الخلفية - ما هو ROS

تعتبر أنواع الأكسجين التفاعلية (ROS) منتجًا طبيعيًا لعملية التمثيل الغذائي للخلايا - وهو جزيء حيوي نشط يحتوي على الأكسجين، بما في ذلك البيروكسيد، والأكسيد الفائق، والجذور الهيدروكسيلية، والأكسجين الأحادي، والأكسجين ألفا، وما إلى ذلك، والتي تلعب دورًا تنظيميًا مهمًا في مسارات إشارات الخلايا والنسخ، مثل موت الخلايا المبرمج، والالتهام الذاتي، والشيخوخة، والسرطان، وما إلى ذلك.

تأثير تركيز ROS على الخلايا – لماذا نكتشف ROS؟

عند مستويات منخفضة من أنواع الأكسجين التفاعلية، تشارك أنواع الأكسجين التفاعلية في الإشارات والتنظيم داخل الخلايا باعتبارها "رسل الأكسدة والاختزال". ومع ذلك، في ظل الضغوط البيئية (مثل الإشعاع المؤين، والتعرض للحرارة، والأشعة فوق البنفسجية، ونقص الأكسجين، وما إلى ذلك)، ترتفع مستويات أنواع الأكسجين التفاعلية بشكل كبير، مما قد يتسبب في تلف الحمض النووي، وتثبيط التعبير الجيني، ويؤدي إلى طي البروتين بشكل خاطئ وحتى التأثير على تخليق البروتين، مما يتسبب في أضرار جسيمة للهياكل الخلوية، وهو ما يُعرف بالإجهاد التأكسدي.

بمجرد أن تتجاوز مستويات ROS قدرة دفاعات مضادات الأكسدة الذاتية، يتم تعطيل توازن الأكسدة والاختزال، مما يؤدي إلى تغييرات بنيوية أو تكوينية في الحمض النووي، والدهون، والبروتينات، وفي النهاية موت الخلايا.

إن مستوى ROS هو إشارة مهمة لتلف الخلايا الناجم عن الوظائف الفسيولوجية الطبيعية والعوامل البيئية، ويعد اكتشاف مستوى ROS داخل الخلايا ذا أهمية كبيرة لفهم مسارات الإشارة والآليات المحتملة لعمل بعض الأدوية. لذلك، يلعب اختيار المجسات المناسبة للكشف عن ROS دورًا مهمًا في أبحاث آلية المرض وفحص الأدوية.

كيف يعمل اكتشاف ROS؟

ال مجموعة تحليل أنواع الأكسجين التفاعلية (CAT# 50101ES01) هي الطريقة الأكثر استخدامًا لقياس مستويات أنواع الأكسجين التفاعلية داخل الخلايا بناءً على التغيرات في شدة الفلورسنت للصبغة الفلورية DCFH-DA (2،7-Dichlorodi-hydrofluorescein diacetate).

لا يحتوي DCFH-DA نفسه على فلورسنت ويمكنه المرور بحرية عبر غشاء الخلية، وبعد دخوله الخلية، يمكن تحليله بواسطة استريزات داخل الخلايا لإنتاج DCFH. ومع ذلك، لا يمكن لـ DCFH اختراق غشاء الخلية، مما يسهل وضع العلامات على المسبار وتجميعه داخل الخلية. تتمكن أنواع الأكسجين التفاعلية داخل الخلايا من أكسدة DCFH غير الفلوري لتكوين DCF الفلوري. إن شدة الفلورسنت الأخضر لـ DCF تتناسب بشكل مباشر مع مستوى أنواع الأكسجين التفاعلية داخل الخلايا، ويمكن معرفة مستوى أنواع الأكسجين التفاعلية داخل الخلايا من خلال الكشف عن فلورسنت DCF.

في ظل ظروف طول موجة الإثارة 488 نانومتر وطول موجة الانبعاث 525 نانومتر، تم الكشف عن فلورسنت DCF بواسطة المجهر الفلوري، المجهر البؤري بالليزر، مطياف الفلورسنت، قارئ لوحة الميكروفلورسنت، مقياس التدفق الخلوي، وما إلى ذلك، لتحديد مستوى أنواع الأكسجين التفاعلية داخل الخلايا.

