Samlet løsning til Monkeypox Virus Detection af YEASEN

Det første bekræftede tilfælde af abekopper blev rapporteret i Storbritannien i begyndelsen af ​​maj, og det brød hurtigt ud i ikke-endemiske lande og regioner. Pr. 21. september 2022 er 106 lande/regioner blevet bekræftet på verdensplan, med i alt 63.117 tilfælde. Den 16. september bekræftede Chongqing et importeret tilfælde af abekopper, det første tilfælde på det kinesiske fastland, som vakte social bekymring.

Figure 1. 2022 Monkeypox Outbreak Global Map(From the CDC)

Figur 1. Globalt kort over Abekopperudbrud 2022 (fra CDC)

1. Hvad er Abekopper?
2. Abekoppernes historie
3. Hvordan det spredes
4. Tegn og symptomer
5. Detektionsmetode
6. Produktmatch
7. Produktbestilling

1. Hvad er Abekopper?

Abekoppevirus er et dobbeltstrenget DNA-virus med en samlet længde på ca. 197 kb. Det tilhører slægten Orthopoxvirus af Poxviridae-familien. Virus). Der er to grene af abekoppevirussen (vestafrikansk gren og Congo-bassinet gren). Blandt dem er dødsfaldet i den vestafrikanske gren omkring 3,6 %, og dødsfaldet i Congo Basin-grenen kan nå op på 10,6 %. Prøver af abekopper fundet i ikke-endemiske områder siden maj 2022, sekventeringsanalyse viste den vestafrikanske klade[1].

Figure 2. Monkeypox picture (picture from CCDC)

Figur 2. Abekopper billede (billede fra CCDC)

2. Abekoppernes historie

Abekopper blev opdaget i 1958, da to udbrud af en koppelignende sygdom opstod i kolonier af aber, der blev holdt til forskning. På trods af at blive kaldt "abekopper", er kilden til sygdommen stadig ukendt. Imidlertid kan afrikanske gnavere og ikke-menneskelige primater (som aber) huse virussen og inficere mennesker[2].
Det første menneskelige tilfælde af abekopper blev registreret i 1970. Før 2022-udbruddet var abekopper blevet rapporteret hos mennesker i flere central- og vestafrikanske lande. Tidligere var næsten alle abekopper-tilfælde hos mennesker uden for Afrika forbundet med internationale rejser til lande, hvor sygdommen almindeligvis forekommer, eller gennem importerede dyr. Disse tilfælde fandt sted på flere kontinenter[2].

3. Hvordan det spredes

Det kan spredes fra dyr til mennesker, fra mennesker til mennesker og fra miljøet til mennesker.
Det er nu klart, at abekopper kan inficere mennesker på 3 måder: Den ene er fra inficerede dyr til mennesker. Virussen kan trænge ind i kroppen gennem ødelagt hud, luftveje eller slimhinder (øjne, næse eller mund). Det andet overføres gennem tæt kontakt mellem mennesker, herunder samleje, kys, kram eller berøring af kropsdele af abekopper, og kontakt med virusforurenet tøj, sengetøj, håndklæder eller service og andre ting, der også kan være inficeret. Den tredje er overførsel af luftvejsdråber[3].

4. Tegn og symptomer

De vigtigste kliniske manifestationer er feber, udslæt og lymfadenopati.
De mest almindelige symptomer i det tidlige stadie omfatter feber, hovedpine, muskelsmerter og hævede lymfeknuder. Udslættet viser sig 1 til 3 dage efter sygdommens opståen. Det typiske udslæt vises først i ansigtet og spreder sig gradvist til lemmerne og andre dele. Udslættet er for det meste centrifugalt., udslæt i ansigt og lemmer er mere almindelige end på stammen, udslæt kan forekomme på håndflader og fodsåler, og antallet af udslæt varierer fra flere til tusinder; det kan også involvere mundslimhinden, fordøjelseskanalen, kønsorganerne, bindehinden og hornhinden.
Symptomerne varer generelt 14 til 21 dage, og patienterne løser dem normalt af sig selv. Erytem eller hyperpigmentering eller endda ar kan forblive, efter at skorperne falder af. Det er værd at bemærke, at sårskorpen forbliver smitsom, indtil sårskorpen falder af, og der dannes et nyt lag hud nedenunder[3].

5. Detektionsmetode

For effektivt at forhindre og kontrollere abekoppeepidemien og forhindre, at virussen importeres og spredes, har globale IVD-virksomheder reageret aktivt. Som leverandør af IVD-detektionsreagensproduktionsråmaterialer og reagensløsninger, YEASEN leverer en komplet løsning til at hjælpe effektivt med at detektere abekoppevirus. Fra nukleinsyreekstraktion til reagenskomponenter (enzymreagenser og pseudovirus) og halvfærdige kits (primerprober, enzymreagenser og plasmidkontroller) kan YEASEN levere dig stabilt.

