---Beseitigung bakterieller Hintergrundstörungen und RNase-Kontamination

im Erregernachweis auf einen Schlag!

RNase-Inhibitor (RNase-Inhibitor, abgekürzt RNasin) kann sich durch nicht-kovalente Wechselwirkungen spezifisch an RNase binden und einen Komplex bilden, wodurch RNase inaktiviert und die Integrität der RNA bewahrt wird. Es wird häufig in Methoden zur Krankheitserregererkennung wie RT-qPCR, mNGS und tNGS verwendet. Beim Nachweis von Krankheitserregern ist es von entscheidender Bedeutung, die bakterielle Hintergrundkontamination molekularer Enzyme streng zu kontrollieren. Wenn molekulare Enzyme durch Hintergrundbakterien gestört werden, können sie Zielnukleinsäuren mit geringer Häufigkeit überschatten oder zusammen mit ihnen nachgewiesen werden, was die Interpretation der Ergebnisse beeinträchtigt.

Yeasen RNase-Inhibitor mit extrem niedrigem Restgehalt

Yeasen UCF.ME® Murine RNase Inhibitor (Cat#14672ES/14673ES/14674ES) ist ein rekombinanter, aus Mäusen stammender RNase-Inhibitor, der in löslicher Form aus E. coli exprimiert und gereinigt wird. Er besitzt die Fähigkeit, verschiedene Arten von RNasen, einschließlich RNase A, B und C, breit zu hemmen. Dieses Produkt wurde mit RT-PCR und RT-qPCR getestet und ist mit herkömmlichen Reversen Transkriptasen und einer Vielzahl von DNA-Polymerasen kompatibel. Im Vergleich zu aus Menschen stammenden RNase-Inhibitoren fehlen dem Yeasen UCF.ME® Murine RNase Inhibitor die beiden Cysteinreste, die in menschlichen Proteinen hochempfindlich auf Oxidation reagieren, und bietet daher eine höhere antioxidative Aktivität. Er eignet sich besonders für Experimente, die empfindlich auf hohe DTT-Konzentrationen reagieren, wie z. B. qPCR.

Darüber hinaus weist der Yeasen UCF.ME® Murine RNase Inhibitor im Vergleich zu herkömmlichen RNase-Inhibitoren (Kat.-Nr. 10603ES/10610ES/14671ES) geringere Restmengen genomischer Wirts-DNA auf, was bei der Beseitigung bakterieller Hintergrundinterferenzen bei der Krankheitserregererkennung hilft und die Genauigkeit der Erkennung verbessert.

Produkteigenschaften

  • Extrem niedrige Restwerte: E. coli-DNA-Rückstandsgehalt < 0,1 Kopien/100 U, geeignet für Anwendungen mit strengeren Anforderungen an die Hintergrundbakterien.
  • Breitband-RNase-Hemmaktivität: Kann RNasen einschließlich RNase A, RNase B, RNase C und andere hemmen.
  • Kompatibel mit einem breiten Spektrum an Reaktionsbedingungen: Aktiv unter pH-Bedingungen von 5,0 bis 9,0 und Temperaturen von 25 °C bis 60 °C, geeignet für thermophile Reverse Transkriptasen.
  • Kompatibel mit einem breiten Spektrum nachgelagerter Experimente: Keine Auswirkungen auf die enzymatische Aktivität von SP6-, T7- oder T3-RNA-Polymerasen, AMV-, M-MLV-Reverse-Transkriptasen und Taq-DNA-Polymerasen.
  • Stabilität von Charge zu Charge: Die ultrareine Produktionsplattform für molekulare Enzyme UCF.ME® mit strenger Qualitätskontrolle gewährleistet die Einheitlichkeit, Stabilität und pünktliche Lieferung des Produkts.

Produktleistung

1)Keine Exonuklease, kein Inzisionsenzym und keine RNase Rückstand

Abbildung 1. Erkennung von Nuklease-, Nicking-Enzym- und RNase-Resten im UCF.ME® Murine RNase Inhibitor.

Hinweis: N steht für die Negativkontrolle; 1, 2 und 3 stehen für drei Sätze paralleler Experimente.

2) Der Gehalt an genomischer DNA von E. coli beträgt weniger als 0,1 Kopien/100 U und ist damit deutlich niedriger als bei der herkömmlichen Version.

Durch die Durchführung einer Erkennung von Rückständen der genomischen DNA des Wirts (E. coli) an verschiedenen Chargen des UCF.ME® Murine RNase Inhibitor und einem Vergleich mit den Wirtsrückstandswerten herkömmlicher Murine RNase Inhibitoren zeigen die Ergebnisse, dass die Rückstände der genomischen DNA des Wirts des UCF.ME® Murine RNase Inhibitors unter 0,1 Kopien/100 U liegen und damit erheblich niedriger sind als bei der herkömmlichen Version.

Abbildung 2: Vergleich der Ergebnisse der E. coli-Genomrückstandserkennung zwischen UCF.ME®-MRT und konventionelles MRT.

3) Die RNase-Hemmfähigkeit ist der importierter Marken deutlich überlegen.

Unter Verwendung von Gesamt-RNA als Vorlage wurde die RT-qPCR-Reaktion mit dem Hifair® V Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus) (Cat#13650ES) durchgeführt, um die RNaseA-Verdauungsfähigkeit des UCF.ME® Murine RNase Inhibitors zu überprüfen. Die Ergebnisse zeigten, dass die hemmende Wirkung von Yeasen UCF.ME® MRI auf RNaseA der ähnlicher internationaler Konkurrenzprodukte deutlich überlegen ist.

Abbildung 3: Validierung der RNase-Hemmfähigkeit von UCF.ME® MRI

Hinweis: Yeasen UCF MRI: 8 U UCF.ME® MRI + 80 ng RNaseA; Yeasen MRI: 8 U MRI + 80 ng RNaseA; Wettbewerber N*: 8 U eines ähnlichen Wettbewerbsprodukts + 80 ng RNaseA; Kontrolle: Kein MRI und keine RNaseA.

Produktempfehlung

Typ

Name

Katze

Ultra-saubere PCR-Einzelenzymserie mit ultra-niedrigen Wirtsrückständen

Hieff UCF.ME® Hotstart Sensitive Taq DNA-Polymerase (5 U/μL)

14314ES

Hifair UCF.ME® V Reverse Transkriptase (200 U/μL)

14608ES

UCF.ME® Uracil-DNA-Glykosylase (UDG/UNG), hitzelabil, 1 U/μL

14466ES

UCF.ME® Murine RNase Inhibitor (40 U/µL)

14672ES

Hochleistungs-PCR-Monoenzymserie

Hieff UNICON® Hotstart E-Taq DNA-Polymerase, 5 U/μL

10726ES

Hifair® V Reverse Transkriptase (200 U/μL)

11300ES

Uracil-DNA-Glykosylase (UDG/UNG), hitzelabil, 1 U/μL

10303ES

Muriner RNase-Inhibitor (40 U/µL)

10603ES

dNTP-Mix (je 25 mM)

10125ES

Lyo-fähig PCR-Monoenzymserie

Hieff UNICON® HotStart E-Taq DNA-Polymerase, Glycerin-frei (5U/μL)

14316ES

Hifair® V Reverse Transkriptase, Glycerin-frei (600 U/μL)

11301ES

Uracil-DNA-Glykosylase (UDG), hitzelabil (1 U/μL, Glycerin-frei)

10707ES

Murine RNase Inhibitor (200 U/µL, Glycerin-frei)

10703ES

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