الأدبيات التي نشرها العملاء الذين يستخدمون هذا المنتج (بعض الأمثلة)

اعتبارًا من سبتمبر 2022، تم نشر ما مجموعه 164 مقالاً في مجموعة الكشف عن أنواع الأكسجين التفاعلية ROS (50101ES01)، بإجمالي عامل تأثير قدره 913.72.

تأثير إنتاج أنواع الأكسجين التفاعلية على استقطاب الخلايا البلعمية وقتل الخلايا السرطانية (PMID: 35665496؛ PMID: 35301299؛ معرف PMC: PMC8931093معرف PMC: PMC9353410.

التعليمات

س1: ما هي العينات المناسبة لاختبار ROS؟

ج1: يستخدم بشكل عام للكشف عن الخلايا الثديية، وهو مناسب فقط للكشف عن أنواع الأكسجين التفاعلية في الخلايا الحية أو داخل الجسم الحي.

س2: هل مجموعة اختبار ROS مناسبة للكشف في المصل أو البلازما؟

ج2: غير مناسب للكشف عن أنواع الأكسجين التفاعلية في مصل الدم أو متجانسات الأنسجة. يمكن تجربة المعلقات أحادية الخلية المحضرة من أنسجة طازجة.

س3: هل يمكن الكشف عن النباتات أو البكتيريا؟

ج3: إنه مناسب فقط للكشف عن أنواع الأكسجين التفاعلية في الخلايا الحية أو في الجسم الحي، لأن عمر النصف للجذور الهيدروكسيلية والجذور فوق أكسيد الأكسجين قصير جدًا، وهو مناسب فقط للكشف عن الخلايا الحية. النباتات أو البكتيريا، والتي يمكن استخدامها للكشف بعد تحضير البروتوبلاست، لا يمكن لهذه المجموعة الكشف عن أنواع الأكسجين التفاعلية في الجسم الحي.

س4: كيف يمكنني تجنب الخلفية الفلورية المفرطة؟

ج4: بعد حضانة المجس، تأكد من غسل أي مجسات متبقية لم تدخل الخلية.

س5: هل يمكنني الكشف عن كمية ROS في الخلايا الطبيعية؟

ج5: محتوى أنواع الأكسجين التفاعلية في الخلايا الطبيعية منخفض جدًا، وقد لا يكون تأثير الكشف جيدًا جدًا.

س6: قيم الفلورسنت السلبية والإيجابية هي نفسها، ما الذي يحدث؟

ج6: قد يكون السبب هو أن تركيز المجس المضاف كبير جدًا، يوصى بتقليل تركيز المجس بمقدار 5-7.5 ميكرومتر ووقت الحضانة: 15-20 دقيقة.

س7: فلورسنت التحكم الإيجابي ضعيف، ماذا يحدث؟

ج7: عادة ما يتم تركيز Rosup الموجب للتحكم عند 100 ميكرومولر، وقد لوحظت زيادة كبيرة في أنواع الأكسجين التفاعلية بعد 30 دقيقة إلى 4 ساعات من التحفيز. قد يختلف تأثير التحكم الموجب لأنواع الأكسجين التفاعلية بشكل كبير بين الخلايا المختلفة. إذا لم يتم ملاحظة الزيادة في أنواع الأكسجين التفاعلية في غضون 30 دقيقة بعد التحفيز، فيمكن تمديد وقت التحريض أو زيادة تركيز Rosup بشكل مناسب.

ج8: نفس المسبار، غير مقسم، أول 5 مرات التأثير جيد جدًا، هذه المرة غير مصبوغ، ما الأمر؟

س8: 1. حالة الخلية ليست جيدة، مما يؤدي إلى انخفاض كفاءة التلوين؛ 2. وقت تحريض الدواء الإيجابي قصير جدًا، ويمكن زيادة مستوى أنواع الأكسجين التفاعلية بشكل كبير عن طريق الحضانة عند 37 درجة مئوية في الظلام لمدة 30 دقيقة -4 ساعات؛ 3. تم تجميد المجس وإذابته أكثر من 4 مرات، وتقل كفاءة التلوين، وتكون إشارة الفلورسنت غير مستقرة (قوية في بعض الأحيان، وضعيفة في بعض الأحيان، وسهلة الإخماد). يوصى بتقسيم المجسات وتخزينها في ثلاجة بدرجة حرارة -20 درجة مئوية محمية من الضوء لتجنب دورات التجميد والذوبان المتكررة.

