60	بيرفسيل™ل تريبسين-EDTA (0.25%)، أحمر الفينول	100 مل
40124ES60	PerfCell™ Trypsin-no EDTA (0.25٪، لا يوجد أحمر الفينول	100 مل
40126ES60	بيرفسيل™ تريبسين (0.25%)، أحمر الفينول	100 مل
40127ES60	PerfCell™ Trypsin-EDTA (0.25%)، أحمر الفينول	100 مل
40101ES25	التربسين 1:250 (مسحوق)	25 جرام
40512ES10/60	مسحوق التربسين المؤتلف PerfCell™	10 ملغ/100 ملغ
20416ES60	التربسين المؤتلف (MS-SAFE)	100 ميكروغرام
40134ES60	بيرفسيل تريزيم™ اكسبرس	100 مل
40135ES60	بيرفسيل تريزيم™ اكسبرس	100 مل
40506ES60	إتهام	100 مل
40104ES60/80	ديسباس الثاني	100 ملغ/1 غرام