Zellkulturen sind ein Eckpfeiler vieler Forschungsanwendungen, von der Arzneimittelentwicklung bis zur Gentherapie. Allerdings kann die Erhaltung gesunder, proliferierender Kulturen ohne den richtigen Ansatz und die richtigen Werkzeuge eine Herausforderung sein. Egal, ob Sie ein erfahrener Wissenschaftler oder ein Neuling in der Zellkultur sind, die Optimierung jedes einzelnen Prozessschritts kann den entscheidenden Unterschied ausmachen. In diesem Leitfaden führen wir Sie durch fünf wichtige Tipps, um sicherzustellen, dass Ihre Zellkulturen gedeihen, von der Verdauung bis zur Kontaminationsprävention.
1. Perfektionieren Sie Ihre Zellverdauung
Die Zellverdauung ist ein entscheidender Schritt bei Zellkulturexperimenten, da sie die Ablösung der Zellen von der Kulturoberfläche und ihre Trennung in eine Einzelzellsuspension zur Subkultivierung und anschließenden Analyse erleichtert. Die Wahl des richtigen Verdauungsenzyms kann die Effizienz der Zelltrennung verbessern, Zellschäden reduzieren und einen reibungslosen Versuchsverlauf gewährleisten. Um Ihnen bei der Auswahl des für Ihre Anforderungen am besten geeigneten Verdauungsenzyms zu helfen, haben wir einen Leitfaden zu mehreren häufig verwendeten Enzymprodukten und ihren Eigenschaften zusammengestellt. Sie können das am besten geeignete Produkt basierend auf Zelltyp, Versuchsanforderungen und nachgelagerten Anwendungen auswählen.
Häufige Verdauungsenzyme
- Trypsin (wird zur Hydrolyse interzellulärer Proteine verwendet)
- Rekombinantes Trypsin (frei von Verunreinigungen tierischen Ursprungs, geeignet für biopharmazeutische Anwendungen)
- Kollagenase (wird zum Abbau von Kollagenfasern verwendet, ideal für die Gewebeverdauung)
- Zusammengesetztes Trypsin (wie Accutase, das Zelloberflächenantigene besser konserviert)
- Trypsin-Alternativen (wie TrypLE™, perfekt für serumfreie Zellkulturen)
- Dispase II (zur Trennung verschiedener Gewebe und Zellen).
Jedes Enzym hat seine eigenen Anwendungen und Vorteile und die Auswahl des richtigen Enzyms kann die experimentelle Effizienz und die Qualität Ihrer Ergebnisse erheblich verbessern.
| Produktname | Katzennummer | Spezifikation |
| Leistung™l Trypsin-EDTA (0,25 %), NEIN Phenolrot | 40123ES60 | 100 ml |
| Leistungszelle™ Trypsin-kein EDTA (0,25%), kein Phenolrot | 40124ES60 | 100 ml |
| Leistungszelle™ Trypsin (0,25%), Phenolrot | 40126ES60 | 100 ml |
| Leistungszelle™ Trypsin-EDTA (0.25%), Phenolrot | 40127ES60 | 100 ml |
| Trypsin 1:250 (Pulver) | 40101ES25 | 25 g |
| Leistungszelle™ Rekombinantes Trypsin（Pulver） | 40512ES10/60 | 10 mg/100 mg |
| 20416ES60 | 100 μG | |
| PerfCel Tryzyme™ Express-Enzym (1X), Phenolrot | 40134ES60 | 100 ml |
| PerfCel Tryzyme™ Express Enzym (1X), NEIN Phenolrot | 40135ES60 | 100 ml |
| ACCUTASE Zelldissoziationslösung | 40506ES60 | 100 ml |
| Dispase II | 40104ES60/80 | 100 mg/1 g |
2. Schaffen der idealen Kulturumgebung
Eine gesunde Kultur beginnt mit der richtigen Umgebung. Dazu gehören eine geeignete Temperatur, ein geeigneter pH-Wert und optimale Medien für Ihren Zelltyp.
Serumfreie Zellkultur hat sich als zentrale Technologie in der biologischen Forschung herausgestellt, die Wiederholbarkeit, Konsistenz und ethische Standards gewährleistet. Herkömmliche Zellkulturen basieren auf fötalem Rinderserum (FBS), was zu unterschiedlichen Versuchsergebnissen und ethischen Risiken bei der Verwendung tierischen Ursprungs führt. Um diese Herausforderungen zu bewältigen, entscheiden sich viele Forscher zunehmend für serumfreie Kulturmedien.
In der immunologischen Forschung Lymphozytenkultur spielt eine entscheidende Rolle, insbesondere in den Bereichen Immunantwort, Impfstoffentwicklung und Krebsimmuntherapie. Als zentrale Bestandteile des Immunsystems benötigen Lymphozyten spezielle Kulturbedingungen, um sich in vitro zu vermehren und zu aktivieren.
