Beskrivelse
Hifair™ Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus) er et multipleks kvantitativt PCR-kit baseret på RNA som skabelon. I forbindelse med forsøget blev der udført revers transkription og kvantitativ PCR i samme rør, hvilket forenklede den eksperimentelle operation og reducerede risikoen for kontaminering.
I dette kit blev den første streng cDNA syntetiseret effektivt af varmeresistent HifairTM V Revers Transcriptase og kvantitativt amplificeret af UNICON™ HotStart Taq DNA-polymerase. Sættet indeholder hovedsageligt optimeret MP-buffer, enzymblanding osv. Pufferopløsningen indeholder allerede Mg2+ og dNTP. Derudover tilføjes de faktorer, der effektivt kan hæmme den ikke-specifikke PCR-amplifikation og forbedre amplifikationseffektiviteten af flere qPCR-reaktioner, hvilket kan sikre amplifikationseffektiviteten og udføre op til multiple amplifikationsreaktioner. dUTP/UDG-systemet blev tilføjet for effektivt at forhindre risikoen for aerosolkontamination.
Funktioner
1. Ggod alsidighed: Det er velegnet til qPCR-amplifikation og påvisning af nukleinsyrer fra patogene mikroorganismer, humane genomer, planter og andre arter.
2. Høj følsomhed: Det omhyggeligt optimerede buffersystem forbedrer detektionsfølsomheden af skabeloner med lav koncentration op til 250 kopier/ml.
3. dUP/UDG system: dUTP/varmelabilt UDG anti-forureningssystem introduceres for at nedbryde aerosolforurening af produkter effektivt, reducere falsk positiv og sikre autentiske resultater.
4. Støtteing hurtigt program: kompatibelt med hurtigt 40 min program.
5. Super stabilitet: stabile ved 37 ℃ i 14 dage, gentagen frysning og optøning 10 gange.
Komponenter
| Komponenter | Navn | 16630ES60 (100 T) | 16630ES80 (1000 T) | 16630ES92 (10.000 T) |
| 16630-A | 5×Hifair MP Buffer | 500 μL | 5 ml | 50 ml |
| 16630-B | Hifair enzym Blande | 100 μL | 1 ml | 10 ml |
| 16630-C | GC-Enhancer | 500 μL | 5 ml | 50 ml |
Note: 1) 5×HifairTM MP buffer er forkortelsen af HifairTM V Multiplex One Step RT-qPCR Probe Buffer, som inkluderer dNTP'er, dUTP, Mg2+, stabilisatorer, forstærkere og mere.
2) Hifair Enzyme Mix hovedsagelig indeholder varmebestandig HifairTM V revers transkriptase, UNICONTM HotStart Taq DNA-polymerer og UDGase.
3) GC enhancer er valgfri. Find den gratis version af GC enhancer: Kat: 16901ES.
4) 16630-A og 16630-B svarer til 16901-A og 16901-B, hhv.
Specifikationer
| PCR metode | Et trin RT-qPCR |
| Type prøve | RNA |
Opbevaring
Than produkt skulle være gemt på -25°C~-15°C for 1 år.
Figurer
Figur 1. Høj detektionsrate
Instruktioner
1. Reaktion Sammensætning
| Komponenter | Bind (μL) | Endelig koncentration |
| 5×Hifair™ MP buffer | 5 | 1 × |
| Hifair Enzyme Mix | 1 | - |
| GC-Enhancer | 0-5 | - |
| Primerblanding (10 μM) | 0,4 hver | 0,16 μM |
| Probe Mix (10 μM) | 0,2 hver | 0,08 μM |
| RNA | 1-5 | - |
| RNase fri H2O | til 25 | - |
Note:Sørg for at blande godt før brug, undgå for store bobler forårsaget af voldsomme vibrationer.
a) Primerkoncentration: Primer blanding inklusive multiplex primer, afhængig af situationen kan den optimale primerkoncentration være mellem 0,1 og 1,0 μM.
b) Probekoncentration: Probeblanding inklusive multiplex probemærkningsforskel fluorescerende gruppe, afhængigt af situationen kan den optimale probekoncentration være mellem 0,05 og 0.5 μM.
c) Skabelonfortynding: qPCR er meget følsom, og det anbefales at fortynde skabelonen. Kontrol-Ct-værdien er egnet mellem 20 og 35.
d) Systemforberedelse: un hoved med filterelement. Undgå krydskontaminering og aerosolkontamination.
2. Optimeret cykelprotokol
| Reaktionsstadie | Temperatur | Tid | Cyklus | |
| 1 | Omvendt transskription | 50°C-en | 15 min | 1 |
| 2 | Indledende denaturering | 95°C | 5 min | 1 |
| 3 | Amplifikationsreaktion | 95°C | 15 sek | 45 cyklusser |
| 60°Cb | 30 sekc |
Note:a) Romvendt transskription: Temperaturen kan vælge 42°C eller 50°C i 10-15 minutter.
b) Amplifikationsreaktion: Temperaturen justeres i henhold til Tm-værdien af de designede primere.
c) Fluorescenssignalopsamling: Indstil venligst den eksperimentelle procedure i overensstemmelse med kravene i instrumentmanualen.
Betaling og sikkerhed
Dine betalingsoplysninger behandles sikkert. Vi gemmer ikke kreditkortoplysninger og har heller ikke adgang til dine kreditkortoplysninger.
Forespørgsel
Du kan også lide
FAQ
Produktet er kun til forskningsformål og er ikke beregnet til terapeutisk eller diagnostisk brug hos mennesker eller dyr. Produkter og indhold er beskyttet af patenter, varemærker og ophavsrettigheder ejet af Yeasen Biotechnology. Varemærkesymboler angiver oprindelseslandet, ikke nødvendigvis registrering i alle regioner.
Visse applikationer kan kræve yderligere tredjeparts intellektuelle ejendomsrettigheder.
Yeasen er dedikeret til etisk videnskab og mener, at vores forskning bør adressere kritiske spørgsmål og samtidig sikre sikkerhed og etiske standarder.