Beskrivelse
T7 RNA-polymerase anvender dobbeltstrenget DNA indeholdende T7-promotorsekvensen (5'-TAATACGACTCACTATAG*-3') som skabelon og NTP'er som substrater til at syntetisere RNA komplementært til den omvendte DNA-streng nedstrøms for promotoren. Både lineært dobbeltstrenget DNA med stumpe ender eller 5'-udhæng kan tjene som skabelonsubstrater for T7 RNA-polymerase, hvilket betyder, at lineariserede plasmider eller PCR-produkter kan anvendes som skabeloner til in vitro RNA-syntese.
Dette sæt anvender et sandwich-enzym-linked immunosorbent assay (ELISA) princip til at detektere resterende T7 RNA polymerase. T7 RNA-polymerasestandarder og testprøver tilsættes til mikropladebrønde, der er præcoated med anti-T7 RNA-polymeraseantistoffer (36705-A). Fortyndede biotin-mærkede T7 RNA-polymerase-detektionsantistoffer (36705-C) tilsættes derefter, efterfulgt af Streptavidin-HRP (SA-HRP) (36705-D), der danner et antistof + antigen + antistof-biotin + SA-HRP-kompleks. Efter vask tilsættes TMB-substrat (36705-H) til farveudvikling. TMB katalyseres af HRP til overgang fra farveløs til blå og endelig til gul ved tilsætning af stopopløsning (36705-I). Intensiteten af den gule farve er positivt korreleret med mængden af T7 RNA-polymerase detekteret i prøven.
Komponenter
| Ingen. | Navn | 36705ES48 | 36705ES96 |
| 36705-A | Anti-T7 RNA Polymerase coatede mikrotiterstrimler | 48 T | 96 T |
| 36705-B* | Standard: T7 RNA polymerase | 1 hætteglas | 2 hætteglas |
| 36705-C | Opdagelse Antistof:biotin-konjugeret Antistoffer | 60 μL | 120 μL |
| 36705-D | Streptavidin-HRP | 30 μL | 60 μL |
| 36705-E | Fortyndingsbuffer 1 | 25 ml | 45 ml |
| 36705-F | Vaskebufferkoncentrate (20×) | 25 ml | 50 ml |
| 36705-G | Fortyndingsbuffer 2 | 15 ml | 30 ml |
| 36705-H | TMB substrat | 8 ml | 15 ml |
| 36705-I | Stop Løsning | 5 ml | 10 ml |
| 36705-J | Pladeforsegler | 3 hver | 5 hver |
*Standard 36705-B er et frysetørret pulver.
Kompatibel med T7 RNA polymerase: 10625, 10628 og 10629.
Valideringsdata
Tabel 1. Linearitetsområde: 1~32 ng/mL ，R2=0,999 ，CV≤5 %.
| Std | Konk.( ng/ml) | AVG( ng/ml) | Genopretning(%） | CV % |
| Std1 | 32 | 31.965 | 99,9 % | 2,2 % |
| Std2 | 16 | 16.070 | 100,5 % | 5,0 % |
| Std3 | 8 | 7,812 | 97,7 % | 2,1 % |
| Std4 | 4 | 4,192 | 104,8 % | 0,8 % |
| Std5 | 2 | 2,020 | 101,8 % | 3,5 % |
| Std6 | 1 | 1,173 | 117,3 % | 0,0 % |
| NC | 0 | / | / | / |
Tabel 2. Høj specificitet
| Protein navn | Konk. | Opdaget eller ej |
| Ppositiv Ckontrol | 1 ng/ml | Opdaget |
| Negativ Ckontrol | 0 ng/ml | nd |
| UltraNuclease | 10 μg/ml | nd |
| Salt Aktiv UltraNuclease | 10 μg/ml | nd |
| DNase jeg | 10 μg/ml | nd |
| Murin RNase-hæmmer | 10 μg/ml | nd |
| Vaccinia capping enzym | 10 μg/ml | nd |
| Uorganisk pyrophosphatase | 10 μg/ml | nd |
| mRNA Cap 2 ´-O-Methyltransferase | 10 μg/ml | nd |
| 1% BSA | 10 mg/ml | nd |
Tabel 3. LOQ: Kvantificeringsgrænsen for dette produkt bestemmes ved at fortynde standardkurvens laveste koncentrationspunkt, hvor variationskoefficienten (CV) ved den laveste koncentration er mindre end 20 %. Dette er defineret som grænsen for kvantificering, som er 1 ng/ml.
| Std6 teoretisk værdi (ng/ml) | Std 6 testmiddelværdi (ng/ml) | Test gentagelser | CV % | Genopretning |
| 1 | 0,858 | 24 | 12,6 % | 85,8 % |
Tabel 4. LOD: Detektionsgrænsen for dette produkt er defineret som standardkoncentrationen svarende til den gennemsnitlige detektionsværdi for den negative kontrol (NC) plus to gange standardafvigelsen. Ved at måle 24 NC-standarder, beregne middelværdi og standardafvigelse, bestemmes detektionsgrænsen til at være 0,318 ng/mL.
| Middelværdi(OD） | SD(OD） | Middelværdi +2SD (OD) | Middelværdi +2SD (ng/ml) |
| 0,0527 | 0,0038 | 0,0604 | 0,3176 |
Forsendelse og opbevaring
Opbevares ved 2-8°C. Holdbarheden er 1 år uåbnet og 6 måneder efter åbning.
Ved modtagelse af produktet skal du kontrollere, om alle komponenter er komplette, og straks opbevare dem ved den tilsvarende opbevaringstemperatur.
Betaling og sikkerhed
Dine betalingsoplysninger behandles sikkert. Vi gemmer ikke kreditkortoplysninger og har heller ikke adgang til dine kreditkortoplysninger.
Forespørgsel
Du kan også lide
FAQ
Produktet er kun til forskningsformål og er ikke beregnet til terapeutisk eller diagnostisk brug hos mennesker eller dyr. Produkter og indhold er beskyttet af patenter, varemærker og ophavsrettigheder ejet af Yeasen Biotechnology. Varemærkesymboler angiver oprindelseslandet, ikke nødvendigvis registrering i alle regioner.
Visse applikationer kan kræve yderligere tredjeparts intellektuelle ejendomsrettigheder.
Yeasen er dedikeret til etisk videnskab og mener, at vores forskning bør adressere kritiske spørgsmål og samtidig sikre sikkerhed og etiske standarder.
