Produktintroduktion

Kollagenase er en klasse af endonukleaser, der specifikt kan genkende Pro-X-Gly-Pro-sekvensen (som forekommer hyppigt i kollagen og sjældent findes i andre proteiner), og spalte peptidbindingen mellem den neutrale aminosyre (X) og glycin (Gly) i denne sekvens, og kan hydrolysere kollagen i bindevæv.

Mange proteaser er i stand til at hydrolysere enkeltstrengede og denaturerede kollagenpeptider, men kollagenase er den eneste protease, der kan nedbryde naturlige kollagenfibre med en trestrenget supersnoet struktur og findes i vid udstrækning i bindevæv, hvoraf den mest potente er den "rå" kollagenase, der udskilles af den anaerobe histolytiske bakterie Clostridium .

Yeasen collagenase er afledt af Clostridium histolyticum, som er et enzym "grovt" ekstrakt, som ikke kun indeholder kollagenase, der kan nedbryde naturligt kollagen og retikulære fibre, men også indeholder nogle andre proteaser såsom polysaccharidaser, lipaser osv., som effektivt kan hydrolysere andre proteiner og polysaccharider i vævet, polysaccharid og ekstracellulære matrix. epitelvæv, så det er mere velegnet til vævsfordøjelse.

På nuværende tidspunkt er den bakterielle kollagenase på markedet hovedsageligt opdelt i fem typer i henhold til forskellen i aktiviteten af ​​kollagenase: kollagenase type I, type II, type III, type IV og type V.

Valg af kollagenase

Produktnavn	Udseende	Enzym aktivitet	Anvendelsesområde
Type I kollagenase)	Brunt eller gyldenbrunt krystallinsk pulver	≥250 U/mg fast stof	Indeholder (collagenase, caseinase, clostridia og trypsin) aktivitet til isolering af epitel-, lunge-, fedt- og binyrevævsceller.
Type II kollagenase)	Brunt eller gyldenbrunt krystallinsk pulver	≥125 U/mg fast stof	Indeholder mere clostridaseaktivitet og er velegnet til isolering af lever-, knogle-, skjoldbruskkirtel-, hjerte- og spytkirtelvævsceller
Type III kollagenase)	Brunt eller gyldenbrunt krystallinsk pulver	≥100 U/mg fast stof	Den indeholder lav proteolytisk aktivitet, som er effektiv til forbindelsesdelen af ​​fordøjelsesvæv, og bruges ofte til dissociering af pattedyrvævsceller
Type IV kollagenase)	Brunt eller gyldenbrunt krystallinsk pulver	≥125 CDU/mg fast*	Indeholder lav trypsinaktivitet og bruges almindeligvis til celleforberedelse til ø- og receptorintegritet
Type V kollagenase)	Brunt eller gyldenbrunt krystallinsk pulver	≥125 CDU/mg faststof*	Indeholder mindst 7 proteasekomponenter, som kan bruges til isolering af pancreas-øvæv og adskillelse af bindevæv i enkeltceller

*CDU = kollagenfordøjelsesenheder

Produktegenskaber

1. Høj fordøjelseseffektivitet: Det rå enzymekstrakt af Clostridium histolyticum har høj fordøjelseseffektivitet for væv.
2. Afhængig af aktivatorer: kollagenase skal stole på aktiviteten af ​​aktiverende enzymer såsom divalente kationer såsom Ca²⁺og Zn²⁺.
3. Påvirket af inhibitorer: inhibitorer af collagenase inkluderer EDTA, EGTA, etc.; den anden er tungmetalioner (Hg²⁺, Pb²⁺, Cd²⁺); Der er også nogle kemiske midler som Cystein, histidin, DTT, 2-mercaptoethanol, o-phenanthrolin osv., som også har hæmmende virkninger på kollagenase.
4. Stærk interferensresistens: kollagen vil ikke blive påvirket af det serum, der bruges til at dyrke celler.

Forholdsregler ved brug

1. Anvendelse: Opløses i Hank's, Earle's eller andre afbalancerede saltopløsninger, den anbefalede arbejdskoncentration er 0,05% ~0,5% (w/v)
2. Opbevaringstemperatur: 2-8°C
3. Forslag til brug:

(1) Til studiet af kollagenstruktur og biosyntese anvendes ofte collagenasepræparater med højere renhed, og ingen andre proteolytiske aktiviteter anvendes.

(2) Til vævsdissociation anvendes ofte rå kollagenasepræparater, såsom elastase, trypsin eller papain.

FAQ

1. Dårlig fordøjelse under forsøget

(1) Hvis det er forårsaget af svag enzymaktivitet eller utilstrækkelige calciumioner, skal kollagenase opbevares under lave temperaturer og tørre forhold, og kollagenaseopløsning skal fryses efter alikvotering

(2) Hvis det er forårsaget af utilstrækkelige calciumioner, bør koncentrationen af ​​calciumioner i kollagenaseopløsningen være 5 mM

2. Celledød opstår under brug

(1) Hvis der er et overskud af protease, skal proteasekontakttiden reduceres, eller albumin eller inaktiveret serum skal tilsættes

(2) Hvis pH ændres, skal der anvendes en buffer (f.eks. HBSS); Tjek og juster din pH ofte

(3) Hvis der er for lidt ilt, skal fordøjelsesopløsningen ventileres med steril luft

3. Celler blev beskadiget under forsøget

Hvis det er forårsaget af for meget protease, skal mængden af ​​protease reduceres, eller albumin eller inaktiveret serum skal tilsættes

Bestilling

Katalognummer	Produktnavn	Størrelse
40507ES60	Kollagenase I	100 mg, 1 g
40508ES60	Collagenase II	100 mg, 1 g
40509ES60	Kollagenase III	100 mg
40510ES60	Kollagenase IV	100 mg, 1 g
40511ES60	Kollagenase V	100 mg

Relaterede produktanbefalinger

Katalognummer	Produktnavn	Størrelse
40123ES60	PerfCel™l Trypsin-EDTA (0,25%), phenolrød	100 ml
40124ES60	PerfCell™ Trypsin-ingen EDTA (0.25%), ingen phenolrød	100 ml
40126ES60	PerfCell™ Trypsin (0,25%), phenolrød	100 ml
40127ES60	PerfCell™ Trypsin-EDTA (0,25%), phenolrød	100 ml
40101ES25	Trypsin 1:250 (pulver)	25 g
40512ES10/60	PerfCell™ rekombinant trypsin（pulver）	10 mg/100 mg
20416ES60	Rekombinant trypsin（MS-SAFE）	100 µg
40134ES60	PerfCell Tryzyme™Express	100 ml
40135ES60	PerfCell Tryzyme™Express	100 ml
40506ES60	ACCUTASE	100 ml
40104ES60/80	Dispase II	100 mg/1 g