Zusätzlich, Organoidkultur stellt einen weiteren wichtigen Fortschritt in der Zellkulturtechnologie dar. Organoide sind dreidimensionale Zellstrukturen, die menschliche Gewebe und Organfunktionen in vitro simulieren können und so eine neue Forschungsplattform für Krankheitsmodelle, Arzneimittelscreening und regenerative Medizin bieten. Die dreidimensionale Struktur von Organoiden bildet die Komplexität und physiologischen Funktionen menschlicher Organe besser nach und ist zu einem wichtigen Instrument für die Untersuchung von Organentwicklung, Krankheitsmechanismen und therapeutischen Reaktionen geworden.
| Produktname | Katzennummer | Spezifikation |
| CelCulSF™ Insekten-Zellkulturmedium（Serumfrei） | 40140ES | 1000 ml |
| CelCulSF™ 293 Zellkulturmedium（Serumfrei） | 40141ES | 1000 ml |
| CelCulSF™ Lymphozyten-Kulturmedium（Serumfrei） | 40142ES | 1000 ml |
| CelCulSF™ Hybridom-Zellkulturmedium（Serumfrei） | 40143ES | 1000 ml |
| CelCulSF Mesenchymale Stammzelle（MSC）Kulturmedium（Serumfrei） | 40144ES | 500 ml |
| CelCulSF™ Adhärentes Zellkulturmedium（Serumreduziert） | 40145ES | 1000 ml |
| Cebrary® Wachstumsmedium für intestinale Organoide (Maus) | 41426ES60/76 | 100/500 ml |
| Cebrary® Wachstumsmedium für Organoide von Darmkrebs (Mensch) | 41427ES50/60/76 | 50/100/500 ml |
| Cebrary® Magenkrebs-Organoid-Wachstumsmedium (Mensch) | 41428ES50/60/76 | 50/100/500 ml |
| Cebrary® Organoid-Wachstumsmedium für Leberkrebs (Mensch) | 41429ES50/60/76 | 50/100/500 ml |
| Cebrary® Brustkrebs-Organoid-Wachstumsmedium (Mensch) | 41430ES50/60/76 | 50/100/500 ml |
| Cebrary® Lungenkrebs-Organoid-Wachstumsmedium (Mensch) | 41431ES50/60/76 | 50/100/500 ml |
| Cebrary® Speiseröhre Wachstumsmedium für Krebs-Organoide (Mensch) | 41432ES50/60/76 | 50/100/500 ml |
| Cebrary® Eierstockkrebs-Organoid-Wachstumsmedium (Mensch) | 41433ES50/60/76 | 50/100/500 ml |
| Cebrary® Organoid-Wachstumsmedium für Bauchspeicheldrüsenkrebs (Mensch) | 41434ES50/60/76 | 50/100/500 ml |
3.Effiziente Transfektion für hochwertige Genexpression
Die Zelltransfektion ist eine entscheidende Technik in der biomedizinischen Forschung, da sie die Einführung exogener Nukleinsäuren (wie DNA, mRNA, siRNA und miRNA) in Zellen für Genexpression, Silencing oder Funktionsstudien ermöglicht. Bei unterschiedlichen Zelltypen und Nukleinsäuren ist die Auswahl des richtigen Transfektionsreagenz für erfolgreiche Experimente von entscheidender Bedeutung.
Chemische Transfektionsreagenzien, einschließlich liposomale, PEI- und Calciumphosphat-basierte Formulierungen, bieten jeweils einzigartige Vorteile.
| Katzennummer | Produktname | Nukleinsäure | Anwendung |
| 40802ES | DNA | Hochleistungs-Liposomen-Transfektionsreagenz | |
| 40804ES | LV | Verbessert die Fähigkeit zur lentiviralen Infektion. | |
| 40806ES | siRNA, miRNA, ASO | siRNA- und miRNA-spezifische Transfektionsreagenzien mit hoher Knockdown-Effizienz. | |
| 40808ES | DNA, siRNA, miRNA | Verbessertes Liposom-Transfektionsreagenz, das DNA- und RNA-Transfektionen in verschiedenen Zelltypen durchführen kann und weiterhin gute Wirkungen auf schwer zu transfizierende Zellen zeigt. | |
| 40809ES | mRNA | mRNA-spezifisches Transfektionsreagenz mit hoher Transfektionseffizienz in einer Vielzahl von Zelltypen. | |
| 40815ES | DNA | Vielseitig einsetzbar für die Proteinexpression und Virusverpackung (Pulverform). | |
| 40816ES | Hieff Trans®Polyethylenimin linear (PEI) MW40000（schnelle Lyse） | DNA | |
| 40820ES | DNA | Spezielle Transfektionsreagenzien für die Virusverpackung, die höhere Erträge bei der Virusverpackung von AAV und LV erzielen können | |
| 40821ES | DNA | ||
| 40823ES | DNA | Die höchste Transfektionseffizienz. Besonders geeignet für die Produktion von AAV in Suspensionskultur, wodurch höhere Erträge erzielt werden. |
4. Kryokonservierung Ihrer Zellen für die Langzeitverwendung
Das Einfrieren von Zellen ist eine wichtige Technik für die langfristige Konservierung von Zellen und dient beispielsweise der Vermeidung von Kontaminationen, der Aufrechterhaltung experimenteller Konsistenz, der Erleichterung des Versands und der Einrichtung von Zellbanken. Zu den Hauptrisiken beim Einfrieren gehören Eiskristallbildung und Lösungsschäden. Um diese Risiken zu minimieren, ist der Einsatz von langsamen Einfrier- und schnellen Auftauprotokollen unerlässlich. Kryoprotektiva wie Glycerin oder Dimethylsulfoxid (DMSO) werden häufig verwendet, um die Bildung von Eiskristallen und osmotischen Stress zu reduzieren.