س9: ما هي الأدوات التي يمكن استخدامها للاختبار؟

أ9: المجهر الفلوري، المجهر البؤري بالليزر، مطياف الفلوريسنت، قارئ لوحة الميكروفلورسنت، مقياس التدفق الخلوي، وما إلى ذلك، يمكنها اكتشاف قيم الفلورسنت.

المنشورات البحثية العلمية التي نشرها العملاء الذين يستخدمون هذا المنتج (جزئيًا)

[1] Zhong D, Jin K, Wang R, Chen B, Zhang J, Ren C, Chen X, Lu J, Zhou M. جل مائي قائم على الطحالب الدقيقة لعلاج مرض التهاب الأمعاء والقلق والاكتئاب المرتبط به. Adv Mater. 26 يناير 2024: e2312275. doi: 10.1002/adma.202312275. نشر إلكتروني قبل الطباعة. PMID: 38277492.   إذا: 29.4

[2] Zhang M, et al. Conscription of Immune Cells by Light-Activatable Silencing NK-Derived Exosome (LASNEO) for Synergetic Tumor Eradication. Adv Sci (Weinh). 2022 أغسطس؛ 9(22): e2201135. doi: 10.1002/advs.202201135. Epub 2022 يونيو 4. إذا: 16.806

[3] Zhang D، وآخرون. حاملات دقيقة فموية تعتمد على الطحالب الدقيقة للحفاظ على توازن ميكروبات الأمعاء وحماية الأمعاء في حالات السرطان العلاج الإشعاعي. Nat Commun. 2022 Mar 17؛13(1):1413. doi: 10.1038/s41467-022-28744-4. PMID: 35301299. إذا: 14.919

[4] جياو د، وآخرون.الخلايا الجذعية من نخاع العظام المحفزة بأكسيد الجرافين المختزل المتوافقة حيويًا تحفز تسريع إعادة تشكيل العظام وحركة الأسنان التقويمية من خلال تعزيز تكوين الخلايا الناقضة للعظم وتكوين الأوعية الدموية. Bioact Mater. 6 فبراير 2022؛ 15: 409-425. doi: 10.1016/j.bioactmat.2022.01.021. PMID: 35386350؛ PMCID: PMC8958387.   إذا: 14.593
[5] Guo G, et al. Space-Selective Chemodynamic Therapy of CuFe5O8 Nanocubes for Implant-Related Infections. ACS Nano. 27 أكتوبر 2020؛14(10):13391-13405. doi: 10.1021/acsnano.0c05255. Epub 22 سبتمبر 2020. PMID: 32931252.  إذا: 14.588

[6] يانغ سي وآخرون. العلاج الضوئي الديناميكي والحراري الضوئي باستخدام قضيب نانوي مزين بالفوسفور الأحمر لعلاج سرطان الخلايا الكلوية. سمول. 2021 يوليو؛ 17(30): e2101837. doi: 10.1002/smll.202101837. Epub 2021 يونيو 19. PMID: 34145768.  إذا: 13.281

[7] شياولو تشين وآخرون. شبكات معدنية فينولية مغلفة بجسيمات نانوية لتوصيل التضخيم المتتالي للتغلب على مقاومة أدوية السرطان من خلال العلاج المشترك بالتجويع/الديناميكي الكيميائي/العلاج الكيميائي. مجلة الهندسة الكيميائية. أغسطس 2022؛ 442:136-221.   إذا: 13.273

[8] هاو دينج وآخرون. الخلايا الجذعية المتوسطة المغلفة في هلام مائي قابل للحقن يزيل أنواع الأكسجين التفاعلية ويولد الأكسجين لعلاج احتشاء عضلة القلب. مجلة الهندسة الكيميائية. 2022.133511:1385-8947.  إذا: 13.273

[9] يو إتش وآخرون. محفز نانوي ثلاثي الشلال مزود بإمدادات الأكسجين القابلة للتنشيط بالليزر وتعزيز ضوئي حراري لعلاج تحفيزي فعال ضد الورم الناقص الأكسجين. المواد الحيوية. 2022 يناير؛ 280:121308. PMID: 34896860.  إذا: 12.479

