Det cirkulære RNA -forskningsværktøj -RNase R

Det cirkulære RNA-forskningsværktøj -RNAse R

—— Fremskyndelse af cirkulær RNA-lægemiddeludvikling

I de senere år er mRNA-vaccinen/lægemidlet gradvist kommet ind i offentlighedens vision. mRNA-vaccinen/lægemidlerne har fordelene ved hurtigt design, lav pris og nem produktion, men fordi mRNA'et i sig selv er let at nedbryde, forbedres det i øjeblikket hovedsageligt stabiliteten af ​​mRNA-præparatet ved at tilføje hat og hale og assisteret mRNA-translation. I de senere år har forskere fundet en ny type RNA - Circular RNA (Circular RNA, circRNA). Sådanne RNA'er er en kovalent-lukket ringstruktur, som ikke er let at blive nedbrudt. Sammenlignet med mRNA er circRNA mere stabil og kan opnå ikke-hatafhængig translation. Derfor giver opdagelsen af ​​CIRCRNA muligheder for udvikling af en ny generation af RNA-vacciner og lægemidler med enklere, bedre stabilitet.

Figur 1: Processen med RNA-vaccine 1

Produktionsprocessen af ​​CIRCRNA omfatter: skabelonforberedelse, in vitro-transkription, DNA-skabelonfjernelse, cirkulær og oprensning. Efter at RNA er cirkuleret, er det nødvendigt at bruge ribonuclease R (Ribonuclease R, RNASE R) til at fordøje det ubemandede RNA for at opnå formålet med at berige CirCRNA. Yeasen har molekylær enzymatisk teknik og rationel evolution platform. Det sikrer samtidig produktets kvalitet. Yeasen R & D-team udviklede med succes et RNASE R-enzymer med høj renhed og høj aktivitet.

RNASE R (CAT#14606ES) er en Mg2+afhængighed 3 '→ 5' ribonukleinsyre exonuklease, der er afledt af E. coli. Det kan fordøje alle lineære RNA'er og fordøjer ikke CirCRNA, lariat-RNA. Det bruges ofte til at fjerne lineære RNA-molekyler og realisere formålet med at berige ikke-lineært RNA såsom CirCRNA og lariat-RNA.

Funktioner

Proteinrenhed (SDS-PAGE) ≥95 %

Figur 2: Påvisning af proteinrenhed: Forskellige volumener (1 μL, 2 μL, 3 μL) af produktet (Cat#14606ES) viser høj renhed ≥95%.

Ingen rest exonuklease

Figur 3: 20 U RNASE R blev tilsat til 0,5 μg λDNA-Hind III Digest, inkuberet ved 37 ℃ i 4 timer. Resultatet viser, at ingen rest exonuklease blev påvist fra RNASE R (CAT#14606ES) produkterne.

Evne til fordøjelse lineær RNA og CircRNA

Figur 4: RNASE R (CAT#14606ES) kan fordøje lineære RNA-molekyler
Figur 5: CircRNA kan tolerere behandlingen af ​​RNASE R (CAT#14606ES).

Produkt

Kat

Størrelse

RNAse R (20U/μL)

14606ES

250U/2500U/10000U
RNase R (GMP-grad, 20 U/μL) 14615ES 250U/2500U/10000U

T7 RNA Polymerase GMP-kvalitet (250U/μL)

10625ES

10KU/100KU/2500KU
CleaScrip™ T7 RNA-polymerase (lavt dsRNA, 250 U/μL) 10628ES 10KU/100KU/2500KU

Reference

  1. Qu L, Yi Z, Shen Y, et al. Cirkulære RNA-vacciner mod SARS-CoV-2 og nye varianter. Celle.2022;185(10):1728-1744.e16. doi:10.1016/j.cell.2022.03.044
  2. Chen L, Wang C, Sun H, et al. Den bioinformatiske værktøjskasse til opdagelse og analyse af circRNA. Kort Bioinform. 2021;22(2):1706-1728. doi:10.1093/bib/bbaa001

Forespørgsel