| Produktname | Katzennummer | Spezifikation |
| Einfrieren von Säugetierzellen im CellStore | 40128ES50 | 5×10 ml |
| Einfrieren von Säugetierzellen | 40128ES60 | 100 ml |
| Insektenzelle Lagern Einfrieren | 40129ES50 | 5×10 ml |
| Insektenzelle Lagern Einfrieren | 40129ES60 | 100 ml |
| Serumfreies Zellgefriermedium | 40151ES | 50 ml/100 ml |
| Serumfreies Zellgefriermedium (DMSO-frei) | 40152ES | 100 ml |
| Serumfreies Zellgefriermedium (für Stammzellen) | 40153ES | 100 ml |
| Serumfreies Zellgefriermedium (für Stammzellen, DMSO-frei) | 40154ES | 100 ml |
5. Kontaminationsprävention für gesunde Kulturen
Kontamination ist ein weit verbreitetes Problem bei Zellkulturen und führt häufig zu beeinträchtigten Ergebnissen und vergeudeter Forschungszeit. Das Erkennen der verschiedenen Kontaminationsarten ist für eine wirksame Vorbeugung und Beseitigung unerlässlich.
Gemeinsame Zelle Verunreinigungen
- Bakterien
- Pilze
- Mykoplasmen
- Protozoen
- schwarze Flecken
- Viren
- artenübergreifend
Zu den vorbeugenden Maßnahmen gehören der Einsatz von Antibiotika, die regelmäßige Desinfektion von Geräten, die Einhaltung steriler Techniken und die Aufrechterhaltung sauberer Arbeitsbereiche. Bei Feststellung einer Kontamination ist es im Allgemeinen ratsam, die betroffenen Kulturen zu verwerfen, es sei denn, sie sind selten oder wertvoll. In solchen Fällen sollten Schritte unternommen werden, um die Verunreinigung zu beseitigen. Es wird empfohlen, Backup-Zelllinien zu etablieren oder neue Kulturen zu erwerben.In bestimmten Situationen können spezielle Behandlungen gegen bestimmte Verunreinigungen dabei helfen, Zellkulturen wiederherzustellen. Die Einhaltung der richtigen Hygiene, die strikte Trennung der Geräte und die Aufrechterhaltung einer sterilen Umgebung sind entscheidend, um Kontaminationen zu verhindern und erfolgreiche Zellkulturexperimente sicherzustellen.
| Typ | Produktname | Katzennummer | Spezifikation |
| Antibakteriell | Penicillin-Streptomycin (100×), Geeignet für Zellkultur | 60162ES76 | 100 ml |
| 60230ES07/60 | 3.2/100 g | ||
| Gentamycinsulfatsalz | 60214ES03/08/25 | 1/5/25 g | |
| Metronidazol | 60223ES25/60 | 25/100 mg | |
| Antimykotisch | Amphotericin B | 60238ES01/03 | 100 mg/1 g |
| Nystatin | 60219ES08 | 5 g | |
| 60231ES03/08 | 1/5 mg | ||
| Mykoplasmen-Nachweis | 40601ES10/20 | 10 / 20 Tests | |
| 40612ES25/60 | 25/100 T | ||
| Mykoplasmen-Entfernung | MycAway™ Spray (gebrauchsfertig) | 40605ES02/03/08 | 02.01.10×500 ml |
| MycAway™ Behandlung (1000×) - Mycoplasma Elimination Reagenz | 40607ES03/08 | 1/5 ml | |
| MycAway™ Prophylaktisch (2000×) - Mykoplasma-Präventionsreagenz | 40608ES03/08 | 1/5 ml | |
| 40609ES60 | 100 ml | ||
| 40610ES60 | 100 ml |
Abschluss
Die Optimierung von Zellkulturprozessen ist für die Erzielung zuverlässiger und reproduzierbarer Ergebnisse von entscheidender Bedeutung.Von der Auswahl der richtigen Enzyme für die Verdauung bis zur Vermeidung von Verunreinigungen ist jeder Schritt im Arbeitsablauf wichtig. Durch den Einsatz hochwertiger Reagenzien und Techniken von
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