[10] Sun D, ​​et al. A cyclodextrin-based nanoformulation achieves a co-delivery of ginsenoside Rg3 and quercetin for chem-immunotherapy in colonectal cancer. Acta Pharm Sin B. 2022 Jan;12(1):378-393. PMID: 35127393.   إذا: 11.614

[11] Xiong Y، وآخرون. جسيمات نانوية من البوليمر الحيوي القابل للتنشيط والمخصص للأورام، مثبتة بواسطة دواء هيدروكسي إيثيل النشا لعلاج السرطان التعاوني المضخم ذاتيًا. Theranostics. 1 يناير 2022؛ 12(2): 944-962. PMID: 34976222. إذا: 11.556

[12] جاو جيه وآخرون. "قارب نانوي" جزيئي مستهدف للميتوكوندريا يثبط في نفس الوقت عملية التمثيل الغذائي للطاقة المزدوجة للعلاج الكيميائي الإشعاعي الانتقائي والتآزري للأورام. ثيرانوستيكس. 1 يناير 2022؛ 12(3): 1286-1302. PMID: 35154487.   إذا: 11.556

[13] Zhong D, et al. Calcium phosphate engineered photosynthetic microalgae to combat hypoxic-tumor by in-situ modulating hypoxic and cascade radio-phototherapy. Theranostics. 22 يناير 2021؛11(8):3580-3594. PMID: 33664849. إذا: 11.556

[14] Sun J, et al. Cytotoxicity of stable/solidified Municipal solid waste incineration fly ash. J Hazard Mater. 2022 Feb 15;424(Pt A):127369. doi: 10.1016/j.jhazmat.2021.127369. Epub 2021 Sep 29. PMID: 34879564.  إذا: 10.588

[15] Zhu C، وآخرون. هلام حراري متعدد الوظائف حساس للحرارة لتعديل البيئة المحيطة في هشاشة العظام عن طريق استقطاب الخلايا البلعمية وإزالة RONS. مجلة التكنولوجيا الحيوية النانوية. 7 مايو 2022؛ 20(1): 221. إذا: 10.435

[16] بان إكس وآخرون. كرة نانوية من أكسيد الزنك لإزالة كبريتيد الهيدروجين والموت الحديدي لسرطان القولون والمستقيم. مجلة التكنولوجيا الحيوية النانوية. 27 نوفمبر 2021؛ 19(1): 392. doi: 10.1186/s12951-021-01069-y. PMID: 34838036؛ PMCID: PMC8626909.   إذا: 10.435

[17] He J, et al. Nanoshells Gold-Silver تعزز التئام الجروح الناتجة عن عدوى البكتيريا المقاومة للأدوية وتمكن من المراقبة عبر التصوير بالتشتت رامان المعزز بالسطح. المواد الحيوية. 2020 مارس؛ 234:119763. PMID: 31978871.   إذا: 10.317

[18] تشنغ كيو وآخرون. تتداخل العلاجات النانوية مع التوازن الخلوي للأكسدة والاختزال من أجل علاج ضوئي ديناميكي محسن للغاية. المواد الحيوية. ديسمبر 2019؛ 224: 119500. doi: 10.1016/j.biomaterials.2019.119500. Epub 2019 Sep 17. PMID: 31557591.  إذا: 10.273

[19] تشونج د، وآخرون. α المكعب المجمع المحفز بالليزر-Fe2O3@Au nanoالمواد المركبة المستخدمة في التصوير بالرنين المغناطيسي والعلاج التآزري بالإشعاع الضوئي الحراري/المعزز. المواد الحيوية. أكتوبر 2019؛ 219:119369. PMID: 31351244.   إذا: 10.273

[20] Sun C, et al. Selenoxide removal manipulate the oxidative stress to improve the antitumor effective. Biomaterials. 2019 Dec; 225:119514. doi: 10.1016/j.biomaterials.2019.119514. Epub 2019 Sep 24. PMID: 31569018.    إذا: 10.273

المنتجات الموصى بها

اسم المنتج

رقم الكتالوج

مقاس

مجموعة تحليل أنواع الأكسجين التفاعلية

50101ES01

1 مجموعة (1000 اختبار)

سؤال