الكشف عن الميكوبلازما والوقاية منها وإزالتها - كل ذلك في خطوة واحدة!
الميكوبلازما
الميكوبلازما، المعروفة أيضًا باسم الميكوبلازما، هي أصغر وأبسط بدائيات النوى المكتشفة حتى الآن، بقطر يتراوح بين 0.1 و0.3 ميكرومتر. يمكنها المرور عبر المرشحات، وتتميز بتعدد أشكالها، حيث تظهر بأشكال متنوعة، مثل الكروية، والقضيبية، والخيطية، والمتفرعة. في المختبرات وفي إنتاج المستحضرات الصيدلانية الحيوية، تكون مزارع الخلايا عرضة للتلوث بالميكوبلازما. ووفقًا للأبحاث، تتراوح نسبة تلوث الخلايا بالميكوبلازما في سلالات الخلايا المخزنة بين 15% و35% تقريبًا، وتتراوح في صناعة المستحضرات الصيدلانية الحيوية بين 0.44% و6.70%. [1].
الشكل 1: مورفولوجيا الميكوبلازما
تأثير تلوث الميكوبلازما
من السهل نسبيًا اكتشاف التلوث البكتيري والفطري ومنعه وإزالته، إلا أن تلوث الميكوبلازما يصعب ملاحظته. حتى عند كثافات نمو تصل إلى 10^7-10^9 وحدة تشكيل مستعمرة/مل، قد لا تظهر أي علامات واضحة للتلوث (مثل العكارة أو تغيرات الرقم الهيدروجيني). يمكن أن يؤدي تلوث الميكوبلازما إلى تغيرات مختلفة في الخلايا (انظر الشكل 2).
الشكل 2: التغيرات في حالات الخلايا بعد تلوثها بالميكوبلازما
سيناريوهات التطبيق للكشف عن الميكوبلازما
المصادر النموذجية لتلوث الميكوبلازما
- التلوث المتبادل بين الخلايا؛
- تلوث بيئة العمل أو المعدات التجريبية؛
- تقنية تعقيم رديئة من قبل المجرب؛
- تلوث وسائط الثقافة أو الكواشف الأخرى؛
- تلوث الأنسجة أو العضو الأصلي المستخدم في تحضير الخلايا.
ماذا تفعل عندما تتعرض مزارع الخلايا للتلوث بالميكوبلازما
الشكل 3: المحلول الكلي لتلوث الميكوبلازما
حل ثلاثي في واحد لتلوث الخلايا بالميكوبلازما
1. الكشف عن الميكوبلازما
الكشف عن الميكوبلازما المتساوية الحرارة بخطوة واحدة:
الشكل 4: عملية تشغيل الكشف عن الميكوبلازما بخطوة واحدة
الكشف عن الميكوبلازما باستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل:
الشكل 5: صورة الرحلان الكهربائي للهلام لتضخيم تفاعل البوليميراز المتسلسل للعينات ذات تركيزات مختلفة من الميكوبلازما
الشكل 6: صورة الرحلان الكهربائي للهلام لتضخيم تفاعل البوليميراز المتسلسل للعينات ذات تركيزات مختلفة من الميكوبلازما
الجدول 1: أنواع الميكوبلازما التي يمكن اكتشافها بواسطة
ملاحظة: يشير القسم الأزرق إلى أنواع الميكوبلازما التي يمكن اكتشافها من خلال الكشف الحراري أحادي الخطوة وطرق تفاعل البوليميراز المتسلسل.
2. كاشف إزالة الميكوبلازما MycAway (1000 ×)
كاشف إزالة الميكوبلازما من مايكاواي (1000 ×) تركيبة مختلطة تقضي بفعالية على الميكوبلازما عن طريق تثبيط تخليق الحمض النووي والبروتينات الأساسية اللازمة لنمو الميكوبلازما، دون الإضرار بالخلايا. يُنقذ خلاياك إلى أقصى حد ويُقلل من الخسائر الناتجة عن تلوث الميكوبلازما.
الشكل 7: توضيح لتأثير إزالة الخلايا
مميزات كاشف القضاء على الميكوبلازما:
- سمية منخفضة: سمية خلوية ضئيلة، ولا تؤثر على التجارب الخلوية اللاحقة مثل اختبار قابلية الخلايا للبقاء والانتقال؛
- استقرار عالي:يمكن تخزينه عند درجة حرارة -20 درجة مئوية لفترات طويلة مع الحفاظ على الفعالية؛
- سهل الاستخدام:ببساطة قم بإضافة المنتج إلى وسط الثقافة الملوث بالميكوبلازما وقم باحتضانه؛
- سريع المفعول:نتائج مرئية في أقل من 3 أيام؛
- طيف واسع: فعال ضد معظم أنواع الميكوبلازما المعملية.
الشكل 8: مخطط اختبار السمية الخلوية لكاشف إزالة الميكوبلازما
3. الوقاية من الميكوبلازما
منتج معلومة
| فئة | اسم المنتج | القط رقم | تحديد |
|
كشف | 40612ES25/60 | 25/100 ت | |
| مجموعة الكشف عن الميكوبلازما MycAway™ بتقنية qPCR في الوقت الفعلي | 40618ES25/60 | 25/100 ت | |
| 40601ES10/20 | اختبارات 10/20 | ||
|
إزالة | بخاخ MycAway™ (جاهز للاستخدام) | 40605ES02/03 | 1/2×500 مل |
| 40607ES03/08 | 1/5×1 مل | ||
|
وقاية | MycAway™ Prophylactic (2000×) - كاشف الوقاية من الميكوبلازما | 40608ES03/08 | 1/5×1 مل |
| 40609ES60 | 100 مل | ||
| 40610ES60 | 100 مل |