Figure 3. Virus detection method

Figur 3. Virusdetektionsmetode

5.1 Metodefordel

  • Effektiv og bekvem betjening - et sæt sæt, inklusive alle komponenter, uden besværlige betjeninger, tilføjelse i ét trin
  • Høj detektionsfølsomhed—Genmodificeret antistofmetode hot-start Taq enzym, 1 kopi/reaktion kan også påvises
  • Stærk reagensstabilitet - Opbevares ved 37 ℃ i 1 uge, stabil ydeevne efter gentagen frysning og optøning
  • UDG Pollution Prevention—dUTP/UDG-systemet er tilføjet til systemet for effektivt at forhindre risikoen for aerosolkontamination.
  • Gælder for flere platforme - Velegnet til Bio-Rad CFX96, ABI Q5 og Slan

5.2 Produkt Match

  • Nukleinsyreekstraktionsreagenser: MolPure™ Magnetisk podning viralt DNA/RNA-kit (kat#18300ES)
  • Monkeypox detektionsreagens: Monkeypox Virus Real Time qPCR Kit(Kat#13862ES/Kat#13863ES)
  • Abekopper pseudovirus: Abekopper virus Pseudovirus (kat#12099ES/kat#12100ES)

6. Anbefalede produkter

6.1 Monkeypox Virus Real Time qPCR Kit (Cat#13862ES)

Produktfordele:
Effektiv og bekvem betjening
Høj sensitivitet og god specificitet
Super stabilitet
God repeterbarhed

6.1.1 Caseshow:

  • Super termisk stabilitet til 37 ℃

MPXV blev amplificeret ved at placere Cat#13862ES ved 37 ℃ i 7 dage. Resultaterne viste, at Ct-værdien og fluorescensværdien ikke var signifikant påvirket af 7 dage ved 37 ℃, og den termiske stabilitet var stærk.

Figure 4. Yeasen(Cat#13862ES)37℃ accelerated 7-day stability verification

Figur 4. Yeasen (Cat#13862ES) 37℃ accelereret 7-dages stabilitetsverifikation

  • Super fryse-tø stabilitet

MPXV blev amplificeret ved frysning og optøning af Cat#13862ES ved -20 ℃ i henholdsvis 10 gange, 20 gange og 50 gange.Resultaterne viste, at frysning og optøning 10 gange, 20 gange og 50 gange ved -20 ℃ ikke havde nogen signifikant effekt på Ct-værdien og fluorescensværdien, og fryse- og optøningsstabiliteten var stærk.

Figure 5. Yeasen(Cat#13862ES)-20℃ freeze-thaw stability verification

Figur 5. Yeasen(Cat#13862ES)-20℃ fryse-tø stabilitetsbekræftelse

  • Ultrahøj følsomhed, 1 kopier/μL kan også detekteres

Ved at bruge Yeasen monkeypox-produkt (Cat#13862ESES), blev 1000 kopier/μL, 100 kopier/μL, 10 kopier/μL, 1 kopi/μL og negativ blank (NTC) brugt til at detektere MPXV. Det kan ses, at en enkelt kopi også kan påvises (Ct-værdien er omkring 38), og 48-brønds NTC-testen blev gentaget, med en stabil baseline, negative NTC-toppe og ingen halefænomen, med høj sensitivitet og høj specificitet.

Figure 6. MPXV sensitivity detection

Figur 6. MPXV-følsomhedsdetektion

Figure 7. MPXV specificity detection

Figur 7. MPXV-specificitetsdetektion

  • Reagenser er stabile og reproducerbare

Yeasen monkeypox detektionskittet (Cat#13862ESES) blev udvalgt til at udføre 10 gentagne tests for lave, mellemstore og høje koncentrationer af positive prøver. Resultaterne viste, at CV'et for de positive prøver i FAM-kanalen var mindre end eller lig med 2%, og blindkontrollen havde ingen peaking og intet halefænomen. , god repeterbarhed.

Figure 8. Repeatability Test

Figur 8. Repeterbarhedstest

6.2 Monkeypox Virus Real Time qPCR Kit (UDG Plus)(kat#13863ES)

Produktfordele:

⑴ Effektiv og bekvem betjening
⑵ Høj følsomhed og god specificitet
⑶ Super stabilitet
⑷ God repeterbarhed
⑸ UDG Forureningsforebyggelse

6.2.1 Caseshow:

  • Super termisk stabilitet til 37 ℃

MPXV blev amplificeret ved at placere Cat#13863ES ved 37 ℃ i henholdsvis 7 dage og 14 dage. Resultaterne viser, at efter 7 dage og 14 dage ved 37℃ er der ingen signifikant effekt på Ct-værdien og fluorescensværdien, og den termiske stabilitet er stærk.

