Er du stadig generet af den lave effektivitet af homolog rekombination af multi-fragment eller super-lange fragment og det lille antal kolonier?

Stadig for bæreren eller fragmentet er mere værdifuld, lavt udbytte, for at spare råvarer, brugen af ​​lille system lav koncentration ligering, men ligering effektiviteten er lav og generet?

YEASEN produkt: Betydeligt forbedret, lav koncentration, lille system og ultralange fragmenter af ligeringseffektiviteten, høj positiv kloningshastighed, hjælper dig til nemt at fuldføre ligering.

Sammenligning af et-trins kloning med traditionelle enzymbegrænsende kloningsmetoder

Produktfordel

Orientering: 1-7 DNA-fragmenter et-trins kloning.

Enkelt: Flere fragmenter kan ligeres i et rør.

Hurtig: Hurtigste ligering på 5 min.

Høj effektivitet: Høj positiv kloningshastighed.

Lille system: Det samlede ligationssystem kan være så lavt som 6 μL.

Overlængde: Over 25 kb (bærer+fragmentlængde) til ligering.

Præstation Vise

• Effektiv rekombination af et enkelt fragment 6 μL lille system

Fig. 1 10 ng enkeltfragmenter med lavt input blev ligeret i den ikke-genoplivningsreceptive celletilstand i det 6 μL lille system.Resultaterne viste, at 10923ES havde bedre ydeevne end konkurrerende produkter med høj ligeringseffektivitet, flere kolonier og en positiv rate på 100 %. AB: Rekonstitueret konverteringsplade. Det molære forhold mellem bærer (10 kb) og indsat fragment (1 kb) var 1:2. C: PCR-identifikation af insertfragment. M: YEASEN 10505ES. Bærevolumen: 40 ng/6 μL Reaktionssystem, reaktionsbetingelser: 50 ℃, 15 min.

• Multi-fragment effektiv rekombination

Fig. 2 Seks fragment (7,6 kb) ligeret. Resultaterne viste, at 10923ES havde bedre ydeevne end konkurrerende produkter med flere kolonier og en positiv rate på 100%. AB: Rekonstitueret konverteringsplade. Det molære forhold mellem bærer (11,6 kb) og indsat fragment (7,6 kb) var 1:2. C: PCR-identifikation af insertfragment. M: YEASEN 10505ES, PCR-længde 2,6 kb. Bærevolumen: 200 ng/20 μL Reaktionssystem, reaktionsbetingelser: 50 ℃, 50 min.

• Lav koncentration multifragment effektiv rekombination

Fig. 3 Liger de fem og seks fragmenter med lav koncentration separat. Resultaterne viste, at 10923ES udviste stabil forbindelse ved lave koncentrationer, med et højt bakterietal og en 100 % positivitet. AB: Rekombinant konverteringsplade. CD: Insertion fragment PCR identifikation elektroforese billede, M: YEASEN 10505ES, PCR længde 2,6 kb.

• Reagensstabilitet

Fig. 4 Efter at have været anbragt ved 37 ℃ i 7 dage viste resultaterne, at 10923ES forblev stabil i forbindelse med binding af de fem og seks fragmenter ved lave koncentrationer. AF: Rekombinant konverteringsplade. GH: Insertionsfragment PCR identifikation elektroforese billede, M: YEASEN 10505ES, PCR længde 2,6 kb.

Kundesag

• Effektiv reorganisering af små systemer

Fig. 5 10923ES blev ligeret til et enkelt fragment i en 10 μL lille reaktionssystem, med en positiv sats på 100 %. A: Rekonstitueret konverteringsplade. B: PCR-identifikation af insertfragment. Bærestørrelse: 5.631 bp; Målfragmentstørrelse: 1.384 bp.

Fig. 6 10 μL Lille system enkelt fragment junction og punkt mutation klon, 100% positiv rate. A & C: Rekombinationstransformationsplader. B: PCR-identifikation af insertfragmenter, bane 1-5 er koloni 1, koloni 2, negativ kontrol, positiv kontrol (genom som skabelon), positiv kontrol (PCR-oprenset fragment som skabelon). D: Elektroforegram af PCR-identifikation af insertfragmenter.

• Effektiv rekombination af korte fragmenter med lav koncentration

Fig. 7 10923ES forbinder fragmenter med lav koncentration. Sammenlignet med konkurrerende produkter var antallet af kolonier højt, og den positive rate (10/11) var > 90,9%. AB: Rekonstitueret konverteringsplade. C: PCR-identifikation af insertfragment. Carrier størrelse: 3.000 bp; målfragmentstørrelse: 441 bp.

• Effektiv og hurtig multi-segment ligering

Fig.8 10923ES fire segment ligering, høj GC og kort segment kombinationsforbindelse, sammenlignet med S mærke, har et højere bakterietal på 10923ES og en positiv rate på 100%. D: Rekombinant konverteringstablet. E: Indsæt fragmentsekventeringsidentifikationskort. F: Sanger-sekventering bekræftede den vellykkede forbindelse mellem vektor og fragmenter, og sekventeringen på forbindelsesstedet var korrekt.

Strength Star Produktanbefaling

10923ES Bestillingskanal

Produktorientering	Name	Art.nr	Sspecifikationer
1 – 7 fragmenter blev sammenføjet i ét trin, og rekombinationsreaktionen blev fuldført inden for de hurtigste 5 min.	Hieff klonTM Universal II One Step Cloning Kit	10923ES20/50	20 T/50 T

Ropstemt Pprodukter

Produktorientering	Name	Art.nr	Sspecifikationer
High-fidelity PCR	2× Hieff CanaceTM AdvanceFast PCR Master Mix (Med farvestof)	10164ES03/08	1 mL/5×1 mL
Hurtig PCR-opgradering, kan være koloni-PCR og egnet til kompleks skabelonamplifikation	2×HieffTM Ultra-Rapid II HotStart PCR Master Mix	10167ES03/08	1 mL/5×1 mL