Produktintroduktion

Kollagenase er en klasse af endonukleaser, der specifikt kan genkende Pro-X-Gly-Pro-sekvensen (som forekommer hyppigt i kollagen og sjældent findes i andre proteiner), og spalte peptidbindingen mellem den neutrale aminosyre (X) og glycin (Gly) i denne sekvens, og kan hydrolysere kollagen i bindevæv.

Mange proteaser er i stand til at hydrolysere enkeltstrengede og denaturerede kollagenpeptider, men kollagenase er den eneste protease, der kan nedbryde naturlige kollagenfibre med en trestrenget supersnoet struktur og findes i vid udstrækning i bindevæv, hvoraf den mest potente er den "rå" kollagenase, der udskilles af den anaerobe histolytiske bakterie Clostridium .

Yeasen collagenase er afledt af Clostridium histolyticum, som er et enzym "grovt" ekstrakt, som ikke kun indeholder kollagenase, der kan nedbryde naturligt kollagen og retikulære fibre, men også indeholder nogle andre proteaser såsom polysaccharidaser, lipaser osv., som effektivt kan hydrolysere andre proteiner og polysaccharider i vævet, polysaccharid og ekstracellulære matrix. epitelvæv, så det er mere velegnet til vævsfordøjelse.

På nuværende tidspunkt er den bakterielle kollagenase på markedet hovedsageligt opdelt i fem typer i henhold til forskellen i aktiviteten af ​​kollagenase: kollagenase type I, type II, type III, type IV og type V.

Valg af kollagenase

Produktnavn

Udseende

Enzym aktivitet

Anvendelsesområde

Type I kollagenase)

Brunt eller gyldenbrunt krystallinsk pulver

≥250 U/mg fast stof

Indeholder (collagenase, caseinase, clostridia og trypsin) aktivitet til isolering af epitel-, lunge-, fedt- og binyrevævsceller.

Type II kollagenase)

Brunt eller gyldenbrunt krystallinsk pulver

≥125 U/mg fast stof

Indeholder mere clostridaseaktivitet og er velegnet til isolering af lever-, knogle-, skjoldbruskkirtel-, hjerte- og spytkirtelvævsceller

Type III kollagenase)

Brunt eller gyldenbrunt krystallinsk pulver

≥100 U/mg fast stof

Den indeholder lav proteolytisk aktivitet, som er effektiv til forbindelsesdelen af ​​fordøjelsesvæv, og bruges ofte til dissociering af pattedyrvævsceller

Type IV kollagenase)

Brunt eller gyldenbrunt krystallinsk pulver

≥125 CDU/mg fast*

Indeholder lav trypsinaktivitet og bruges almindeligvis til celleforberedelse til ø- og receptorintegritet

Type V kollagenase)

Brunt eller gyldenbrunt krystallinsk pulver

≥125 CDU/mg faststof*

Indeholder mindst 7 proteasekomponenter, som kan bruges til isolering af pancreas-øvæv og adskillelse af bindevæv i enkeltceller

*CDU = kollagenfordøjelsesenheder

Produktegenskaber

  1. Høj fordøjelseseffektivitet: Det rå enzymekstrakt af Clostridium histolyticum har høj fordøjelseseffektivitet for væv.
  2. Afhængig af aktivatorer: kollagenase skal stole på aktiviteten af ​​aktiverende enzymer såsom divalente kationer såsom Ca2+og Zn2+.
  3. Påvirket af inhibitorer: inhibitorer af collagenase inkluderer EDTA, EGTA, etc.; den anden er tungmetalioner (Hg2+, Pb2+, Cd2+); Der er også nogle kemiske midler som Cystein, histidin, DTT, 2-mercaptoethanol, o-phenanthrolin osv., som også har hæmmende virkninger på kollagenase.
  4. Stærk interferensresistens: kollagen vil ikke blive påvirket af det serum, der bruges til at dyrke celler.

Forholdsregler ved brug

  1. Anvendelse: Opløses i Hank's, Earle's eller andre afbalancerede saltopløsninger, den anbefalede arbejdskoncentration er 0,05% ~0,5% (w/v)
  2. Opbevaringstemperatur: 2-8°C
  3. Forslag til brug:

(1) Til studiet af kollagenstruktur og biosyntese anvendes ofte collagenasepræparater med højere renhed, og ingen andre proteolytiske aktiviteter anvendes.

(2) Til vævsdissociation anvendes ofte rå kollagenasepræparater, såsom elastase, trypsin eller papain.

FAQ

  1. Dårlig fordøjelse under forsøget

(1) Hvis det er forårsaget af svag enzymaktivitet eller utilstrækkelige calciumioner, skal kollagenase opbevares under lave temperaturer og tørre forhold, og kollagenaseopløsning skal fryses efter alikvotering

(2) Hvis det er forårsaget af utilstrækkelige calciumioner, bør koncentrationen af ​​calciumioner i kollagenaseopløsningen være 5 mM

  1. Celledød opstår under brug

(1) Hvis der er et overskud af protease, skal proteasekontakttiden reduceres, eller albumin eller inaktiveret serum skal tilsættes

(2) Hvis pH ændres, skal der anvendes en buffer (f.eks. HBSS); Tjek og juster din pH ofte

(3) Hvis der er for lidt ilt, skal fordøjelsesopløsningen ventileres med steril luft

  1. Celler blev beskadiget under forsøget

Hvis det er forårsaget af for meget protease, skal mængden af ​​protease reduceres, eller albumin eller inaktiveret serum skal tilsættes

Bestilling

Katalognummer

Produktnavn

Størrelse

40507ES60

Kollagenase I

100 mg, 1 g

40508ES60

Collagenase II

100 mg, 1 g

40509ES60

Kollagenase III

100 mg

40510ES60

Kollagenase IV

100 mg, 1 g

40511ES60

Kollagenase V

100 mg

Relaterede produktanbefalinger

Katalognummer

Produktnavn

Størrelse

40123ES60

PerfCel™l Trypsin-EDTA (0,25%), phenolrød

100 ml

40124ES60

PerfCell™ Trypsin-ingen EDTA (0.25%), ingen phenolrød

100 ml

40126ES60

PerfCell™ Trypsin (0,25%), phenolrød

100 ml

40127ES60

PerfCell™ Trypsin-EDTA (0,25%), phenolrød

100 ml

40101ES25

Trypsin 1:250 (pulver)

25 g

40512ES10/60

PerfCell™ rekombinant trypsin(pulver)

10 mg/100 mg

20416ES60

Rekombinant trypsin(MS-SAFE)

100 µg

40134ES60

PerfCell Tryzyme™Express

100 ml

40135ES60

PerfCell Tryzyme™Express

100 ml

40506ES60

ACCUTASE

100 ml

40104ES60/80

Dispase II

100 mg/1 g

Forespørgsel