Figure 9. Yeasen(Cat#13863ES)37℃ accelerated 7-day, 14-day stability verification

Figur 9. Yeasen(Cat#13863ES) 37℃ accelereret 7-dages, 14-dages stabilitetsverifikation

  • Super fryse-tø stabilitet

Cat#13863ES blev frosset og optøet ved -20 ℃ i 50 gange for at forstærke MPXV. Resultaterne viste, at frysning og optøning ved -20 ℃ i 50 gange ikke havde nogen signifikant effekt på Ct-værdien og fluorescensværdien, og fryse- og optøningsstabiliteten var stærk.

Figure 10. Yeasen(Cat#13863ES)-20℃ freeze-thaw stability verification

Figur 10. Yeasen(Cat#13863ES) -20℃ fryse-tø stabilitetsbekræftelse

  • Høj følsomhed og specificitet

5 kopier/μL MPXV og negativ blindprøve (NTC) blev testet ved hjælp af Yeasen monkeypox-produkt (Cat#13863ESES). Resultaterne viste, at basislinjen var stabil, påvisningshastigheden for FAM var 100 %, den mindste detektionsgrænse var 5 kopier/μL, og under den gentagne 48-brønds test af NTC var basislinjen for FAM- og VIC-kanaler stabil, den negative NTC-top havde ikke noget halefænomen og havde høj følsomhed.

Figure 11.MPXV Sensitivity detection

Figur 11.MPXV Følsomhedsdetektion

Figure 12. MPXV specificity detection

Figur 12. MPXV-specificitetsdetektion

  • God linearitet af reagenser

Den positive skabelon blev fortyndet 10 gange fra koncentrationen på 1×105 kopier/μL, og Yeasen qPCR monkeypox kit (Cat#13863ES) blev brugt til at gentage påvisningen to gange. Logaritmen af ​​det oprindelige kopital er abscissen, og Ct-værdien er ordinaten. Standardkurven blev lavet, og resultaterne viste, at Monkeypox-genets FAM-kanal havde et lineært område på 10~1×105 kopier/μL og R2>0,99, hvilket havde et godt lineært forhold.

Figure 13. Linearity Test

Figur 13. Linearitetstest

  • Stabile og reproducerbare reagenser

Yeasen qPCR monkeypox kit (Cat#13863ES) blev udvalgt til at udføre 10 gentagne tests for lave, medium og høje koncentrationer af positive og 20 gentagne tests for negativ kontrol (NC) og blind kontrol (NTC). Resultaterne viser, at: FAM-kanal CV'et for positive prøver er mindre end 3%, og den negative kontrol og blindkontrol har ingen peaking og intet tailing-fænomen; Ct-værdierne for VIC-kanal NC er alle mindre end 35, CV er mindre end 0,3 %, og NTC har ingen peaking og intet tailing-fænomen, og repeterbarheden er god.

Figure 14. Repeatability Test(FAM)

Figur 14. Repeterbarhedstest (FAM)

Figure 15. Repeatability Test(VIC)

Figur 15. Repeterbarhedstest (VIC)

7. Produktbestilling

Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd., grundlagt i 2014, er en højteknologisk virksomhed, der beskæftiger sig med forskning og udvikling og produktion af værktøjsenzymråmaterialer og antigenantistoffer. Dets produkter omfatter molekylære diagnostiske enzymer, proteiner og antistoffer, der bruges i lægemidler, fødevaresikkerhedstest, avl, retfærdighed og andre industrier. Vi er forpligtet til at give kunder inden for life science produkter og tjenester af høj kvalitet. Retningslinjerne for produktkøb for Monkeypox Virus er som følger:

Tabel 1.Relaterede produkter

Produkttype

Produkt Beskrivelse

Produkt Navn

Artikelnummer

Specifikation

SÆT

Enzym blanding

Monkeypox Virus Real Time qPCR Kit (forespørg)

13862ES03

24T

13862ES48

48T

13862ES59

96T

Monkeypox Virus Real Time qPCR Kit

13863ES25

25T

13863ES60

100T

13863ES80

1000T

Pseudovirus

F3L-gen

Monkeypox virus F3L-Pseudovirus (forespørgsel)

12099ES03

1 ml

12099ES08

5 x 1 ml

B6R Gene

Abekoppevirus B6R-Pseudovirus (spørge)

12100ES03

1 ml

12100ES08

5 x 1 ml

Referencer

[1] Kinesisk center for sygdomsbekæmpelse og -forebyggelse: Sundhedstip til abekopper
[2] CDC:Om Abekopper | Abekopper | Poxvirus | CDC
[3] Yulin Evening News: Kilden til det første abekoppertilfælde på det kinesiske fastland er blevet identificeret! Guangxi Disease Control Nødpåmindelse

Forespørgsel